目的 構建人microRNA-210（miR-210）慢病毒重組載體并轉染人臍靜脈內皮細胞株（human umbilical vein endothelial cells 12，HUVE-12），探討其過表達對HUVE-12 成血管的影響，為研究血管再生機制提供實驗模型。方法 構建pGCSIL-GFP-pre-miR-210 重組質粒表達載體并轉染HUVE-12，熒光顯微鏡觀察GFP 陽性表達細胞數及實時熒光定量PCR 法檢測miR-210 表達變化；細胞分為空病毒對照組（LV-GFP 對照組）和miR-210 轉染組（LV-miR-210-GFP 組），流式細胞儀檢測各組細胞ephrinA3 表達變化；ELISA 檢測細胞培養上清中VEGF 含量；將兩組細胞分別接種于Matrigel 觀察血管形成能力。 結果 重組載體經酶切、測序鑒定正確，GFP 表達強度在轉染后48 ～ 72 h 達峰值；實時熒光定量PCR 檢測結果顯示：LV-miR-210-GFP 組miR-210 表達水平較LV-GFP 對照組增加9.72 倍（t= —11.10，P=0.00）。流式細胞儀檢測結果顯示LV-miR-210-GFP 組ephrinA3 陽性細胞率為12.52% ± 0.67%，明顯較LV-GFP 對照組（73.22% ± 1.45%）降低（t= —66.12，P=0.00）；ELISA 檢測結果顯示LV-miR-210-GFP 組細胞上清中VEGF 含量顯著高于LV--GFP 對照組（[ 305.29 ± 16.52）pg/mL vs.（42.52 ± 3.11）pg/mL]（t= —27.06，P=0.00）；血管形成能力實驗顯示LV-miR-210-GFP 組毛細血管管腔數為17.33 ± 6.33，較LV-GFP 對照組（6.33 ± 2.33）顯著增加（t= —2.83，P=0.04）。 結論 成功構建miR-210 慢病毒重組載體，并能在HUVE-12 中穩定表達，過表達miR-210 能明顯增強HUVE-12 血管形成能力，為進一步研究miR-210 調控血管新生的分子機制奠定了實驗基礎。
目的 介紹microRNA (miRNA) 起源、功能及其與干細胞的關系的研究進展。 方法 查閱近年有關文獻，并對miRNA和干細胞進行綜合分析。 結果 miRNA是一類非編碼蛋白并且參與轉錄后調節的單鏈小分子RNA（20~25個堿基），對基因表達具有重要調控作用。近年來發現存在著一個龐大的miRNA家族，參與調控生物體生長發育等許多復雜的生命過程，并且與干細胞的自我更新和多向分化存在著緊密關聯。 結論 miRNA作為一種新的調控基因表達的小分子RNA，可以成為干細胞研究的新途徑。
造血干細胞(HSCs)是一種能分化為成熟血細胞的組織特異性干細胞,并且在生命體內終生都存在。而脊椎動物胚胎的主動脈造血干細胞集落在成體血液系統形成的過程中起著重要的作用。近年來人們深入地研究了胚胎期造血干細胞的發生、發展及轉位歸巢機制,發現其發育過程中受到轉錄因子Runx1及Notch等信號通路的調控,而microRNA則對造血干祖細胞的自我更新及定向分化進行轉錄后水平的調控。在循環建立后,造血干細胞的形成及其向紅細胞的分化還受到血液動力學的調控和影響。了解造血干細胞的發生機制及調控因素對我們在體外人工誘導生成造血干細胞并應用于臨床血液疾病治療具有重要的意義。本文將對胚胎造血干細胞發生及其調控的最新研究進展進行綜述。
microRNA（miRNA）是一類具有調控作用的單鏈小分子RNA，與腫瘤的增殖、侵襲和轉移有很大的關系。結直腸癌作為一種常見的消化道腫瘤，與miRNA有密切的關系。本文就miRNA對結直腸癌的增殖、侵襲和轉移等相關生物學行為的影響及其在結直腸癌診斷和治療中的作用做一綜述。
目的總結microRNA對腫瘤微環境的調控機制。 方法通過檢索PubMed獲取近年來關于microRNA對腫瘤細胞微環境調控機制的相關文獻資料并進行綜述。 結果microRNA可以參與低氧誘導因子、腫瘤相關成纖維細胞、細胞外基質等腫瘤微環境因素在轉錄后水平表達的調控，微環境的變化會導致腫瘤細胞生物學行為的改變。 結論microRNA參與調節腫瘤微環境的諸多因素，而微環境的改變對于腫瘤的發生、發展有著至關重要的作用，明確microRNA對微環境調控的機制不僅有助于探索腫瘤細胞生物學行為，同樣為腫瘤疾病的診斷和預后提供新的思路。
目的探討microRNA-199b-5p（miR-199b-5p）在尤文肉瘤細胞系中的功能，分析其作用機制，以期為臨床生物學治療提供理論依據。 方法取人尤文肉瘤細胞系A673、TC252，分別以miR-199b-5p寡核苷酸片段（mimic）及其陰性對照（mimic control）轉染，作為實驗組及對照組。實時熒光定量PCR檢測miR-199b-5p mRNA相對表達量，并與MSCs比較；細胞計數試劑盒8法檢測miR-199b-5p對細胞增殖的影響；流式細胞術法檢測對細胞周期及凋亡的影響。雙熒光報告基因實驗初步檢測miR-199b-5p可能作用的靶基因，Western blot驗證靶基因。 結果實時熒光定量PCR檢測示，對照組A673細胞及TC252細胞中的miR-199b-5p mRNA相對表達量與MSCs相比均顯著下降（P＜0.05），與實驗組對應細胞相比亦顯著下降（P＜0.05）。與對照組對應細胞相比，實驗組處于G1期細胞明顯增多，S期細胞明顯減少，比較差異均有統計學意義（P＜0.05）；而兩組G2/M期細胞無明顯差異（P＞0.05）。實驗組細胞凋亡率與對照組對應細胞相比顯著增高（P＜0.05）。雙熒光報告基因實驗檢測miR-199b-5p可能作用的靶基因是細胞周期調節蛋白1（cyclin-L1，CCNL1）和c-Kit。Western blot檢測顯示，與對照組對應細胞相比，實驗組CCNL1和c-Kit蛋白相對表達量明顯下調，差異均有統計學意義（P＜0.05）。 結論miR-199b-5p能抑制尤文肉瘤細胞增殖，阻滯細胞周期轉換，促進細胞凋亡，其抑制作用是通過靶向CCNL1和c-Kit實現的。
目的 探討 miRNAs 對胰腺癌（pancreatic cancer）的診斷價值。 方法 計算機檢索 PubMed、Scopus、Web of Science、CBM、CNKI、WanFang Data 和 VIP 數據庫，搜集 miRNAs 診斷胰腺癌的診斷性試驗，檢索時限均從建庫至 2015 年 12 月 31 日。由 2 位研究者獨立篩選文獻、提取資料，并采用 QUADAS-2 工具評價納入研究的偏倚風險后，采用 MetaDiSc 1.4 及 Stata 12.0 軟件進行 Meta 分析。 結果 共納入 40 篇文獻，109 個研究。miRNAs 診斷胰腺癌的Sen合并=0.81 [95%CI（0.80，0.82） ]、Spe合并=0.77 [95%CI（0.75，0.78） ]、+LR合并=3.15 [95%CI（2.78，3.58） ]、–LR合并=0.27[95%CI（0.24，0.31） ]、DOR合并=13.58 [95%CI（10.89，16.94） ]、AUC=0.86 [95%CI（0.84，0.88） ]。診斷準確性白種人優于亞洲人（AUC=0.89vs. 0.84），聯合 miRNAs 優于單一 miRNA（AUC=0.91vs. 0.84）。 結論 現有證據表明，miRNAs 對胰腺癌具有一定診斷價值，尤其是聯合 miRNAs 診斷。但受納入研究質量的限制，上述結論仍需開展高質量的研究予以驗證。
目的 檢測胰腺導管腺癌組織中微小 RNA（microRNA，miR）-196b、miR-217 與轉化生長因子 β 受體 1（transforming growth factor β receptor 1，TGFβR1）蛋白的表達水平，并探討其臨床意義。 方法 前瞻性收集 2014 年 3 月到 2017 年 3 月期間在重慶醫科大學附屬第二醫院行胰腺癌根治術的 30 例胰腺導管腺癌患者的組織標本（包括胰腺導管腺癌組織及其癌旁組織），利用實時熒光定量聚合酶鏈反應法檢測 miR-196b 和 miR-217 的表達水平，采用 Western blotting 法檢測 TGFβR1 蛋白的表達水平。 結果 胰腺導管腺癌組織中 miR-196b 和 TGFβR1 蛋白的表達水平均高于癌旁組織（P<0.001），而 miR-217 的表達水平低于癌旁組織（P=0.001）。胰腺導管腺癌組織中 miR-196b 的表達水平與 TGFβR1 蛋白的表達水平呈正相關（r=0.803，P<0.001），而 miR-217 的表達水平與 TGFβR1 蛋白的表達水平呈負相關（r=–0.839，P<0.001）。 結論 胰腺導管腺癌組織中 TGFβR1 蛋白的表達可能同時受 miR-196b 和 miR-217 的雙向調控，這種雙向調控機制可能是制約胰腺導管腺癌發生和發展的重要機制之一，也可能是治療胰腺導管腺癌的潛在靶點。
目的 總結 microRNA 在原發性肝細胞肝癌（hepatocellular carcinoma，HCC）復發及轉移中的作用機制及其在臨床中的可能的應用價值。 方法 查閱國內外的相關文獻并進行綜述。 結果 microRNA 在 HCC 的細胞增殖及凋亡中發揮著重要作用，不同分型的 microRNA 通過不同的作用靶點及分子通路來促進或抑制 HCC 的復發及轉移。 結論 microRNA 在 HCC 的復發及轉移中具有調控作用，深入研究 microRNA 在 HCC 復發及轉移中的作用機制對 HCC 的復發預測及臨床治療均可提供巨大幫助，其有望成為 HCC 復發轉移預測和治療的新靶點。
目的 探索胰腺癌患者和胰腺癌大鼠血清中 microRNA（miRNA）-21 和 miRNA-155 的表達水平及其用于胰腺癌診斷的價值。 方法 前瞻性收集 2016 年 1 月至 2016 年 12 月期間福建醫科大學附屬協和醫院收治的 18 例胰腺癌患者（胰腺癌組）及同期收治的 12 例胰腺良性疾病（胰腺良性疾病組）患者的臨床資料和血清樣本，采用實時熒光定量法檢測血清中 miRNA-21 和 miRNA-155 的表達水平。同時建立 20 只由 7, 12-二甲基苯并蒽（DMBA）誘導的胰腺癌大鼠模型，并設置對照（10 只空白對照組大鼠行假手術），采集胰腺癌大鼠組（建模成功的胰腺癌大鼠）和空白對照組大鼠的血清，同法檢測血清中 miRNA-21 和 miRNA-155 的表達水平。 結果 胰腺癌組患者血清中 miRNA-21 和 miRNA-155 的中位表達水平分別為 1.99（1.43～5.30）和 7.06（4.98～21.48），胰腺良性疾病組患者分別為 1.28（0.58～2.01）和 2.20（1.76～3.02），胰腺癌組患者的血清 miRNA-21 和 miRNA-155 表達水平均較高（Z=–2.621，P=0.009；Z =–3.430，P=0.001）。動物實驗中，實驗組建模成功并存活大鼠 11 只，空白對照組存活大鼠 9 只。胰腺癌大鼠組血清中 miRNA-21 和 miRNA-155 的中位表達水平分別為 2.12（1.33～2.72）和 16.45（7.18～25.40），空白對照組大鼠分別為 1.00（0.45～1.60）和 1.49（1.25～1.97），胰腺癌大鼠組血清中 miRNA-21和 miRNA-155 的表達水平均較高（Z =–2.621，P=0.009；Z=–3.609，P<0.001）。在區分胰腺癌和胰腺良性疾病方面，血清 miRNA-21 表達水平的最佳臨界值為 4.21，此時其靈敏度和特異度分別為 75.0% 和 61.1%；血清 miRNA-155 表達水平的最佳臨界值為 4.67，此時其靈敏度和特異度均為 83.3%。 結論 胰腺癌患者及大鼠血清中 miRNA-21 和 miRNA-155 的表達水平均異常升高，血清 miRNA-155 水平在一定程度上有助于區分胰腺癌與胰腺良性疾病。