目的 觀察攜帶肝細胞生長因子（hepatocyte growth factor，HGF）基因的重組腺病毒對BMSCs 的轉 染表達及活性，為研制穩定表達高生物活性細胞因子的創傷修復細胞基因藥物奠定基礎。 方法 Percoll 分離液體外分 離、培養成年Wistar 大鼠BMSCs，取第3 ～ 5 代細胞進行實驗。用免疫細胞化學法檢測BMSCs 中HGF 受體c-Met 是否表達；以轉染強度（multiplicity of infection，MOI）分別為0、25、50、100、200 pfu/cell 攜帶綠色熒光蛋白（green fluorescent protein，GFP）基因的重組腺病毒（adenovirus GFP，Ad-GFP）轉染BMSCs，流式細胞儀測定轉染效率，MTT 法檢測細胞存活情況，以篩選出最佳MOI；并以最佳MOI 將攜帶HGF 基因的重組腺病毒（adenovirus HGF，Ad-HGF）體外轉染BMSCs，ELISA 法檢測轉染后HGF 表達水平，MTT 法檢測上清對BMSCs 增殖影響。 結果 BMSCs 胞膜表達HGF受體c-Met。MOI 為0、25、50、100 及200 pfu/cell 的Ad-GFP 轉染BMSCs 48 h 后，流式細胞儀測定轉染效率分別為0.34% ± 0.04%、40.72% ± 0.81%、61.72% ± 1.04%、85.33% ± 0.83% 及17.91% ± 0.63%，MOI 為100 pfu/cell 時對BMSCs 的轉染效率最高（P lt; 0.05）；MTT 法檢測示MOI 為200 pfu/cell 時，BMSCs 損傷程度最大。以MOI 為100 pfu/cell 的Ad-HGF 轉染BMSCs 48 h 后，ELISA 法檢測示HGF 表達量達高峰；MTT 法檢測顯示BMSCs 增殖活性隨加入上清中HGF 含量的增加逐漸增強，加入10%（320 pg）時達高峰，之后劑量加大活性不再增加。 結論 Ad-HGF 可有效轉染BMSCs 并表達HGF 蛋白，HGF 蛋白可刺激BMSCs 增殖，BMSCs 可作為一種理想的基因載體細胞用于創傷修復。
引用本文： 哈小琴,董芳,呂同德. 肝細胞生長因子基因對BMSCs的修飾及活性觀察. 中國修復重建外科雜志, 2010, 24(5): 613-617. doi: 復制