目的探討Ⅳ型膠原蛋白在乳腺癌中的表達情況及其與臨床病理間的關系。方法應用Ⅳ型膠原蛋白單克隆抗體,采用鏈親和素(LSAB)法檢測93例乳腺惡性腫瘤及5例良性腫瘤組織中Ⅳ型膠原蛋白的表達。結果Ⅳ型膠原蛋白表達與乳腺癌患者腋窩淋巴結受累、生存時間及腫瘤大小有關。Ⅳ型膠原蛋白表達缺乏組5年生存率為29.69%,明顯低于表達完整組的5年生存率(81.43%),P<0.05; 隨著腫瘤的長大,Ⅳ型膠原表達完整率由53.8%降至10.3%,兩者間呈正相關(r=0.219)。結論檢測Ⅳ型膠原在乳腺癌基底膜中的表達狀況,將有助于乳腺癌預后的判斷及治療方案的制訂。
目的 觀察乳腺良性疾病不典型增生癌變過程中基底膜的變化。 方法采用SP免疫組化染色法和兩種特殊染色方法(Foot及PAS染色法),并利用電鏡觀察基底膜的變化。 結果 Ⅱ級不典型增生的乳腺組織已有基底膜的變化,Ⅲ級不典型增生時基底膜的變化更明顯,主要表現為光鏡下基底膜明顯厚薄不均,電鏡下則可見小的缺失,而乳腺癌組織中基底膜完全缺如。結論 在乳腺上皮細胞癌變過程中基底膜的變化與乳腺上皮細胞的變化密切相關,是乳腺上皮不典型增生癌變過程的一部分。
【摘 要】 目的 比較不同化學方法制備去細胞神經支架的效果,提供有效的組織工程神經支架。 方法 2 月齡雄性SD 大鼠15 只,體重200 ~ 250 g,取雙側坐骨神經,隨機分為3 組,每組10 條。根據處理方法不同,A 組為正常未處理組;B 組為傳統Sondell 法化學處理組;C 組為采用Triton X-200、SB-10、SB-16 處理的改良法組。制備后行HE 染色、免疫組織化學染色及掃描電鏡觀察,并對去細胞程度、脫髓鞘程度及神經纖維管道完整性進行量化評價。 結果 HE 染色:A 組神經纖維橫斷面呈圓形,胞核呈深藍色,髓鞘呈網格狀結構;B 組軸突及細胞核均消失,神經內膜結構破壞明顯;C 組軸突及細胞核均消失,神經內膜形成不規則圓形空腔。層粘連蛋白免疫組織化學染色:A 組基底膜圍繞在髓鞘外周,中間有藍染SC 核;B 組SC 核及髓鞘結構消失,神經基底膜結構不完整;C 組SC 核及髓鞘結構消失,神經基底膜形成不規則圓形空腔。S-100 蛋白免疫組織化學染色:A 組SC 及髓鞘呈棕褐色;B 組及C 組未見明顯髓鞘染色。掃描電鏡觀察:A 組髓鞘、軸突等內容物形態清晰;B 組髓鞘、軸突等結構均消失,基膜管壁排列欠規則;C 組基膜管壁膠原纖維排列有序。去細胞程度及髓鞘染色深度評分:B、C 組均優于A 組(P lt; 0.05),其中髓鞘染色深度評分C 組均優于B 組(P lt; 0.05);神經纖維管道完整性評分:C 組優于B 組(P lt; 0.05),與A 組相似(P gt; 0.05);綜合評價去細胞處理方法以C 組方法為佳。 結 論 改良法所獲得的去細胞神經的去細胞效果與傳統Sondell 法相似,而脫髓鞘及組織結構保留的效果優于后者,可作為一種新的神經支架材料。
目的 尋找最適于組織工程皮膚生長及基底膜構建的體外培養基鈣濃度。 方法 按照魯元剛等建立的方法制備復方殼多糖組織工程皮膚,根據培養基鈣濃度不同,分為1.00、1.45、1.65和1.95 mmol/L四組。在37℃、5% CO2及90%以上濕度孵箱內浸沒培養3 d后,將培養物置于不銹鋼篩網上進行氣液界面三維培養,每天換液1次。培養7、15 d,行HE、PAS染色觀察組織工程皮膚的組織學特性;并利用免疫組織化學染色對基底膜的主要成分——Ⅳ型膠原進行觀察,評價基底膜構建情況。 結果 各組組織工程皮膚組織學觀察類似正常皮膚,有分化良好的表皮和致密真皮,但1.95 mmol/L組表皮分化較其他組更好;1.00、1.45及1.65 mmol/L組角化層外側常伴未角化的角質形成細胞,1.95 mmol/L組表皮細胞角化完全,且與顆粒層細胞結合牢固。PAS染色顯示各組真、表皮間有紫紅色帶狀結構;免疫組織化學染色顯示真皮與表皮間Ⅳ型膠原反應呈陽性,且1.95 mmol/L組陽性反應強于1.00 mmol/L組。 結論 鈣濃度為1.95 mmol/L的培養基最適合于復方殼多糖組織工程皮膚生長及基底膜構建。
本文對現行生理學教科書和參考書在闡明人耳傳聲原理中存在的一些問題進行有理有據的論證, 提出筆者的見解, 彌補文獻不足。運用物理學的杠桿知識和聲學理論, 提出錘骨柄的等效簡化模型, 使之符合作為杠桿長臂的要求; 構造成一個聽骨鏈組合杠桿, 建立聽骨鏈的等效簡化模型。將此模型分解成兩個簡單杠桿, 在分析論證兩個簡單杠桿的基礎上, 推導出組合等效杠桿的原理公式。通過計算和對比外耳道空氣和內耳淋巴液中的聲位移振幅得出結論:對減少聲位移振幅以適應基底膜的承受限度起關鍵作用的因素是淋巴液的密度和聲速遠比空氣的密度和聲速高。
目的探討人體外泌汗腺組織體外三維培養方法,并對構建的三維組織進行形態學分析。 方法取整形手術患者自愿捐贈的正常腹部全層皮膚,經Ⅱ型膠原酶消化分離人體外泌汗腺組織,以含5 ng/mL重組人EGF、25 mg/mL牛垂體提取物、100 U/mL青霉素和100 μg/mL鏈霉素的無血清角質細胞培養基進行培養。倒置相差顯微鏡下觀察細胞生長情況。待原代細胞達80%融合后,調整細胞濃度至1×105個/mL;取0.3 mL細胞懸液與0.3 mL Matrigel基底膜基質混勻培養,倒置相差顯微鏡下觀察細胞生長情況。培養14 d后,取標本行冰凍切片,HE染色觀察細胞形態結構,免疫組織化學染色檢測細胞角蛋白7(cytokeratin 7,CK7)和CK19抗原表達。 結果倒置相差顯微鏡觀察示,經Ⅱ型膠原酶消化后大量汗腺組織游離;貼壁后3~5 d長出汗腺細胞,細胞持續分裂達2~3周,形成圍繞汗腺組織塊的環狀單層;3~4周后細胞衰老。汗腺細胞接種于Matrigel基底膜基質中2~3 d,細胞開始分裂,隨后形成小細胞團、管狀結構以及類球狀結構;約2周時混合培養物開始液化,培養終止。HE染色示部分細胞形成中空管狀結構,管壁由1~2層細胞構成,類似于在體汗腺的分泌部和導管部;免疫組織化學染色見培養的汗腺細胞CK7和CK19表達均呈陽性。 結論人汗腺細胞接種于Matrigel基底膜基質三維培養,形成的組織結構模擬了在體汗腺的組織形態結構。
血漿置換能夠迅速清除血液循環中的致病性抗原、抗體以及免疫復合物等致病因子,已成為自身免疫性疾病重要的輔助治療手段之一。雙重濾過血漿置換作為新型血漿置換模式,由于其受血漿資源的限制少,在免疫性疾病中的使用越來越廣泛。該文報道一例雙重濾過血漿置換成功治療重癥抗腎小球基底膜病的患者,結合國內外文獻進行分析,對雙重濾過血漿置換在常見免疫性疾病中的應用進行綜述,以期對雙重濾過血漿置換在臨床中的使用提供參考。