目的探討神經生長分化相關miR-124a和miR-9在癲癇發生各時間點上表達水平的動態變化 方法將56只Sprague-Dawley大鼠隨機分為2組:正常對照組(n=6)、實驗組氯化鋰-匹羅卡品誘導癲癇持續狀態(SE)致癇大鼠組(n=50)。觀察SE發作時的動物行為學改變, 并行長程視頻監測, 觀察慢性期自發性癲癇的發作情況。選取SE后1、7、14和28 d為主要研究時間點(每組6只), 適時處死動物、獲取組織標本。同時處死、獲取正常對照組(n=6)大鼠的組織標本。提取各時點上大鼠海馬腦組織中總RNA, 應用熒光定量qPCR檢測大鼠海馬腦組織中miR-124a和miR-9表達, 明確其在上述各研究時點上的表達水平, 統計學分析miR-124a和miR-9在各研究時點上的表達差異和動態變化。 結果實驗組(n=50)大鼠中有40只進入SE。與正常對照組比較, miR-124a的表達水平在SE后1d變化不明顯(P＞0.05), 但在其后7、14、28 d呈現顯著下降趨勢, 與對照組比較有統計學意義(P＜0.05), 該趨勢隨時間點延長愈加明顯。與正常對照組比較, miR-9的表達水平在SE后1、7、14和28d呈現顯著升高趨勢(P＜0.05), miR-9的表達上調在SE后7d存在波動, 但其總體呈上升趨勢, 并隨時間點延長愈加顯著。 結論神經生長分化相關miR-124a和miR-9在SE后大鼠海馬癲癇發生中呈現表達下調或上調的動態變化, 推測miR-124a和miR-9表達動態改變與癲癇發生機制有關, 可能參與了SE后海馬神經再生和重塑。
目的分析并驗證急性主動脈夾層（acute aortic dissection，AAD）細胞焦亡相關miRNAs的功能。方法下載GEO數據庫中基于miRNA芯片的微陣列數據集，篩選差異表達的miRNAs，通過miRwalks數據庫預測靶基因。以“pyroptosis”為關鍵詞在PubMed數據庫中搜索與細胞焦亡相關基因（pyroptosis related genes，PRGs），韋恩圖取PRGs和差異miRNAs預測靶基因交集為AAD焦亡相關基因，并進行GO、KEGG富集分析。Cytohubba篩選AAD焦亡關鍵相關基因，進而確定AAD焦亡相關miRNAs。收集性別、年齡匹配的AAD患者與健康人群的主動脈組織，Western blotting及RT-qPCR驗證關鍵基因及miRNAs。結果共篩選出46個AAD差異表達的miRNAs，通過韋恩圖得到49個AAD焦亡相關基因。GO富集分析顯示，這些基因在半胱氨酸內肽酶調控的凋亡中起重要作用。KEGG富集分析發現，這些基因富集于沙門菌感染、壞死性凋亡和Nod樣受體信號通路。Cytohubba篩選的AAD焦亡關鍵相關基因為Caspase-1、IL-1β和TNF，進而獲得12個AAD焦亡相關miRNAs。Western blotting及RT-qPCR結果顯示，與健康主動脈相比，AAD患者主動脈組織中Caspase-1表達上調，對應的miRNAs為miR-198、miR-3202和miR-514b-5p，表達均下調。結論AAD焦亡相關關鍵基因Caspase-1表達上調，3個對應的miRNAs表達下調，為AAD細胞焦亡的分子機制及靶向治療提供了新的思路。
目的研究半月板中軟骨退變相關基因的表達，探討半月板撕裂對軟骨退變的潛在影響，并分析miRNAs和軟骨退變的關系。 方法以2012年9月－2013年10月5例行關節鏡下撕裂半月板部分切除患者自愿捐贈的半月板組織作為實驗組，4例截肢患者自愿捐贈的正常半月板組織為對照組。取標本行HE染色，觀察組織學改變；行實時熒光定量PCR，檢測半月板中軟骨退變相關基因[蛋白多糖（Aggrecan，ACAN)、Ⅹ型膠原（type X collagen，COL10A1）、基質金屬蛋白酶13（matrix metalloproteinases 13，MMP-13）、CCAAT增強子結合蛋白β（CCAAT enhancer binding protein β，CEBP-β）、蛋白聚糖酶5（a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondinmotif 5，ADAMTS-5）]以及miRNAs（miR-193b、miR-92a、miR-455-3p）表達水平。 結果組織學觀察示，實驗組撕裂半月板組織存在不同程度退行性改變。與對照組相比，實驗組ACAN表達水平下調，COL10A1、CEBP-β、ADAMTS-5、MMP-13表達水平均上調；除ACAN、MMP-13外，其余各退變相關基因組間差異均有統計學意義（P＜0.05）。實驗組miR-193b、miR-92a、miR-455-3p表達水平均較對照組顯著上調，比較差異亦有統計學意義（P＜0.05）。 結論撕裂半月板有退變趨勢，其促進軟骨退變作用較正常半月板顯著，miR-193b、miR-92a、miR-455-3p可能是促進軟骨退變的調控因子。
目的 乙型肝炎病毒 X（hepatitis B virus X protein，HBx）蛋白通過調控蛋白編碼基因表達而廣泛參與人原發性肝細胞癌（簡稱肝癌）的發生和進展。本研究將 HBx 的調控功能拓展到非編碼 RNA 領域，探討 HBx 能否調控宿主肝癌細胞內 microRNA（miRNA）的表達，進而參與肝癌細胞生長及惡性轉化。 方法 利用高通量芯片分析及實時定量聚合酶鏈反應（quantitative real time polymerase chain reaction，qRT-PCR）鑒定 HBx 在肝癌細胞內誘發的 miRNA 表達變化。通過系列蛋白和 mRNA 表達分析，細胞周期及凋亡實驗以及螢光素酶報告實驗來檢測 miR-16 家族表達抑制后 HepG2 肝癌細胞的生物學變化。 結果 芯片分析結果顯示，HBx 在 HepG2 細胞內誘發了大量的 miRNAs 表達變化，其中 miR-16 家族的低表達能在 HepG2、SK-HEP-1 及 Huh7 肝癌細胞中得到重復。同時，HBx 顯著上調 miR-16 家族的靶基因 CCND1 的表達。c-myc 介導了 HBx 相關 miR-16 家族沉默，外源表達的 miR-16/15a 能通過阻滯細胞周期進展和誘導凋亡而抑制 HepG2-hbx（穩定表達 HBx）細胞的增殖、克隆形成及非貼壁生長能力。反之，沉默 miR-16 表達能促進 HepG2 細胞的周期進展和生長。 結論 HBx 能在體外改變肝癌細胞的 miRNA 表達譜，尤其是沉默 miR-16 家族表達。c-myc 高表達介導了 HBx 下調 miR-15a/16 的過程且是 HBx 促進 HepG2 細胞惡性轉化所必須的。因此，miR-16 家族可能成為 HBV 相關肝細胞癌的治療靶點。
目的評價血清外泌體miRNAs在DeBakeyⅠ型急性主動脈夾層（acute aortic dissection，AAD）患者中的表達變化及意義。方法回顧性納入新疆醫科大學第一附屬醫院2019年1月—9月收治的12例AAD男性患者及6名健康男性體檢者。根據胸痛時間，將患者分為胸痛發生時間24 h以內AAD組（n=6），年齡（47.00±8.79）歲；胸痛發生時間48 h以內AAD組（n=6），年齡（50.17±9.99）歲。對照組年齡（49.17±4.26）歲。通過血清外泌體miRNAs分離、鑒定與定量，篩選差異表達的外泌體miRNAs，并對不同組間差異表達的外泌體miRNAs進行GO、KEGG等生物信息學分析。結果高通量篩選結果發現，AAD血清外泌體miRNAs差異表達。胸痛發生時間24 h以內和48 h以內AAD組與對照組比較，表達均上調的為hsa-miR-574-5p（P＜0.05），表達均下調的為hsa-miR-223-3p、hsa-miR-146b-5p、hsa-miR-15b-5p、hsa-miR-155-5p（P＜0.05）。生物信息學分析發現，上述miRNAs主要富集在轉換生長因子-β、細胞周期、內質網蛋白合成等信號通路。結論AAD患者血清外泌體miRNAs存在差異表達，可能與AAD發病機制有關，為進一步探索AAD診斷標志物及發病機制提供了新的思路和線索。