目的：建立存活時間較長的急性重癥肝炎小鼠模型。方法：將50只BALB/c小鼠平均分成5組，其中A、B、C、D 4組為實驗組，E組為對照組；實驗組分別給予D氨基半乳糖（D-GalN）和脂多糖（LPS），劑量分別為800 mg/kg和10 μg/kg、500 mg/kg和10 μg/kg、500 mg/kg和5 μg/kg、300 mg/kg和5 μg/kg，用生理鹽水稀釋至1 mL，行腹腔注射；對照組E腹腔注射生理鹽水2 mL。以12 h死亡率、24 h死亡率及肝組織學改變為觀察指標。結果：A、B、C、D及E組小鼠12 h死亡率分別為80%%、30%、10%、0和0；24 h死亡率分別為90%、60%、30%、0和0；A和B組小鼠肝組織學均呈急性重癥肝炎表現，C組中有5只小鼠肝組織學符合重癥肝炎的表現，而該組其余小鼠及D組所有肝組織學雖有炎癥改變，但達不到重癥肝炎的程度，E組肝組織學表現正常。結論：LPS 10 μg/kg聯合D- GalN 500 mg/kg可成功建立12 h存活率較高的急性重癥肝炎小鼠模型。
目的探討梗阻性黃疸大鼠脂多糖結合蛋白在不同梗阻時間的變化及其增敏機理。方法將80只雄性Wistar大鼠隨機分為梗阻性黃疸組（OJ組，n=40）和假手術組（SO組，n=40），分別于膽總管結扎手術前及手術后5 d、10 d、15 d、20 d檢測兩組大鼠血清中脂多糖結合蛋白及血漿中內毒素、TNF-α和IL-6水平，每組每一時相點各取8只大鼠。結果OJ組大鼠在膽總管結扎術后10 d，其血清中脂多糖結合蛋白值為（11.25±2.41） mg/L，較SO組〔（5.32±1.35） mg/L〕明顯升高（P＜0.05）， 且隨著梗阻時間的延長而進一步升高。相關分析顯示，血清脂多糖結合蛋白與血漿內毒素、TNF-α和IL-6在大部分時相呈明顯正相關。結論梗阻性黃疸時血清脂多糖結合蛋白水平升高，其增敏作用在梗阻性黃疸多器官損害中可能具有重要的作用。由此提示，通過降低血清中脂多糖結合蛋白，阻斷其增敏作用，可為防治梗阻性黃疸提供一種新的思路。
目的探討內毒素血癥時大鼠肝組織中脂多糖結合蛋白mRNA的表達、血漿中脂多糖結合蛋白(LBP)含量的變化及其意義。方法經大鼠尾靜脈注入內毒素（5 mg/kg）建立內毒素血癥動物模型，檢測不同時點模型鼠肝組織中LBP mRNA的表達，同時檢測血漿中LBP、內毒素、TNFα及IL6含量的變化，并與對照組相比較。另取肝組織在電鏡下觀察其病理學改變。結果隨著內毒素血癥時間的延長，內毒素組大鼠肝組織LBP mRNA的表達明顯增強，血漿中LBP、TNFα和IL6含量也明顯增加，與對照組比較差異有高度顯著性（P＜0.01）。電鏡觀察見肝細胞脂肪變，線粒體空化，枯否氏細胞數量增多、體積增大、吞噬功能增強。結論內毒素血癥時，大鼠肝組織中LBP mRNA表達明顯增強，血漿中LBP含量也明顯增加。由此提示，增高的LBP可能在脂多糖介導的枯否氏細胞激活及產生、釋放各種炎性介質中可能起了重要作用。
目的 觀察脂多糖（LPS）及前炎癥細胞因子IL-1β、TNF-α誘導人原代氣道上皮細胞人β防御素-2（hBD-2）的表達，探討呼吸道先天性病原體防御機制。方法 LPS、IL-1β及TNF-α刺激培養的人原代氣道上皮細胞后，RT-PCR法檢測hBD-2 mRNA的表達，Western blot和免疫組化法檢測hBD-2蛋白的表達。結果 正常人原代上皮細胞有微量hBD-2 mRNA表達，不同質量濃度的LPS、IL-1β、TNF-α刺激細胞后，hBD-2 mRNA表達呈劑量依賴性增加，與對照組差異顯著。0.1 μg/mL的LPS、1 ng/mL的IL-1β和10 ng/mL的TNF-α刺激上皮細胞4 h后，細胞均可見hBD-2蛋白表達。結論 一定劑量的LPS及前炎性細胞因子可誘導人氣道上皮細胞hBD-2表達，且hBD-2可較快表達，hBD-2的表達可能是氣道最初的防御反應。
目的 探討 霧化吸入前列腺素 E1 （ PGE1 ）對脂多糖（LPS）所致大鼠急性肺損傷（ALI）模型Th1/Th2的影響。方法 尾靜脈注射LPS復制大鼠ALI模型，PGE1霧化入寬大玻璃瓶內讓大鼠自由吸入，用ELISA法檢測大鼠外周血和支氣管肺泡灌洗液（BALF）中干擾素γ（IFN-γ）、白細胞介素4（IL-4）的水平及IFN-γ/IL-4比值。結果 LPS組外周血及BALF中IFN-γ/IL-4比值較生理鹽水對照組（NS組）顯著升高（Plt;0.01），PGE1組外周血IFN-γ/IL-4（Th1/Th2）比值在6、12及24 h時間點顯著低于LPS組（Plt;0.01），而BALF中各時間點IFN-γ/IL-4（Th1/Th2）比值顯著低于LPS組（Plt;0.01）。結論 霧化吸入PGE1可使LPS所致大鼠ALI失衡的Th1/Th2趨于平衡，減輕LPS所致大鼠ALI。
目的 研究脂多糖結合蛋白（LBP）抑制肽P12對脂多糖（LPS）與小鼠肺泡巨噬細胞（AMs）結合的抑制作用，探討LBP抑制肽體內阻斷內毒素信號傳導通路的機制。方法 40只小鼠隨機分為5組：對照組、內毒素血癥組、低劑量P12組、中劑量P12組和高劑量P12組，每組8只。腹腔內注射LPS復制內毒素血癥模型，尾靜脈注射P12，流式細胞檢測分析（FACS）異硫氰酸熒光素標記的LPS（FITC-LPS）與AMs的結合，以平均熒光強度（MFI）表示；ELISA法檢測小鼠血清中腫瘤壞死因子α（TNF-α）的含量。結果 內毒素血癥組小鼠AMs MFI明顯高于對照組（45.31%比4.61%，Plt;0.05）；低劑量P12組、中劑量P12組和高劑量P12組的MFI分別為40.08%、30.76%和24.45%，明顯低于內毒素血癥組（低劑量組P＞0.05，中劑量P12組和高劑量組P均lt;0.05）。內毒素血癥組小鼠血清中TNF-α的含量顯著高于對照組[（180.17±39.14）pg/mL比（24.88±5.82）pg/mL，Plt;0.01]；低劑量P12組、中劑量P12組和高劑量P12組血清中TNF-α的含量分別為（112.69±19.78）pg/mL、（86.34±9.25）和（70.48±8.48）pg/mL，均明顯低于內毒素血癥組（P均lt;0.05）。結論 LBP抑制肽P12抑制了LPS與內毒素血癥小鼠AMs的結合，顯著降低了LPS誘導的TNF-α的產生。
目的 觀察不同潮氣量通氣對脂多糖所致大鼠急性肺損傷的影響, 以及谷氨酰胺的防護作用。方法 將30 只健康雄性SD大鼠隨機分為三組。實施麻醉和氣管切開后, 氣管內注入脂多糖( LPS) 5 mg/kg, 接小動物通氣機進行機械通氣, A 組實施常規潮氣量通氣, B 組實施大潮氣量通氣,C 組大潮氣量通氣前1 h靜脈注入谷氨酰胺干預。每小時行1 次動脈血氣分析。通氣4 h 后頸動脈放血處死大鼠。測定全肺濕重, 并計算肺系數( 肺濕重/ 體重×100) 。測定BALF 中白細胞及中性粒細胞計數、蛋白含量、TNF-α、IL-6 和中性粒細胞趨化因子1( CINC-1) 水平, 肺組織勻漿髓過氧化物酶( MPO) 、超氧化物歧化酶( SOD) 水平。結果 B 組大鼠PaO2 值、肺組織SOD 水平較A 組顯著下降,肺系數、BALF中白細胞及中性粒細胞計數、蛋白含量、TNF-α、IL-6、CINC-1 水平、肺組織MPO 水平較A 組顯著增高; C 組大鼠PaO2 值、肺組織SOD 水平較B 組顯著升高, 肺系數、BALF 中白細胞及中性粒細胞計數、蛋白含量、TNF-α、IL-6、CINC-1 水平、肺組織MPO水平較B 組顯著下降。結論 大潮氣量通氣能加重脂多糖所致大鼠急性肺損傷, 而谷氨酰胺對此有較明顯的防護作用。
目的 結論探討采取小劑量脂多糖( LPS) 間斷腹腔注射的方式制作內毒素誘導的小鼠ALI和肺纖維化動物模型, 了解該方法引起的肺急性炎性反應以及纖維化的發展過程。方法健康C57BL/ 6 小鼠40 只隨機分為陰性對照組( Con 組) 、LPS-3 d 組、LPS-2 周組和LPS-4 周組, 每組10 只。對三個LPS 處理組連續3 d 腹腔注射LPS( 5 mg /kg) , 分別于各觀察終點( 3 d、2 周和4 周) 取材; 對Con 組連續3 d 腹腔注射等體積生理鹽水, 于注射后3 d 取材。通過HE 染色和Van-Gieson 膠原染色及Ashcroft 肺纖維化評分了解LPS 刺激后不同時期小鼠肺組織炎癥和纖維化發展的過程, 同時采用RT-PCR 檢測了解肺組織Ⅰ型前膠原和α平滑肌肌動蛋白( α-SMA) mRNA 表達強度, 通過肺組織羥脯氨酸含量測定了解肺間質膠原沉積和纖維化程度, 并觀察各組實驗動物的存活情況。結果 小鼠在接受LPS 腹腔注射后3 d 肺組織即出現急性炎性反應; 注射后2 周, 肺間質出現膠原沉積, Ashcroft纖維化評分增高; 4 周形成明顯肺間質纖維化, Ashcroft 纖維化評分進一步升高。肺組織膠原及α-SMA的表達量自LPS 刺激后3 d 起增高, 4 周后達到高峰。到觀察終點所有動物全部存活。結果 LPS 誘發的ALI 和炎性反應在感染早期即啟動了纖維化進程。使用劑量為5 mg/kg的LPS 對于小鼠進行連續3 d 腹腔注射可以成功制作內毒素誘導的小鼠ALI 和肺纖維化的動物模型, 制作成功率高,動物死亡率低, 適合對小動物進行較長時間的觀察和研究。
目的 研究髓樣分化蛋白2( MD-2) 在脂多糖( LPS) 誘導的急性肺損傷( ALI) 大鼠肺組織中的表達及其作用。方法 20 只健康雄性SD 大鼠隨機分為LPS 組和對照組, 通過支氣管肺泡灌洗分離肺泡巨噬細胞, 采用RT-PCR、Western blot 和免疫組化方法分別檢測MD-2 mRNA 和蛋白的表達, ELISA 方法測定血清腫瘤壞死因子α( TNF-α) 水平。將MD-2 siRNA 轉染大鼠肺泡巨噬細胞系NR8383, 以終濃度1 μg/mL的LPS 刺激細胞, 采用RT-PCR 和Western blot 方法分別測定細胞MD-2mRNA 和蛋白的表達, ELISA 方法測定細胞培養上清液TNF-α水平。結果 LPS 組大鼠肺泡巨噬細胞和肺組織標本中MD-2 mRNA 和蛋白的表達均顯著高于對照組( P lt;0. 01) , 血清TNF-α水平明顯升高( P lt;0. 01) 。在LPS 刺激下, NR8383 細胞MD-2 mRNA 和蛋白的表達顯著增加( P lt;0. 01) , 細胞培養上清液中TNF-α水平升高( P lt;0. 01) 。經MD-2 siRNA 處理后, NR8383 細胞在LPS 刺激下MD-2mRNA 和蛋白的表達未見明顯增加( P gt; 0. 05) , 細胞培養上清液中TNF-α水平未見明顯升高( P gt;0. 05) 。結論 MD-2 在LPS 所致ALI 大鼠肺組織中表達顯著上調, 沉默肺泡巨噬細胞MD-2 基因可抑制LPS 刺激引起的細胞因子分泌增加, 提示MD-2 在LPS所致大鼠ALI 中起重要作用。
目的 探討肝臟X 受體α( LXRα) 激活劑T0901317 對脂多糖( LPS) 所致急性肺損傷( ALI) 大鼠動物模型的保護效應。方法 72 只雄性Wistar 大鼠, 按隨機數字表法分為對照組、LPS 組和T0901317 干預組。觀察各組大鼠PaO2、肺組織髓過氧化物酶( MPO) 活性及肺組織病理變化; 采用逆轉錄-聚合酶鏈反應( RT-PCR) 檢測肺組織中LXRα、腫瘤壞死因子α( TNF-α) mRNA 表達; 采用酶聯免疫吸附法( ELISA) 檢測TNF-α蛋白變化; 采用免疫組化染色觀察肺組織LXRα蛋白變化。結果 與對照組比較, LPS 致傷后各時間點PaO2 顯著降低, 肺組織干/ 濕重比值( W/D) 、MPO 活性均顯著升高( P lt;0. 05 ) , 組織病理顯示肺組織受損; 肺組織LXR-αmRNA 表達下降, TNF-αmRNA 升高( P lt;0. 05 ) , 肺組織勻漿和動脈血清中TNF-α顯著升高。免疫組化顯示LXRα蛋白在對照組肺組織中表達較高水平, 在LPS致傷后可見該蛋白表達較對照組顯著下降( P lt; 0.05 ) 。T0901317 干預組LXRα在基因和蛋白水平表達上調, TNF-α表達下降, 差異均有統計學意義( P lt; 0. 05) , 同時觀察到肺部炎癥明顯減輕。結論 在LPS誘發的大鼠ALI 模型中, T0901317 通過促進LXR-α表達, 抑制TNF-α表達, 減輕炎性細胞在肺組織的浸潤和聚集, 從而具有保護作用。