目的 觀察攜帶肝細胞生長因子(hepatocyte growth factor,HGF)基因的重組腺病毒對BMSCs 的轉 染表達及活性,為研制穩定表達高生物活性細胞因子的創傷修復細胞基因藥物奠定基礎。 方法 Percoll 分離液體外分 離、培養成年Wistar 大鼠BMSCs,取第3 ~ 5 代細胞進行實驗。用免疫細胞化學法檢測BMSCs 中HGF 受體c-Met 是否表達;以轉染強度(multiplicity of infection,MOI)分別為0、25、50、100、200 pfu/cell 攜帶綠色熒光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的重組腺病毒(adenovirus GFP,Ad-GFP)轉染BMSCs,流式細胞儀測定轉染效率,MTT 法檢測細胞存活情況,以篩選出最佳MOI;并以最佳MOI 將攜帶HGF 基因的重組腺病毒(adenovirus HGF,Ad-HGF)體外轉染BMSCs,ELISA 法檢測轉染后HGF 表達水平,MTT 法檢測上清對BMSCs 增殖影響。 結果 BMSCs 胞膜表達HGF受體c-Met。MOI 為0、25、50、100 及200 pfu/cell 的Ad-GFP 轉染BMSCs 48 h 后,流式細胞儀測定轉染效率分別為0.34% ± 0.04%、40.72% ± 0.81%、61.72% ± 1.04%、85.33% ± 0.83% 及17.91% ± 0.63%,MOI 為100 pfu/cell 時對BMSCs 的轉染效率最高(P lt; 0.05);MTT 法檢測示MOI 為200 pfu/cell 時,BMSCs 損傷程度最大。以MOI 為100 pfu/cell 的Ad-HGF 轉染BMSCs 48 h 后,ELISA 法檢測示HGF 表達量達高峰;MTT 法檢測顯示BMSCs 增殖活性隨加入上清中HGF 含量的增加逐漸增強,加入10%(320 pg)時達高峰,之后劑量加大活性不再增加。 結論 Ad-HGF 可有效轉染BMSCs 并表達HGF 蛋白,HGF 蛋白可刺激BMSCs 增殖,BMSCs 可作為一種理想的基因載體細胞用于創傷修復。
目的 探討乳腺癌保乳術中利用組織瓣修復腺體殘腔的臨床應用效果。 方法 回顧性分析 2013 年 1 月至 2016 年 12 月期間在筆者所在醫院接受乳腺癌保乳術的 120 例早期乳腺癌患者的臨床資料,其中保乳術中利用組織瓣修復腺體殘腔者 60 例(觀察組),未行組織瓣修復腺體殘腔者 60 例(對照組)。比較 2 組患者的術后并發癥發生情況、術后乳房美容效果、患者滿意度及復發轉移情況。 結果 ① 術后并發癥:對照組術后發生并發癥 3 例,觀察組術后發生并發癥 2 例,2 組患者的并發癥發生率比較差異無統計學意義(χ2=0.209,P=0.648)。② 術后乳房美容效果:對照組優 23 例,良 16 例,一般 12 例,差 9 例;觀察組優 51 例,良 5 例,一般 3 例,差 1 例。觀察組患者的術后乳房美容效果優于對照組(Z=–5.234,P<0.001)。③ 主觀滿意度:對照組十分滿意 28 例,滿意 18 例,一般 12 例,不滿意 2 例;觀察組十分滿意 40 例,滿意 18 例,一般 2 例。觀察組患者的主觀滿意度優于對照組(Z=–4.381,P<0.001)。④ 隨訪:隨訪期間 2 組均無局部復發及死亡病例,但對照組發生轉移 2 例,觀察組發生轉移 1 例,2 組患者的轉移率比較差異無統計學意義(χ2=0.342,P=0.559)。 結論 乳腺癌保乳術中采用周圍組織瓣修復殘腔,相比于未行組織瓣修復的傳統保乳手術,不增加術后手術并發癥及復發轉移,且術后乳房外形美容效果好,患者主觀滿意度高。
目的 探討攜帶肝細胞生長因子的重組腺病毒(adenovirus hepatocyte growth factor,Ad-HGF)修飾的BMSCs 對實驗性2 型糖尿病大鼠創面修復的作用。 方法 采用密度梯度離心法體外分離、培養雄性Wistar 大鼠BMSCs,取第3 ~ 5 代BMSCs 以轉染復數100 轉染Ad-HGF 后備用。取20 只雌性Wistar 大鼠以高脂、高糖飼料加小劑量鏈脲菌素(streptozotocin,STZ,30 mg/kg)腹腔注射建立實驗性2 型糖尿病模型,并在大鼠背部兩側分別制備一直徑為1.5 cm 的圓形創面。根據治療方法不同將大鼠隨機分為4 組,每組5 只10 個創面:單純BMSCs 治療組(A 組),單純Ad-HGF 治療組(B 組),Ad-HGF 修飾的BMSCs 治療組(C 組)及溶劑對照組(D 組),創面制備即刻將相應細胞、病毒懸液及溶劑行創面邊緣多點注射,每個創面0.3 mL。注射后觀察創面愈合情況,記錄愈合時間,并于21 d 檢測創面的橫徑和縱徑;7、28 d 行HE 染色觀察組織愈合情況;3、7、14、28 d 分別用酶聯免疫法和熒光分光光度計檢測羥脯氨酸和糖基化終末產物(advanced glycosylation end products,AGEs)的含量。 結果 大體觀察示C 組于21 d 時創面基本愈合,橫徑和縱徑分別為0、(0.110 ± 0.024)cm,而A、B、D 組均部分創面未愈,橫徑和縱徑分別為A 組(0.470 ± 0.051)、(0.590 ± 0.041) cm,B 組(0.390 ± 0.042)、( 0.480 ± 0.032)cm,D 組(0.700 ± 0.068)、(0.820 ± 0.068) cm,與C 組比較差異均有統計學意義(P lt;0.05)。A、B、C、D 組創面愈合時間分別為(28.3 ± 1.9)、(25.9 ± 2.3)、(20.5 ± 1.9)、(36.6 ± 5.1)d,C 組與其他各組比較差異均有統計學意義(P lt; 0.05)。創面組織HE 染色示與其他各組相比,C 組7 d 時創面可見明顯的上皮細胞遷移現象,膠原形成良好,可見明顯炎性細胞浸潤;28 d 創面新生表皮平整,膠原減少,有豐富的新生小血管。與其他各組相比,注射后7、14 d C 組羥脯氨酸含量明顯增高(P lt; 0.05),而AGEs 含量在注射后14、28 d 顯著下降(P lt; 0.05)。 結 論 Ad-HGF修飾的BMSCs 異體移植可促進糖尿病大鼠創面修復。
目的探討孤立性肺結節(SPN)患者臨床特征與SPN病理間的關系。 方法回顧性調查2009年1月1日至2013年12月31日在南京軍區福州總醫院、廈門大學附屬福州市第二醫院病理確診SPN的患者231例。以病理結果為參考標準, 分別比較不同病理類型SPN患者的性別、年齡、吸煙史、吸煙量、戒煙史、肺外惡性腫瘤病史的差異。 結果女性、年齡與SPN惡性概率呈正相關, 回歸系數分別為1.090、0.063。肺外惡性腫瘤病史、吸煙史、吸煙量、戒煙史與SPN惡性概率無相關性。SPN的病理類型存在性別差異, 其中癌前病變、肺曲霉病、肺硬化性血管瘤、腺癌為女性多于男性, 肺結核、肺隱球菌病、鱗癌、腺鱗癌、炎性假瘤和轉移癌均為男性多于女性。SPN病理類型在各個年齡段間疾病分布一致。癌前病變、肺錯構瘤、肺曲霉病、肺硬化性血管瘤、腺癌、炎性假瘤的患者多數不吸煙。 結論性別、年齡有助于鑒別診斷SPN良惡性, 結節病理類型與性別、吸煙相關。
目的研究麥冬皂苷 D(OP-D)對脂多糖誘導小鼠急性肺損傷的保護作用及機制。方法將 50 只 SPF 級 C57BL/6 小鼠隨機分為對照組、假手術組、模型組、OP-D 組(10 mg·kg–1·d–1),地塞米松組(2 mg·kg–1·d–1),每組 10 只。OP-D 及地塞米松組于造模前 1 d 給予相應藥物灌胃,模型組、OP-D 組,地塞米松組小鼠通過氣管滴入脂多糖(2 mg/kg,30 μL)制作急性肺損傷模型,假手術組滴入等體積生理鹽水,正常組不做處理。于術后 6 h 稱重后處死小鼠取外周血及肺組織。通過測定小鼠肺組織重量,評估肺水腫程度;通過蘇木素伊紅染色觀察肺組織病理變化;通過熒光定量聚合酶鏈式反應檢測肺組織中白細胞介素(IL)-6、IL-10、IL-17 的 mRNA 表達;通過流式細胞術檢測外周血中 Th17 及 Treg 細胞占比變化。結果與模型組比較,OP-D 組肺水腫程度顯著下降(P<0.05),肺組織損傷減輕,肺組織中 IL-6、IL-17 mRNA 表達量及外周血中 Th17 細胞占比顯著下降(均 P<0.05),Treg 細胞占比和 IL-10 的表達顯著升高(P<0.05)。結論OP-D 可能通過調節 Th17/Treg 細胞平衡而對脂多糖所致急性肺損傷小鼠具有保護作用。