目的建立流式細胞術檢測大鼠肺泡巨噬細胞(AM)吞噬 AlexaFluor 488(AF488)熒光染料標記細菌的方法。方法用不同濃度的 AF488 標記金黃色葡萄球菌和肺炎鏈球菌,流式細胞術檢測 AF488 對上述細菌的標記率和平均熒光強度;AM 與不同濃度比例的 AF488 標記的細菌于 37 ℃ 共孵育 2、4、6 和 8 h,洗滌后加臺盼藍淬滅未被吞噬的細菌熒光,流式細胞術檢測 AM 平均熒光強度、吞噬率和吞噬指數;激光共聚焦熒光顯微鏡下觀察 AM 吞噬細菌的情況及分布。結果AF488 的濃度大于 50 μg/mL 時,金黃色葡萄球菌和肺炎鏈球菌的標記率均大于 92%(P<0.05),金黃色葡萄球菌和肺炎鏈球菌的標記率在熒光染料濃度大于 50 μg/mL 便已迅速達到上限。隨著孵育時間的延長,AM 的吞噬率從孵育 2 h 的 20.4% 升高到 8 h 的 76.5%。隨著細菌比例的增加,AM 的吞噬率從 1∶10 的 7.7% 升高到 1∶300 的 85.1%。結論流式細胞術檢測 AM 吞噬 AF488 熒光染料標記的細菌是測定 AM 吞噬活性的有效方法,但染料濃度、孵育時間和細菌比例均會對結果產生影響。
目的分析誤診為支氣管哮喘(簡稱哮喘)的其他疾病, 以減少臨床誤診。 方法對廣州呼吸疾病研究所2012年2月至2014年2月誤診為哮喘的69例患者的臨床資料進行回顧性分析, 并總結疾病的特點。 結果多達13種疾病誤診為哮喘, 占前5位的分別為嗜酸粒細胞性支氣管炎(21.74%)、上氣道咳嗽綜合征(20.29%)、慢性阻塞性肺疾病(13.04%)、變態反應性支氣管肺曲霉病(7.25%)和過度換氣綜合征(7.25%), 少見疾病有嗜酸性肉芽腫性血管炎及聲帶功能障礙等。 結論許多疾病與哮喘有相似表現, 加強對哮喘及與其有相似癥狀的其他疾病的認識是避免和減少誤診的關鍵。
目的通過糞菌移植(FMT)方法在小鼠上建立慢性阻塞性肺疾病(簡稱慢阻肺)的腸道菌群研究模型并對其移植效果進行初步評價。方法入組健康對照、慢阻肺Ⅰ-Ⅱ級和慢阻肺Ⅲ-Ⅳ級患者各 30 例并收集其糞便制作糞菌混懸液,通過灌胃方法對小鼠進行 FMT。移植后第 29 天采集全血行單個核細胞分析,對小鼠移植前后的腸道菌群進行 16S rRNA 測序分析,對模型小鼠進行初步疾病模型評價。結果抗生素預處理后小鼠腸道的 OTU、Chao 1 和 Shannon 指數均顯著下降(P<0.001),接受健康對照和慢阻肺患者 FMT 后的受體小鼠其 OTU、Chao 1 和 Shannon 指數顯著升高(P<0.01 或 P<0.05)。健康對照 FMT 組、慢阻肺Ⅰ-Ⅱ FMT 組和慢阻肺Ⅲ-Ⅳ FMT 組小鼠菌群豐度在厚壁菌門、變形桿菌門和放線門中均與磷酸鹽緩沖液 FMT 組小鼠存在顯著性差異(P<0.05 或 P<0.01)。慢阻肺Ⅰ-Ⅱ FMT 組和慢阻肺Ⅲ-Ⅳ FMT 組小鼠外周血 CD3+、CD3+CD4+和 CD3+CD8+ 細胞百分比升高(P<0.05 或 P<0.01),而 CD3–CD19+ 細胞百分比下降(P<0.05)。結論通過 FMT 可在小鼠上成功建立慢阻肺腸道菌群研究模型。