目的 探討重組人肝細胞生長因子（rh-HGF）對大鼠移植心臟冠狀動脈內膜cMet表達的影響及其意義。 方法 雄性Wistar大鼠80只，雄性SD大鼠40只，建立腹腔異位心臟移植模型。將60只受體大鼠分為3組，對照組：20只Wistar大鼠，術后當天開始腹腔注射生理鹽水1ml/kg·d; 環孢菌素A（CsA）組：20只SD大鼠，術后當天開始腹腔注射CsA 5mg/kg·d； rh-HGF組：20只SD大鼠，術后當天開始腹腔注射rh-HGF 500μg/kg·d+CsA 5mg/kg·d。分別于術后15d、60d觀察冠狀動脈的病理變化；采用免疫組織化學方法檢測冠狀動脈內膜c-Met的表達，逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)檢測冠狀動脈內膜c-Met mRNA的表達。 結果 rh-HGF組移植心臟冠狀動脈內皮細胞完整，內膜輕度增厚，管腔輕度狹窄,病理改變明顯輕于CsA組。術后15d、60d rh-HGF組c-Met和c-Met mRNA在移植心臟冠狀動脈內膜的表達均明顯高于CsA組和對照組（術后60d c-Met: 1.85±0.26 vs. 0.96±0.10, t=8.491,P=0000;1.85±0.26 vs. 0.58±0.03,t=13.725,P=0.000;術后60d c-Met mRNA: 1.92±0.22 vs. 0.88±0.07,t=11.940,P=0.000;1.92±0.22 vs. 0.42±0.02, t=19.206,P=0.000）。 結論 rh-HGF通過上調移植心臟冠狀動脈內膜c-Met的表達，可促進冠狀動脈內皮細胞修復和再生，預防移植心臟血管病的發生。
目的探討c-Met在結直腸癌細胞株中的表達以及其配體肝細胞生長因子（HGF）對結腸癌SW480細胞系增殖、侵襲能力的影響。 方法應用RT-PCR及Western blot技術檢測HGF受體c-Met在不同結直腸癌細胞中的表達，篩選出c-Met高表達細胞系；用不同濃度（0、20、40、70 ng/mL）的HGF作用SW480細胞48 h，分別用MTT法、Transwell法檢測其對SW480細胞增殖、侵襲能力的影響。 結果①RT-PCR及Western blot檢測結果均表明，c-Met在不同結直腸癌細胞系中均有表達，其中體外培養的結腸癌細胞系SW480中存在c-Met和蛋白高表達。②MTT實驗結果顯示，HGF可增強SW480細胞的增殖能力，且在一定范圍內隨濃度增高作用增強，呈劑量依賴性關系。③Transwell實驗結果顯示，HGF處理后的SW480細胞侵襲能力增強。 結論c-Met在結腸癌SW480細胞中存在高表達，HGF可促進結直腸癌細胞的增殖及增加其體外侵襲能力。
目的 觀察慢病毒介導的 RNA 干擾 c-Met 基因后肝細胞生長因子（HGF）對結腸癌細胞株 SW480 侵襲能力的影響。 方法 實驗分為 3 組，正常對照組（NC 組）：正常目的細胞加 shRNA 陰性對照病毒感染細胞（NC 組又分為 NC-20 和 NC-40 2 個亞組，分別代表正常目的細胞感染 shRNA 陰性對照病毒后在 Transwell 外室中分別加入濃度為 20 和 40 ng/mL 的 HGF）；c-Met 基因敲除組（KD 組）：正常目的細胞加 RNA 干擾靶點病毒感染細胞（KD 組又分為 KD-20 和 KD-40 2 個亞組，分別代表正常目的細胞感染目的基因 shRNA-c-Met 病毒后在 Transwell 外室中分別加入濃度為 20 和 40 ng/mL 的 HGF；KD1、KD2、KD3 和 KD4 組分別表示針對目的基因不同的 RNA 干擾靶點，以挑選其中最有效的干擾靶點）；空白對照組（CON 組）：正常目的細胞加未感染任何病毒的細胞。構建 shRNA-c-Met 慢病毒表達載體，實時定量 PCR（RT-PCR）篩選陽性克隆并測序鑒定；經慢病毒質粒包裝后轉染 SW480 細胞，轉染 48 h 后，RT-PCR 法檢測 SW480 細胞中 c-Met mRNA 表達，Western blot 法檢測 SW480 細胞中 c-Met 蛋白表達水平；轉染 72 h 后，采用流式細胞儀檢測細胞凋亡，Transwell 侵襲實驗檢測細胞的侵襲能力。 結果 shRNA-c-Met 慢病毒表達載體構建成功；shRNA-c-Met 顯著下調了 SW480 細胞中 c-Met mRNA 的表達，并且 RNA 干擾靶點病毒感染細胞第 4 靶點時的基因敲減效率最高（81.4%），為最有效靶點。Western blot 檢測結果顯示，KD 組 SW480 細胞中 c-Met 蛋白表達明顯低于 NC 組（P=0.015）和 CON 組（P=0.010），KD 組 SW480 細胞凋亡率明顯高于 NC 組（P<0.001）和 CON 組（P<0.001）。細胞轉移率在 KD 組、KD-20 組和 KD-40 組均分別明顯低于 NC 組（P<0.001）、NC-20 組（P=0.015）及 NC-40 組（P=0.017）；與 NC 組比較，NC-20 組和 NC-40 組的細胞轉移率明顯升高（P<0.001、P<0.001），且 NC-40 組的細胞轉移率明顯高于 NC-20 組（P=0.005）；同樣，與 KD 組比較，KD-20 組和 KD-40 組的細胞轉移率均明顯升高（P<0.001、P<0.001），KD-40 組的細胞轉移率明顯高于 KD-20 組（P=0.014）。 結論 以 c-Met 為靶點的 RNA 干擾能明顯下調結腸癌細胞株 SW480 中 c-Met 的表達，c-Met 的表達下調能明顯增加細胞凋亡且能降低 HGF 對 SW480 細胞侵襲能力的影響。
目的研究 c-Met 基因下調后對結直腸癌侵襲和轉移的影響機制。方法在 SW480 細胞中敲低 c-Met 基因，通過基因芯片篩選差異基因，對差異基因進行功能聚類分析，通過 IPA 分析細胞信號通路和相關的差異基因相互作用網絡以及相關基因與上游調控分子間的作用關系。選取被抑制的信號通路中的相關基因進行 qPCR 驗證。結果敲低 c-Met 后，SW480 細胞中上調基因數目 399 個，下調基因數目 286 個。聚類分析熱圖提示：c-Met 敲低后，對 SW480 細胞的基因表達水平產生了明顯影響；IPA 通路分析表明：HGF 信號通路被抑制，且 c-Met 敲低后，IPA 相互作用網絡提示：HGF 通路中的 AKT2、PIK3CA 及 MAP2K4 下調；qPCR 驗證上述基因亦下調，與芯片結果相符。結論c-Met 可能通過對 HGF 通路中 AKT2、PIK3CA 及 MAP2K4 的調控影響了結直腸癌的侵襲、轉移。