目的 研究磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）和磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）在人膀胱尿路上皮癌組織中的表達特征及臨床意義。 方法 2005年6月－2010年7月，采用免疫組織化學法檢測40例膀胱尿路上皮癌組織及10例正常膀胱組織PI3K與p-Akt的表達，并對結果進行統計學分析。 結果 PI3K和p-Akt在正常膀胱黏膜組織陽性表達率均低于膀胱尿路上皮癌組織中，差異均有統計學意義（P＜0.05）。同一標本中PI3K和p-Akt的表達不具有相關性（r=0.051，P=0.747）。 結論 PI3K、p-Akt在膀胱尿路上皮癌中高表達，兩者在膀胱尿路上皮癌中共同促其發展，但其在膀胱尿路上皮癌的預后和進展中的作用尚不明確。
目的通過檢測間歇低氧大鼠肝臟細胞中同源性磷酸酶張力蛋白（PTEN）及其下游信號分子磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）的表達水平，探討肝臟細胞PTEN、p-AKT在間歇低氧相關胰島素抵抗中的作用。 方法選取健康雄性SD大鼠24只，隨機分成3組，即慢性間歇空氣對照組（CIA組）、慢性間歇低氧4周組（CIH4組）和慢性間歇低氧8周組（CIH8組）。檢測3組大鼠空腹血糖、空腹胰島素、肝細胞中PTEN及p-AKT的表達，用胰島素敏感指數（ISI）以及穩態模型胰島素抵抗指數（HOMA-IR）系統評價胰島素抵抗。以平均灰度值表示PTEN及p-AKT的蛋白表達量，灰度值越高表示蛋白質表達越少。 結果與CIA組比較，CIH4組、CIH8組ISI下降有統計學意義（P＜0.05），且CIH8組下降比CIH4組明顯（P＜0.05）；CIH4組、CIH8組HOMA-IR升高有統計學意義（P＜0.05），且CIH8組升高較CIH4組明顯（P＜0.05）。與CIA組比較，CIH4組、CIH8組PTEN蛋白表達量升高有統計學意義（P＜0.05）；與CIH4組比較，CIH8組PTEN蛋白表達量升高亦有統計學意義（P＜0.05）。與CIA組比較，CIH4組、CIH8組p-AKT蛋白表達量下降有統計學意義（P＜0.05）；與CIH4組比較，CIH8組p-AKT蛋白表達量下降亦有統計學意義（P＜0.05）。間歇低氧大鼠肝細胞中PTEN的表達隨著ISI的下降和HOMA-IR的升高有顯著升高趨勢，且隨間歇低氧時間的延長而顯著性增加；間歇低氧大鼠肝細胞中p-AKT隨著ISI的下降和HOMA-IR的升高表達下降，且隨著間歇低氧時間的延長而更加明顯。 結論慢性間歇低氧暴露使大鼠空腹血糖及胰島素水平升高，發生胰島素抵抗，并且隨著間歇低氧暴露時間的延長，胰島素抵抗程度加重。間歇低氧大鼠肝細胞PTEN蛋白表達增加，p-AKT蛋白表達減少，且與ISI、HOMA-IR具有明顯的相關性，表明該蛋白可能在間歇低氧大鼠胰島素抵抗的發生機制中發揮重要的作用。
目的研究Ghrelin對L6大鼠成肌細胞在棕櫚酸誘導下的葡萄糖代謝和胰島素敏感性的影響，并探討其可能的機理。 方法培養L6大鼠成肌細胞，誘導分化后利用0.3 mmol/L的棕櫚酸作用16 h，實驗組加入不同劑量的Ghrelin（1、10和100 nmol/L）作用8 h，采用葡萄糖氧化酶-過氧化物酶法（GOD-POD）檢測骨骼肌細胞對葡萄糖的攝取，并在熒光共聚焦顯微鏡下觀察細胞膜葡萄糖轉運因子-4（GLUT-4）蛋白染色；采用免疫印跡（Western blot）法檢測骨骼肌細胞中總蛋白激酶B（Akt）、磷酸化蛋白激酶B（pAkt）、總糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）和磷酸化糖原合成酶激酶-3β（pGSK-3β）蛋白的表達。 結果Ghrelin使胰島素抵抗之L6大鼠成肌細胞葡萄糖攝取量增加，細胞膜GLUT-4染色加深，pAkt及pGSK-3β蛋白表達增加（磷酸化表達增加），而總Akt和總GSK-3β蛋白無明顯變化，這種作用可被PI3K阻斷劑（LY294002）消除。 結論Ghrelin通過磷酯酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/糖原合成酶激酶-3β（PI3K/Akt/GSK-3β）信號途徑促進L6大鼠成肌細胞葡萄糖攝取量，從而提高L6大鼠成肌細胞胰島素的敏感性。
目的檢測胰島素樣生長因子-Ⅰ（insulin-like growth factor-Ⅰ，IGF-Ⅰ）蛋白及其mRNA在肥胖大鼠行Roux-en-Y胃旁路手術（RYGB）前后的表達水平變化，并探討IGF-Ⅰ表達和脂肪細胞增殖、凋亡的關系。 方法①選取SPF級SD雄性大鼠70只，隨機分為空白對照組（NC組）10只和高脂飲食組60只。高脂飲食組大鼠給予特定配方高脂飼料，NC組大鼠給予特定配方維持飼料，6周后測量高脂飲食組大鼠的體質量，選擇體質量增加在前20位的肥胖大鼠，隨機分為胃旁路術組（GB組）10只和假手術組（SO組）10只。GB組大鼠行RYGB，SO組大鼠行假手術，NC組大鼠不接受任何手術。GB組和SO組大鼠于術中、3組大鼠于處理后12周取腹股溝脂肪組織[代表皮下脂肪組織（subcutaneous adipose tissue，SAT）]和附睪脂肪組織[代表內臟脂肪組織（visceral adipose tissue，VAT）]各0.5 g，行免疫印跡法和實時熒光定量PCR法分別檢測脂肪組織中IGF-Ⅰ蛋白及其mRNA的表達。②轉染實驗。將SAT細胞分為空白對照組（BC組，未行轉染）、IGF-Ⅰ（+）組（即基因過表達組）、IGF-Ⅰ（+）空載體組、IGF-Ⅰ（-）組（即基因沉默組）及IGF-Ⅰ（-）空載體組，轉染相應載體，每組設3個復孔。轉染48 h后進行細胞增殖與凋亡實驗，并采用免疫印跡法檢測蛋白激酶B（AKT）、磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶（p-PI3K）及磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）的表達水平。③Wortmannin實驗。將SAT細胞分為Wortmannin（+）IGF-Ⅰ（+）組、Wortmannin（+）IGF-Ⅰ（-）、Wortmannin（-）IGF-Ⅰ（+）及Wortmannin（-）IGF-Ⅰ（-）組，轉染相應載體類型24 h后，加入0.1 mmol/L Wortmannin，24 h后采用免疫印跡法檢測AKT、p-AKT、p-PI3K、PI3K及GAPDH的表達水平。 結果①PCR結果表明，在SAT組織中，同GB術前組比較，GB術后組的IGF-Ⅰ蛋白及其mRNA的表達水平均降低（P < 0.01），而SO術前組和SO術后組的IGF-Ⅰ蛋白及其mRNA的表達水平比較差異均無統計學意義（P > 0.05）；VAT中，5組大鼠的IGF-Ⅰ蛋白及其mRNA的表達水平比較差異均無統計學意義（P > 0.05）。②四甲基偶氮唑鹽（MTT）比色法結果表明，同對應的空載體組比較，IGF-Ⅰ（+）組的增殖能力升高（P=0.04），IGF-Ⅰ（-）組的細胞增殖緩慢（P=0.04）；流式細胞儀檢測結果表明，同對應的空載體組比較，IGF-Ⅰ（+）組的細胞凋亡率較低（P=0.04），IGF-Ⅰ（-）組的細胞凋亡率較高（P=0.04）。③與IGF-Ⅰ（+）空載體組比較，IGF-Ⅰ（+）組的p-PI3K/PI3K（P=0.03）和p-AKT/AKT（P=0.04）比值均升高；與IGF-Ⅰ（-）空載體組相比，IGF-Ⅰ（-）組的p-PI3K/PI3K（P=0.04）和p-AKT/AKT（P=0.04）比值均降低。與Wortmannin（+）IGF-Ⅰ（+）組比較，Wortmannin（-）IGF-Ⅰ（+）組的p-AKT/AKT比值較高（P < 0.05）；與Wortmannin（-）IGF-Ⅰ（+）組比較，Wortmannin（-）IGF-Ⅰ（-）組的p-AKT/AKT比值較低（P < 0.05）。 結論IGF-Ⅰ參與大鼠皮下脂肪富集，RYGB能明顯降低大鼠皮下脂肪中IGF-Ⅰ蛋白及其mRNA的表達水平，從而達到減重效果。
目的 探究微RNA-27a（microRNA-27a，miR-27a）調控磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol-3-kinase，PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B，AKT）通路對脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）誘導的人肺腺癌細胞株A549凋亡的影響，并初步探討其機制。方法 Starbase分析miR-27a與磷脂酰肌醇-3激酶催化亞基δ（phosphatidylinositol-3 kinase catalytic subunit delta，PIK3CD）存在互補的結合位點，并以雙熒光素酶驗證。將A549細胞分為正常組、LPS組、LPS+miR-27a模擬物陰性對照組、LPS+miR-27a模擬物組、LPS+miR-27a模擬物+PI3K激活劑組。LPS+miR-27a模擬物陰性對照組、LPS+miR-27a模擬物組、LPS+miR-27a模擬物+PI3K激活劑組分別轉染miR-27a模擬物陰性對照、LPS+miR-27a模擬物、LPS+miR-27a模擬物，培養細胞6 h，更換為完全培養液培養細胞24 h，然后除正常組外，其余各組細胞添加10 mg/L LPS刺激24 h，且LPS+miR-27a模擬物+PI3K激活劑組加入PI3K激活劑740 Y-P，正常組細胞完全培養液正常培養相同時間。實時熒光定量聚合酶鏈反應檢測細胞中miR-27a表達水平；細胞計數試劑盒8檢測細胞增殖情況；Hoechst33342染色與流式細胞術檢測細胞凋亡情況；透射電鏡觀察A549細胞自噬；蛋白免疫印跡檢測細胞中PIK3CD、磷酸化AKT（phosphorylated-AKT，p-AKT）、B淋巴細胞瘤-2基因（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）、Bcl-2相關X蛋白（Bcl-2-associated X protein，Bax）、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（cleaved caspase-3）、微管相關蛋白1輕鏈3Ⅱ（microtubule-associated protein 1 light chain 3 II，LC3Ⅱ）蛋白表達。結果 miR-27a與PIK3CD存在結合位點，并經雙熒光素酶驗證。與正常組相比，LPS組、LPS+miR-27a模擬物陰性對照組A549細胞中miR-27a表達水平、增殖率、Bcl-2蛋白表達水平降低（P<0.05），凋亡率、細胞中PIK3CD、p-AKT、Bax、cleaved caspase-3、LC3Ⅱ蛋白表達水平升高（P<0.05）；分別與LPS組、LPS+miR-27a模擬物陰性對照組相比，LPS+miR-27a模擬物組A549細胞中miR-27a表達水平、增殖率、細胞中Bcl-2蛋白表達水平升高（P<0.05），凋亡率、細胞中PIK3CD、p-AKT、Bax、cleaved caspase-3、LC3Ⅱ蛋白表達水平降低（P<0.05）；與LPS+miR-27a模擬物組相比，LPS+miR-27a模擬物+PI3K激活劑組細胞中miR-27a表達水平、增殖率降低（P<0.05），凋亡率、細胞中PIK3CD、p-AKT、cleaved caspase-3、LC3Ⅱ蛋白表達水平升高（P<0.05）。正常組細胞數量較多，細胞間排列緊密，可見核大小均一，細胞器結構正常；LPS組和LPS+miR-27a模擬物陰性對照組可見細胞變圓，細胞核固縮，形成團塊現象，顯現多個大小不一的圓形自噬泡；LPS+miR-27a模擬物組核固縮細胞數降低，LPS+miR-27a模擬物+PI3K激活劑組核固縮細胞數較LPS+miR-27a模擬物組升高，均可見少量圓形自噬泡，但數目不一。結論 高表達miR-27a可以抑制PI3K/AKT通路，從而減輕LPS誘導的人肺腺癌細胞A549凋亡，而這一途徑可能與自噬減少相關。
目的了解磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B（phosphatidylinositol-3-kinase/protein kinase B，PI3K/AKT）信號通路在甲狀腺癌中的研究現狀以及在甲狀腺癌的發生、細胞分化、侵襲和轉移中的作用，以尋找甲狀腺癌治療的潛在靶點。方法檢索關于PI3K/AKT信號通路在甲狀腺癌中研究的相關文獻并進行分析及總結。結果PI3K/AKT信號通路在甲狀腺癌中直接或間接地被異常活化，導致細胞凋亡受抑制、惡性增殖、周期進展加速、侵襲、轉移等，從而促進甲狀腺癌的發生及發展；同時也有一些抑癌基因、微小RNA、長鏈非編碼RNA等間接抑制PI3K/AKT信號通路的激活或直接作用于PI3K/AKT信號通路并抑制其活性，從而抑制甲狀腺癌的發生和發展。結論在甲狀腺癌中，有不少蛋白、基因、微小RNA和長鏈非編碼RNA通過不同的靶點直接或間接地激活PI3K/AKT信號通路，促進甲狀腺癌的發生與發展；同時也有許多靶點抑制PI3K/AKT信號通路的激活，從而抑制甲狀腺癌的惡性增殖、侵襲與轉移。目前已有研究者嘗試將PI3K/AKT信號通路作為治療甲狀腺癌的切入點，深入探究PI3K/AKT信號通路在不同甲狀腺癌中的作用，此對尋找治療甲狀腺癌的新靶點具有重要意義。