目的 綜述Wnt/β-catenin及NF-кB信號通路在椎間盤退變過程中作用機制的研究進展。 方法 查閱Wnt/β-catenin及NF-кB信號通路在椎間盤退變過程中作用的相關文獻，并進行分析總結。 結果 Wnt/β-catenin及NF-кB信號通路在椎間盤退變過程中均被激活，且存在相互作用，但是它們在椎間盤退變過程中的具體作用機制以及相互作用的中間介質尚不清楚。 結論 Wnt/β-catenin及NF-кB信號通路在椎間盤退變過程中的作用仍需深入研究。
目的 探討Galectin-3、Fascin-1和β-catenin蛋白在結直腸腺癌（colorectal carcinoma, CRC）組織中的表達及其與臨床病理特征的關系。方法 應用微波-EliVisionTM （MW-EliVisionTM）免疫組織化學染色技術檢測60例CRC、30例結直腸腺瘤和30例正常結直腸黏膜組織中Galectin-3、Fascin-1和β-catenin蛋白的表達，分析其與CRC臨床病理特征的關系。結果 Galectin-3、Fascin-1和β-catenin蛋白表達陽性率在CRC組織中分別為68.3%（41/60）、53.3%（32/60）和81.7% （49/60）；在腺瘤組織中分別為46.7% （14/30）、30.0% （9/30）和43.3%（13/30）； 在正常黏膜組織中分別為20.0% （6/30）、3.3% （1/30）和13.3% （4/30），三者在三種組織中表達陽性率間的差異均有統計學意義（P＜0.05）。三者的表達與CRC 的TNM分期、浸潤程度和淋巴結轉移有關（P＜0.05, P＜0.01）； Galectin-3和β-catenin蛋白的表達與CRC分化程度有關（P＜0.05），而Fascin-1蛋白表達與CRC分化程度無關（P＞0.05）；三者的表達均與患者年齡、性別及腫瘤大小無關（P＞0.05）。 Galectin-3蛋白與Fascin-1和β-catenin蛋白表達呈正相關（r=0.728，P＜0.01；r=0.696，P＜0.01）； β-catenin蛋白與Fascin-1蛋白表達呈正相關（r=0.507，P＜0.01）。結論 Galectin-3、Fascin-1和β-catenin蛋白在CRC組織中的高表達與其高侵襲能力和淋巴結轉移有一定相關性，可作為潛在預測結直腸癌浸潤和轉移的指標。
目的 檢測胰腺癌組織中的 CXCR4 和β-catenin的表達，并探討兩者的相互關系及其在胰腺癌侵襲和轉移中的臨床意義。方法 應用免疫組化SP法對48例胰腺癌及20例正常胰腺組織中的CXCR4和 β-catenin 蛋白進行檢測，并結合臨床資料進行分析，采用Kaplan-Meier法分析目標蛋白的表達與臨床預后的關系，2組間的生存率曲線比較的假設檢驗采用Log-rank法； 多因素分析采用Cox比例風險回歸模型。結果 CXCR4與β-catenin在胰腺癌組織中的表達陽性率分別為85.4%(41/48)和75.0%(36/48)。CXCR4與β-catenin的共表達率為70.8%（34/48）。CXCR4的陽性表達與淋巴結轉移、TNM分期有關（P值分別為0.012、0.005），β-catenin的陽性表達與淋巴結轉移有關(P=0.047)。Kaplan-Meier生存曲線提示CXCR4陽性表達是胰腺癌預后差的一個指標。Cox多因素方差分析提示CXCR4、TNM分期、淋巴結轉移是影響胰腺癌預后的獨立因素。結論 胰腺癌中 CXCR4 及β-catenin均異常表達，與胰腺癌的生物學效應密切相關； CXCR4的異常表達可能是胰腺癌侵襲、轉移的分子機理之一。
目的 探討Wnt/β-catenin信號通路在大鼠激素性股骨頭缺血性壞死（steroid-induced avascular necrosis of femoral head，SANFH）中的作用。 方法 12月齡清潔級雄性SD大鼠72只，體質量 200～230 g，隨機分為對照組（A組，n=24）、模型組（B組，n=24）和干預組（C組，n=24）。B、C組大鼠采用脂多糖聯合甲潑尼龍法制備SANFH模型；C組在第1次注射甲潑尼龍時開始肌肉注射人重組分泌型卷曲相關蛋白1（secreted frizzled related protein 1，SFRP1）[1 μg/（kg·d）]，持續30 d。A組于B組各注射時間點同法給予等量生理鹽水。觀察B、C組動物造模期間以及造模后一般情況。于末次注射甲潑尼龍后2、4、8 周，各組取8只動物雙側股骨頭標本行HE染色并計算空骨陷窩率，TUNEL染色并計算細胞凋亡率，免疫組織化學染色及Western blot 檢測活性β-catenin、c-Myc表達情況。 結果 B、 C組造模期間共6只動物死亡，均對應補充；其余動物均存活至實驗完成。組織學觀察示，A組為正常骨組織結構；B、C組隨時間延長均出現骨質紊亂、骨小梁斷裂等骨壞死表現。各時間點C組空骨陷窩率及細胞凋亡率均高于A、B組，B組高于A組，比較差異均有統計學意義（P < 0.05）。免疫組織化學染色及Western blot檢測示，各時間點C組活性β-catenin及c-Myc表達水平均低于A、B組，B組低于A組，比較差異均有統計學意義（P < 0.05）。 結論 Wnt/β-catenin信號通路異常參與了大鼠SANFH早期病變，作用機制可能與其調控c-Myc表達，導致骨細胞凋亡有關。
目的探討白藜蘆醇（resveratrol，RES）對退變髓核細胞（nucleus pulposus cells，NPC）細胞外基質（extracellular matrix，ECM）表達的調控作用及其相關分子機制。方法選取臨床上接受椎間盤摘除術的 10 例患者，其中 5 例為年輕脊柱爆裂骨折患者，作為對照組；余 5 例為老年腰椎間盤突出癥患者，作為退變組。取兩組患者髓核組織，免疫組織化學染色比較 β-catenin 的原位表達，Western blot 檢測 β-catenin、Ⅱ型膠原和聚集蛋白聚糖（Aggrecan）蛋白表達。取退變組髓核組織分離、培養 NPC，分別用 IL-1β 單獨（B 組）或聯合 RES（C 組）刺激第 3 代 NPC，并設未刺激細胞作為空白對照組（A 組），Western blot 檢測Ⅱ型膠原和 Aggrecan 蛋白表達。進一步采用小干擾 RNA（small interfering RNA，siRNA）靶向沉默 SIRT1 和 β-catenin 后，采用 Western blot、實時熒光定量 PCR 檢測 β-catenin、SIRT1 蛋白和基因表達。用完全培養基（1 組）、IL-1β（2 組）、RES+IL-1β（3 組）、SIRT1-siRNA+RES+IL-1β（4 組）刺激第 3 代 NPC 培養 24 h 后，細胞免疫熒光染色檢測 β-catenin 核轉位情況；用完全培養基（Ⅰ組）、IL-1β（Ⅱ組）、IL-1β+β-catenin-siRNA（Ⅲ組）、IL-1β+RES（Ⅳ組）、IL-1β+RES+SIRT1-siRNA（Ⅴ組）刺激第 3 代 NPC 培養 24 h 后，采用 Western blot 檢測Ⅱ型膠原和 Aggrecan 蛋白表達。結果免疫組織化學染色及 Western blot 檢測示，與對照組比較，退變組髓核組織中 β-catenin 陽性表達的細胞比例顯著升高（t=4.616，P=0.010）；β-catenin 蛋白相對表達量顯著升高，Ⅱ型膠原和 Aggrecan 蛋白相對表達量顯著下降（P<0.05）。細胞學實驗發現，B 組 β-catenin 蛋白相對表達量顯著高于 A、C 組，Ⅱ型膠原和 Aggrecan 相對表達量顯著低于 A、C 組（P<0.05）。siRNA 轉染后，Western blot 檢測顯示 SIRT1、β-catenin 蛋白表達顯著降低（P<0.05）。細胞免疫熒光染色結果進一步提示與 3 組相比，4 組 SIRT1 被 siRNA 沉默后，RES 減弱的 β-catenin 核轉位現象加劇。Western blot 檢測示，Ⅱ組Ⅱ型膠原和 Aggrecan 蛋白表達較Ⅰ組明顯降低（P<0.05）；Ⅲ組 NPC 轉染 β-catenin-siRNA 后，IL-1β 對 ECM 的降解作用被明顯抑制，Ⅱ型膠原和 Aggrecan 蛋白表達較Ⅱ組明顯升高（P<0.05）；Ⅴ組 NPC 轉染 SIRT1-siRNA 后，抑制了 RES 對 ECM 降解的保護作用，Ⅱ型膠原和 Aggrecan 蛋白表達較Ⅳ組明顯降低（P<0.05）。結論RES 可以通過抑制 Wnt/β-catenin 信號通路維持 NPC ECM 的表達，為椎間盤退行性疾病的治療提供了新思路。
目的綜述 Wnt 信號通路在骨關節炎（osteoarthritis，OA）發生發展中的活性變化，及其對軟骨、軟骨下骨的雙靶向調控和兩者間信息交流對 OA 進程的影響和機制。方法查閱近年在體內外實驗研究及臨床研究中，OA 和非 OA 狀態下 Wnt 信號通路對關節軟骨、軟骨下骨調控作用及軟骨與軟骨下骨間信息交流的相關文獻，并對其作用機制進行分析總結。結果Wnt 信號可通過依賴 β-catenin 的經典或不依賴 β-catenin 的非經典 Wnt 信號通路及其與其他信號通路的交聯，調控軟骨細胞、成骨細胞的分化和功能，進而影響軟骨及骨的代謝。過度激活 Wnt 信號可加重軟骨 OA 樣退變，并且 Wnt 信號通路可激活下游蛋白 Wnt1 誘導的信號通路蛋白 1 調控 OA 進展，還可通過軟骨及軟骨下骨中不同細胞間建立的縫隙連接，直接進行分子交流調控 OA 的發生發展。關節腔內注射 Wnt 信號通路抑制劑 SM04690 可以抑制 OA 進程；在成骨細胞中過表達 Wnt 信號通路抑制劑 Dickkopf 可以拮抗 VEGF 對軟骨細胞的作用，并抑制其基質的分解代謝。結論Wnt 信號通路及其與其他信號分子的交互作用，可調控軟骨和軟骨下骨的代謝和功能及兩者間信息交流，因此在 OA 的發生發展中發揮重要作用，有望成為 OA 治療的新靶點。
目的探討過表達低氧誘導因子 1α（hypoxia inducible factor 1α，HIF-1α）對乳牙牙髓干細胞（stem cells derived from human exfoliated deciduous teeth，SHED）向血管內皮細胞分化的影響。方法取自愿捐贈的健康兒童滯留乳牙，采用膠原酶消化法分離培養 SHED 并傳代。取第 3 代細胞經流式細胞術以及成骨誘導分化并茜素紅和 ALP 染色鑒定后，分為空白對照組（未經任何處理）、空載組（感染空載慢病毒）、HIF-1α 過表達組（感染 HIF-1α 過表達慢病毒）、Wnt 抑制劑組［經 Wnt/β-連環蛋白（β-catenin）信號通路抑制劑 IWR-1 干預］和聯合組（感染 HIF-1α 過表達慢病毒并經 IWR-1 干預），并對應處理。其中，取空白對照組、空載組及 HIF-1α 過表達組細胞采用實時熒光定量 PCR 和 Western blot 法檢測 HIF-1α mRNA 和蛋白表達水平，觀察轉染效率。將 5 組細胞向血管內皮細胞定向誘導分化 14 d 后，采用流式細胞術檢測細胞表面標記分子血管性血友病因子（von Willebrand factor，vWF）和 CD31 表達水平；實時熒光定量 PCR 檢測細胞中血管細胞黏附分子 1（vascular cell adhesion protein 1，VACM-1）、VEGF 受體-2 KDR（Kinase-inserted domain containing receptor）和血管內皮鈣黏蛋白（VE-cadherin，VE）mRNA 表達水平；Western blot 法檢測細胞中 Wnt/β-catenin 信號通路相關蛋白磷酸化糖原合酶激酶 3β（phosphate-glycogen synthasc kinase 3β，p-GSK3β）及 β-catenin 表達水平；Matrigel 基質膠成管實驗檢測細胞體外小管形成情況；DiI 標記的乙酰化低密度脂蛋白（DiI-labeled acetylated low density lipoprotein，DiI-Ac-LDL）吞噬實驗檢測細胞吞噬脂質能力。結果經鑒定分離得到的細胞為 SHED。慢病毒轉染后，與空白對照組和空載組比較，HIF-1α 過表達組 HIF-1α mRNA 和蛋白表達水平均明顯增加（P<0.05）。向血管內皮細胞定向誘導分化 14 d 后，與空白對照組和空載組比較，HIF-1α 過表達組細胞中 VCAM-1、KDR 和 VE mRNA 相對表達量、vWF 和 CD31 陽性細胞百分比、β-catenin 蛋白相對表達量均增加，p-GSK3β 蛋白相對表達量降低，細胞小管形成數量及吞噬脂質能力升高，差異均有統計學意義（P<0.05）；而 Wnt 抑制劑組各指標與 HIF-1α 過表達組均相反（P<0.05）。與 HIF-1α 過表達組比較，聯合組細胞中 VCAM-1、KDR 和 VE mRNA 表達水平、vWF 和 CD31 陽性細胞百分比、β-catenin 蛋白相對表達量均降低，p-GSK3β 蛋白相對表達量升高，細胞小管形成數量及吞噬脂質能力降低，差異均有統計學意義（P<0.05）。結論過表達 HIF-1α 可通過激活 Wnt/β-catenin 信號通路，促進 SHED 向血管內皮細胞定向誘導分化。
目的探究真核起始因子 6（eIF6）的表達對結直腸癌細胞侵襲轉移及 Wnt/β-連環蛋白（Wnt/β-catenin）信號通路的影響。方法采用免疫組化方法檢測結直腸癌組織及其癌旁組織中 eIF6 蛋白的表達。轉染構建過表達/敲低 eIF6 的 SW837 細胞株，分為對照組、空質粒組、過表達組和敲低組，采用實時熒光定量聚合酶鏈反應（qRT-PCR）和蛋白質免疫印跡技術（WB）檢測各組 SW837 細胞中 eIF6 mRNA 和蛋白表達水平；應用 WB 檢測各組 SW837 細胞中 Wnt/β-catenin 信號通路關鍵因子 β-catenin、糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）、后期促進復合體（APC）和通路下游靶基因鋅指轉錄因子 SNAI（Snail）以及上皮間質轉化（EMT）標志物 E 型鈣黏蛋白（E-cadherin）和波形蛋白（Vimentin）的表達；采用 Transwell 小室和劃痕實驗檢測各組 SW837 細胞的侵襲和遷移能力；采用皮下成瘤實驗檢測各組 SW837 細胞的體內成瘤能力并經蘇木精伊紅（HE）染色觀察移植瘤病理學變化。結果相較于癌旁組織，結直腸癌組織中 eIF6 蛋白表達陽性率升高（P<0.05）；相較于對照組，過表達組 SW837 細胞 β-catenin、Snail 和 Vimentin 蛋白表達水平升高，GSK-3β、APC 和 E-cadherin 蛋白表達水平降低，細胞遷移侵襲能力和體內成瘤能力增強，其差異均有統計學意義（P<0.05）；敲低組 SW837 細胞 β-catenin、Snail 和 Vimentin 蛋白表達水平降低，GSK-3β、APC 和 E-cadherin 蛋白表達水平升高，細胞遷移侵襲能力和體內成瘤能力減弱，其差異也均有統計學意義（P<0.05）。結論eIF6 可能通過激活 Wnt/β-catenin 信號通路，從而促進結直腸癌細胞的侵襲轉移。
目的研究替米沙坦對非小細胞肺癌 A549 細胞增殖、遷移和凋亡的影響，并探討其機制。方法體外培養非小細胞肺癌細胞株 A549，采用 CCK-8 法檢測不同濃度替米沙坦對 A549 細胞增殖活性的影響，以克隆形成實驗檢測不同濃度替米沙坦處理下 A549 的存活分數，以劃痕實驗檢測不同濃度替米沙坦對 A549 細胞遷移能力的影響，Hoechst 染色檢測不同濃度替米沙坦對 A549 凋亡的影響，用Western blotting 檢測 β-肌動蛋白（β-actin）、增殖細胞核抗原（PCNA）、Bax、Bcl-2、Wnt-3a、β-連環蛋白（β-catenin）、絲氨酸蛋白激酶3β（p-GSK-3β）、糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）、c-myc 等蛋白的表達。結果不同濃度替米沙坦處理抑制了 A549 細胞增殖活性、克隆形成率和遷移，減少 PCNA 表達，并且存在濃度依賴性。替米沙坦處理促進了 A549 細胞的凋亡，顯著增加促凋亡蛋白 Bax 和減少抗凋亡蛋白 Bcl-2 的表達。替米沙坦處理后 A549 細胞的 Wnt-3a、β-catenin、c-myc、p-GSK-3β 的表達減少，GSK-3β 的表達增加。結論替米沙坦可能在非小細胞肺癌 A549 細胞的增殖、遷移和凋亡中起到作用，抑制 Wnt/β-catenin 信號通路可能是其中的一個機制。
目的探討bFGF及EGF單獨或聯合誘導人BMSCs（human BMSCs，hBMSCs）向神經細胞分化的差異以及Wnt/β-catenin信號通路在分化過程中的調控作用。方法 取鑒定后的第4代hBMSCs，根據不同誘導條件分為對照組（A組）、EGF誘導組（B組）、bFGF誘導組（C組）、EGF+bFGF誘導組（D組）以及EGF+bFGF+ Dickkopf相關蛋白1（Dickkopf-related protein 1，DKK-1）誘導組（E組）。誘導培養7 d后，采用倒置熒光相差顯微鏡觀察細胞形態，RT-PCR檢測神經細胞 ［巢蛋白（Nestin）、神經元特異性烯醇化酶 （neuron-specific enolase，NSE）、微管相關蛋白 2（microtubule-associated protein 2，MAP-2）和膠質纖維酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein，GFAP）］ 以及Wnt/β-catenin信號通路關鍵組件（β-catenin和Cyclin D1）基因水平表達變化，細胞免疫熒光染色以及Western blot檢查檢測神經細胞（Nestin、GFAP）以及Wnt/β-catenin信號通路關鍵組件 ［β-catenin、磷酸化β-catenin（phosphorylation β-catenin，P-β-catenin）、細胞胞質β-catenin（Cytoplasmic β-catenin）及細胞核內β-catenin（Nuclear β-catenin）］ 蛋白水平表達變化。結果 誘導培養后，與A、B組比較，C～E組細胞出現典型的神經樣細胞變化，其中D組最明顯。RT-PCR檢測示與A組比較，C～E組Nestin、NSE、MAP-2，D、E組GFAP及B組NSE基因相對表達量升高；C、D組β-catenin以及B～D組Cyclin D1基因相對表達量升高；差異均有統計學意義（P<0.05）。D組與E組比較，Nestin、NSE、MAP-2、GFAP、β-catenin、CyclinD1基因相對表達量均升高；與C組比較Nestin基因相對表達量下降，NSE、MAP-2、GFAP基因相對表達量均升高；組間差異有統計學意義（P<0.05）。細胞免疫熒光染色觀察示C～E組NSE、GFAP陽性率與A組比較均升高，D組高于C、E組，差異有統計學意義（P<0.05）。Western blot檢測示，C、D組NSE蛋白相對表達量較A組升高，D組高于C、E組；C～E組GFAP蛋白相對表達量較A組升高、D組高于E組；差異均有統計學意義（P<0.05）。C、D組與A組比較以及D組與E組比較，β-catenin、Cytoplasmic β-catenin、Nuclear β-catenin蛋白相對表達量以及β-catenin核質比均升高，P-β-catenin蛋白相對表達量下降，差異有統計學意義（P<0.05）。結論bFGF可誘導hBMSCs向神經細胞分化，而EGF無此作用，但能增強bFGF誘導作用；Wnt/β-catenin信號通路在這一過程中發揮正向調控效應。