目的研究胞漿泛素蛋白連接酶2（Kip1 ubiquitylation-promoting complex 2，KPC2）在大鼠脊髓損傷（spinal cord injury，SCI）過程中的蛋白表達及細胞定位情況，探討其在SCI修復過程中的生物學功能。 方法將成年SD大鼠隨機分為2組，對照組7只僅行單純T9椎板全切除術，實驗組49只采用改良Allen法制作T9節段脊髓撞擊損傷模型，實驗組于傷后6、12 h及1、3、5、7、14 d分別取7只大鼠進行以下檢測。采用Western blot檢測p27kip1、KPC2、增殖細胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）和細胞周期蛋白A（CyclinA）在SCI前后的蛋白表達變化，免疫組織化學染色觀察KPC2在SCI后的大體定位及表達，免疫熒光雙標記染色觀察KPC2在SCI過程中與神經元特異性核蛋白（neuronal nuclei，NeuN）、神經膠質纖維酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein，GFAP）和PCNA的共定位情況。細胞水平采用體外培養星形膠質細胞增殖模型，Western blot檢測KPC2、P27kip1、PCNA表達；免疫共沉淀分析KPC2、KPC1和p27kip1之間在細胞增殖過程中的相互作用。 結果Western blot結果示SCI后3 d，p27kip1顯著下調，伴隨KPC2、CyclinA、PCNA表達明顯增加。免疫組織化學染色示KPC2陽性信號廣泛分布，包括脊髓灰質和白質，實驗組KPC2陽性細胞數顯著高于對照組（t=10.982，P=0.000）。免疫熒光雙標記染色示在脊髓灰質，對照組和實驗組KPC2與NeuN雙標記陽性細胞數分別為（0.43±0.53）、（0.57±0.53）個/視野，比較差異無統計學意義（t=0.548，P=0.604）；在脊髓白質，對照組和實驗組KPC2與GFAP雙標記陽性細胞數分別為（3.86±0.90）、（0.71±0.49）個/視野，差異有統計學意義（t=7.778，P=0.000）；對照組和實驗組KPC2與PCNA標記的星形膠質細胞共定位明顯，陽性細胞數分別為（0.57±0.53）、（5.57±1.13）個/視野，差異有統計學意義（t=8.101，P=0.000）。體外培養并模擬星形膠質細胞增殖，提取細胞蛋白行Western blot示PCNA和KPC2蛋白表達在血清刺激增殖后即開始增加，24 h達峰值，而p27kip1表達則逐漸減少。免疫共沉淀示KPC2可沉淀p27kip1、KPC1，p27kip1也可沉淀KPC2、KPC1，且在刺激后相互作用明顯增加。 結論SCI后KPC2參與介導的p27kip1表達下調，KPC2與SCI后星形膠質細胞的增殖相關。
目的觀察熱休克蛋白27(HSP27)致敏對大鼠視網膜神經節細胞(RGC)凋亡的影響。 方法35只雌性Wistar大鼠分為HSP27致敏組、硼酸鹽緩沖液(BBS)對照組、正常組,分別為15、15、5只大鼠。給予HSP27致敏組大鼠后肢皮下注射100 μg的HSP27和完全弗式佐劑,腹腔注射1 μg百日咳毒素。BBS對照組大鼠于相同部位注射等量BBS。正常組大鼠不作任何處理。注射前3 d及注射后3 d,1、2、4、6、8周,檢測大鼠雙眼眼壓。注射后4、6、8周行視網膜冰凍切片,采用原位末端標記法檢測RGC的凋亡情況,計算細胞凋亡率;采用酶聯免疫吸附試驗檢測大鼠血清和腦脊液中HSP27抗體的含量。 結果HSP27致敏組、BBS對照組、正常組大鼠注射前后眼壓均無明顯波動,差異均無統計學意義(P>0.05)。HSP27致敏組于注射后4周即可見RGC凋亡,注射后6周凋亡的RGC明顯增多。BBS對照組及正常組均未見RGC凋亡。HSP27致敏組大鼠血清、腦脊液中HSP27抗體含量分別于注射后4、6周出現高峰,然后隨著注射時間延長而遞減。注射后4、6、8周,HSP27致敏組RGC凋亡率、血清中HSP27抗體含量、腦脊液中HSP27抗體含量分別與BBS對照組、正常組比較,差異均有統計學意義(P<0.05);BBS對照組RGC凋亡率、血清中HSP27抗體含量、腦脊液中HSP27抗體含量與正常組比較,差異無統計學意義(P>0.05)。 結論HSP27致敏可促進大鼠RGC的凋亡。腦脊液中HSP27抗體含量與RGC凋亡趨勢一致。
目的:探討皮下脂膜炎樣T細胞淋巴瘤(SPTL)中P27及Cyclin D3的表達和意義。方法:應用免疫組化檢測20例SPTL標本中P27及Cyclin D3的表達。結果:P27及Cyclin D3在SPTL均出現較高表達,且P27蛋白與腫瘤細胞浸潤血管有關(Plt;005);P27與Cyclin D3蛋白表達之間無相關性(Pgt;005)。結論:P27及Cyclin D3在SPTL發生發展中起著一定作用。