【摘要】 目的 優選出紫冰栓中紫草油的最佳提取工藝。 方法 以左旋紫草素的含量為工藝考察指標,使用高效液相色譜建立左旋紫草素含量測定方法,采用L9(34)正交試驗法優化紫草油的提取條件。 結果 選用紫草,加8倍菜籽油,溫度140 ℃,加熱0.5 h為最優提取工藝。 結論 優選的提取工藝合理、可行,質量可控。【Abstract】 Objective To optimize the preparation process of extracting arnebiae oil from Zibing suppository. Methods The optimum preparation process of extracting arnebiae oil was investigated by L9(34) orthogonal design as the shikonin content index. Results The optimum technical condition: added eight times rape oil and cooked for half an hour with the temperature of 140 ℃. Conclusion The optimized preparation procedure is feasible and the quality of the product can be controled.
目的構建紅景天苷/膠原蛋白/聚己內酯(polycaprolactone,PCL)復合神經導管支架材料并橋接修復大鼠坐骨神經缺損,探討其修復神經缺損效果。 方法利用W/O/W方法制備紅景天苷微球,檢測其緩釋率;然后取10、20、40 μg紅景天苷微球分別與1 mL膠原蛋白混合,冷凍法制備神經導管芯層;靜電紡絲技術構建膠原蛋白/PCL神經導管殼層;將芯層和殼層利用京尼平交聯制備紅景天苷微球/膠原蛋白/PCL復合神經導管。掃描電鏡觀察交聯前后神經導管結構。將38只Wistar大鼠隨機分為5組,其中A、B、C、D組各9只,E組2只。各組大鼠制備15 mm長坐骨神經缺損模型后,分別采用膠原蛋白/PCL復合導管(A組),10、20、40 μg/mL紅景天苷/膠原蛋白/PCL復合神經導管(B、C、D組)以及自體神經(E組)橋接修復。觀察各組大鼠存活情況;術后1、3、6個月行坐骨神經運動功能指數(sciatic functional index,SFI)評價;6個月后行大體觀察、神經電生理檢測,并取材行組織學、免疫組織化學染色[S-100和外周髓鞘蛋白0(peripheral myelin protein 0,P0)]觀測。 結果紅景天苷微球于3 d出現突釋,13 d后緩釋趨于平穩,累計緩釋率達76.59%,可持續緩釋至16 d。掃描電鏡觀察示,神經導管殼層交聯后,無序排列的纖維變得相互粘連、皺縮、致密且有空隙;芯層交聯前后孔道均清晰可見。各組大鼠術后無感染及死亡。術后1、3、6個月,E組SFI顯著高于A~D組(P<0.05);術后1個月,B、C、D組高于A組(P<0.05),B、C、D組間差異無統計學意義(P>0.05);3個月,A~D組間比較差異均無統計學意義(P>0.05);6個月,C組高于A、B、D組(P<0.05),A、B組高于D組(P<0.05),A、B組間差異無統計學意義(P>0.05)。除C、E組術后1、3、6個月SFI比較差異有統計學意義(P<0.05)外,其余各組組內各時間點間比較差異均無統計學意義(P>0.05)。術后6個月,大體觀察示B、C組導管支架兩端連接良好、神經較粗,A、D組近端連接神經較細;各組導管兩端材料有明顯降解。神經電生理檢測示,C、E組潛伏期/傳導速度顯著低于A、B、D組(P<0.05),C、E組間以及A、B、D組間比較差異均無統計學意義(P>0.05)。組織學觀察示,B、C、E組神經纖維組織明顯多于A、D組,且C組神經纖維排列與E組相近,各導管組芯層材料完全降解。免疫組織化學染色示,各組均可見S-100及P0蛋白表達,B、C、E組兩者表達水平均高于A、D組,且依次增強(P<0.05);A、D組S-100表達水平比較差異無統計學意義(P>0.05),P0表達水平A組低于D組(P<0.05)。 結論紅景天苷微球/膠原蛋白/PCL復合神經導管能促進大鼠坐骨神經損傷修復再生。
目的 探討載柚皮苷復合支架的性能及其對兔骨軟骨缺損修復的效果。 方法 利用 W/O/W 方法制備載柚皮苷和無載柚皮苷緩釋微球;以凹凸棒石和 Ⅰ 型膠原蛋白為材料,通過“3 層夾心法”分別構建載柚皮苷、無載柚皮苷和載 TGF-β1 復合支架。分別利用體外緩釋、掃描電鏡和細胞計數試劑盒 8 法評價載柚皮苷微球的緩釋效果、支架的形貌和細胞相容性。取 40 只日本大耳白兔隨機分為 A、B、C、D 4 組,每組 10 只。于兔雙側股骨髁間窩處制備直徑 4.5 mm、深 4 mm 的骨軟骨缺損模型,A 組為缺損組(空白對照),B、C、D 組分別于骨軟骨缺損處植入無載柚皮苷復合支架(陰性對照組)、載柚皮苷復合支架(實驗組)及載 TGF-β1 復合支架(陽性對照組)。分別于術后 3、6 個月時取材,行大體、HE 染色、甲苯胺藍染色,分別觀察骨軟骨缺損修復效果;Western blot 檢測新生軟骨 Ⅱ 型膠原蛋白表達水平。 結果 載柚皮苷微球具有良好的緩釋效果;構建的骨軟骨復合支架有較好的孔隙;載柚皮苷軟骨層支架細胞的增殖率與無載柚皮苷支架比較明顯增加,差異有統計學意義(P<0.05)。兔體內植入實驗大體觀察示,術后 3 個月 C、D 組缺損范圍與 A、B 組相比明顯縮小;術后 6 個月 C 組缺損處被新生軟骨所覆蓋,D 組新生軟骨與周圍正常軟骨整合良好。組織學染色示,術后 3 個月 A、B 組缺損處被少量纖維組織填充,C、D 組可見少量軟骨生成;術后 6 個月 C、D 組新生骨軟骨組織與正常骨軟骨類似,A、B 組缺損處以大量纖維組織為主。Western blot 檢測示,術后 3、6 個月 C、D 組缺損處新生組織中 Ⅱ 型膠原蛋白表達量均顯著高于 A、B 組,差異有統計學意義(P<0.05);C、D 組間比較差異無統計學意義(P>0.05)。 結論 載柚皮苷復合支架具有良好的組織相容性,并對兔關節骨軟骨缺損有較好的修復效果。
本研究旨在探討 cAMP/Ca2+ 信號通路在紅景天苷誘導骨髓間充質干細胞(BMSCs)向神經元細胞定向分化中的作用機制。將骨髓間充質干細胞株 D1 細胞分為空白對照組和紅景天苷誘導組,空白對照組細胞加入不含藥物的等量 D/F12 完全培養液,誘導組細胞加入含有 100 mg·L–1 紅景天苷的 D/F12 完全培養液分別作用 24、48 和 72 h。運用 RT2 Profiler PCR Array 方法檢測紅景天苷誘導 BMSCs 不同時間后 cAMP/Ca2+ 信號通路中差異表達的基因。實驗表明,紅景天苷分別誘導 BMSCs 24、48 和 72 h 后,與空白對照組比較,表達有差異的基因共 38 個,其中上調基因 23 個,下調基因 15 個,經過篩選上調較顯著的基因有 4 個:DNA 損傷誘導因子 3(Ddit3)、熱休克蛋白 5(Hspa5)、磷酸酶1調節亞單位 15a(Ppp1r15a)、前列腺素內過氧化物合酶(Ptgs2);下調顯著的基因有 4 個:胰高血糖素(Gcg)、白細胞介素 2(Il2)、腫瘤壞死因子(Tnf)、生長激素抑制素(Sst)。這些基因可能對紅景天苷誘導 BMSCs 向神經元細胞的定向分化具有一定影響。
本研究目的是提高腦出血磁感應相移檢測系統的靈敏度。采用基于特征頻帶磁感應相移譜的檢測方法, 對通過自體血注入法建立腦出血的13只家兔進行實驗研究, 獲得了65組相移譜數據, 然后根據特征頻帶下腦出血相移譜的特點設計用于判斷腦出血嚴重程度的B-F分布圖。結果顯示特征頻帶內兔腦相位差隨出血量增加而增大, 出血量3 mL時相位差可達-7.750 3°±1.420 4°;B-F分布圖能有效地判別腦出血嚴重程度。本研究顯示基于特征頻帶磁感應相移譜的檢測方法將腦出血磁感應檢測的靈敏度提高了一個數量級。
目的 研制符合胸鎖關節解剖學特點、固定可靠、手術操作簡便的解剖鎖定鋼板,為治療胸鎖關節脫位或周圍骨折提供一種理想的內固定器械。 方法 取 8 具(16 側)成人防腐、濕潤胸鎖關節標本,分別采用大體測量和 CT 測量胸鎖關節周圍骨性結構參數(包括胸骨柄厚度、胸骨切跡寬度、鎖骨近端 1/3 的前后徑、鎖骨近端 1/3 的上下徑、鎖骨近端與胸骨柄在冠狀面的夾角、胸鎖關節在解剖位向前的成角),設計并研制出胸鎖關節解剖鎖定鋼板。標本均用手術刀完全切斷胸鎖韌帶及關節囊,造成胸鎖關節完全脫位模型。將每具標本的左、右側胸鎖關節隨機配對分為試驗組(解剖型鎖定鋼板固定)和對照組(斜 T 形鎖定鋼板固定)。在萬能力學試驗機上模擬胸鎖關節活動及常見受力機制,分別進行鎖骨遠端負載、胸鎖關節扭轉、鋼板螺釘抗拔出 3 項生物力學性能測試。 結果 標本大體測量與 CT 測量的各項解剖學參數比較差異均無統計學意義(P>0.05)。鎖骨遠端負載試驗中,在解剖位垂直于鎖骨遠端向后加載至 20 N 時,試驗組加載點的位移為(8.455±0.981)mm,顯著小于對照組的(10.163±1.379)mm(t=–3.012,P=0.020);兩組鎖骨遠端向上加載點的位移[分別為(5.427±1.154)、(6.393±1.040)mm]比較差異無統計學意義(t=–1.459,P=0.188)。胸鎖關節扭轉試驗中,順時針扭角為 2、4、6、8、10° 時以及逆時針扭角為 4、6、8、10° 時,試驗組扭矩顯著大于對照組(P<0.05)。順時針和逆時針扭轉時試驗組扭轉剛度分別為 0.122、0.108 N·m/°,均顯著高于對照組的 0.083、0.078 N·m/°(F=67.824,P=0.000;F=20.992,P=0.002)。鋼板螺釘抗拔出試驗中,試驗組最大抗拔出力為(225.24±16.02)N,顯著大于對照組的(174.40±21.90)N(t=5.785,P=0.001)。 結論 新設計的胸鎖關節解剖鎖定鋼板可實現胸鎖關節的三維固定,具有固定可靠、手術操作簡便、創傷小、生物力學性能優越、利于早期功能鍛練的優勢,可能成為臨床治療胸鎖關節脫位及周圍骨折的一種較理想的內固定器械。