目的研究大鼠心肌組織源性細胞外基質(ECM)對心肌球源性干細胞(CDC)體外分化、增殖及凋亡的影響。 方法采用心肌組織塊培養法培養大鼠CDC,采用脫細胞法制備ECM,ECM包被于培養皿上,與常規CDC培養方法比較CDC體外分化、增殖及凋亡的差異。 結果ECM能夠促進CDC向血管內皮細胞,心肌肌動蛋白及平滑肌細胞分化(0.060±0.002 vs. 0.043±0.002,P<0.001;0.082±0.003 vs. 0.051±0.002,P<0.001;0.055±0.002 vs. 0.034±0.001,P<0.001);促進CDC體外增殖,降低凋亡壞死率(0.052±0.002 vs. 0.025±0.001,P<0.001)。 結論本實驗細胞培養法可獲得表達c-kit的CDC細胞,脫細胞法提取的心肌ECM可有效脫掉心肌組織中的細胞成分,較好地保留了心肌ECM的成分和結構。體外研究證實ECM可促進CDC向血管內皮、血管平滑肌、心肌細胞分化,促進增殖、降低凋亡。
目的建立一種新的不開胸深低溫停循環(DHCA)兔模型,研究DHCA對腎臟的損傷及早期檢測指標。 方法以體重3.5~4.0 kg新西蘭大耳兔(雌雄不拘)42只分為兩組,每組各21只:兩組均于右頸動靜脈插管建立體外循環,A組肛溫維持在28℃持續體外循環,B組肛溫降至16~18℃時停循環,停循環60 min后開放循環復溫,在30 min內復溫至肛溫35℃,之后維持體外循環30 min,兩組體外循環時間相同。在術前、術后6 h、24 h及48 h分別采集靜脈血檢測血清肌酐(Cr)、β-痕跡蛋白(β-TP)、采集尿樣本行尿中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)值檢測。兩組分別在術前、術后6 h、24 h及48 h處死動物各4只,留取腎臟組織分別檢測丙二醛(MDA)含量、HE染色和凋亡指標(TUNEL)染色以及透射電子顯微鏡觀察腎小管上皮細胞形態改變。 結果A組圍術期死亡4只,B組圍術期死亡5只。(1)血清Cr值:A組組內各時間點之間差異無統計學意義(P>0.05),B組在術后24 h與組內及A組間比較明顯升高(P<0.05)。(2)血β-TP及尿NGAL值:A組組內各時間點之間差異無統計學意義(P>0.05)。B組內術后6 h、24 h、48 h與術前比較明顯升高(P<0.05),B組在術后24 h與組內其它時間點比較明顯升高(P<0.05)。B組術后6 h、24 h、48 h與A組比較明顯升高(P<0.05)。(3)腎組織丙二醛(MDA)含量:B組在術后24 h與組內及組間比較明顯升高(P<0.05)。(4)HE染色可見B組在術后24 h腎小管上皮細胞病理損傷明顯,A組在術后24 h腎小管上皮細胞病理無明顯改變。(5)TUNEL染色陽性率:B組在術后24 h與組內及組間比較明顯升高(P<0.05)。(6)電子顯微鏡觀察可見B組在術后24 h腎小管上皮細胞內細胞器病理損傷明顯,A組腎小管上皮內細胞器病理變化不明顯。 結論不開胸DHCA兔模型對于研究DHCA造成的器官損傷是一種簡單、方便、經濟且能夠長期生存的動物模型。在DHCA手術后24 h腎損傷最嚴重,血β-TP和尿NGAL是DHCA腎損傷的早期檢測指標。
目的探索丙戊酸抑制炎性細胞及平滑肌細胞從而對大鼠主動脈瘤的抑制作用。 方法應用豬胰彈性蛋白酶通過外膜浸泡 方法構建大鼠胸主動脈瘤模型,分為生理鹽水空白對照組(C組)、外膜浸泡豬胰彈性蛋白酶(PPE)組(P組)和外膜浸泡PPE+腹腔注射丙戊酸(VPA)組(PV組),PV組行腹腔注射 VPA 200 mg/kg,連續7 d。三組動物應用血管超聲檢測血管內徑,于術后14 d取材,觀察動脈瘤血管大體形態并對標本行染色分析,并對白介素1(interleukin 1,IL-1)、白介素6(interleukin 6,IL-6)、平滑肌SM22α蛋白(smooth muscle 22 alpha,SM22α),基質金屬蛋白酶類(matrix metallopeptidases,MMPs)如MMP-2、MMP-9等指標進行免疫組織化學分析及Western blot法檢測蛋白的表達水平。 結果血管超聲檢測提示PV組血管內徑小于對照P組(P<0.05),HE染色及免疫組織化學染色顯示P組細胞排列無序、間質紊亂,PV組彈性蛋白層保存較為完好,PV組IL-1、IL-6、MMP-2、MMP-9蛋白表達明顯下降,SM22α蛋白表達上升。 結論VPA可以抑制動脈瘤炎性細胞及平滑肌細胞的表型轉化,降低細胞增殖水平,減少基質金屬蛋白酶的分泌,抑制大鼠胸主動脈瘤生長。
目的總結不同手術方式治療急性Stanford A型主動脈夾層的臨床經驗。 方法回顧性分析2008年1月至2012年11月于中國醫科大學附屬第一醫院因急性Stanford A型主動脈夾層而實施外科治療的197例患者的臨床資料。男131例、女66例,年齡(51.2±13.9)歲。所有患者經磁共振成像(MRI)或主動脈CT血管造影(CTA)確診。根據主動脈根部病變情況,進行單純升主動脈置換、Bentall、Wheat、Cabrol或David手術。主動脈弓部進行全主動脈弓置換、半弓置換或簡化全主動脈弓置換+降主動脈支架象鼻手術。 結果近端單純升主動脈置換113例(57.4%),Bentall手術67例(34.0%),Wheat手術13例(6.6%),Cabrol手術1例(0.5%),David手術3例(1.5%)。全主動脈弓置換+降主動脈支架象鼻手術82例(41.6%),半弓置換+降主動脈支架象鼻手術77例(39.1%),簡化全主動脈弓置換+降主動脈支架象鼻手術41例(20.8%)。二次開胸止血1例(0.5%),無永久性神經系統并發癥發生,手術30 d死亡率為4.1%(8/197);隨訪時間3~52(15.9±11.4)個月,隨訪率65.0%;1例馬方綜合征患者術后8個月死于腹主動脈瘤破裂。 結論根據病變情況,選擇適當的外科治療策略,急性Stanford A型主動脈夾層外科治療效果滿意。