目的 研究新生豚鼠心肌缺血 -再灌注時興奮性鳥核苷耦聯蛋白 α亞基 (Gsα)和抑制性蛋白 α亞基 (Giα)含量的變化以及 St. Thomas 號液和冷血心臟停搏液對這種變化的不同影響。 方法 30只新生豚鼠隨機分為 3組 ,建立離體心臟左心做功模型 ,組 (n=10 ) :低溫對照 ;組 (n=10 ) :St.Thomas 號液灌注 ;組 (n=10 ) :冷血心臟停搏液灌注。采用 Western印跡雜交法研究 Gsα和 Giα蛋白含量的變化。 結果 缺血前 3組的 Gsα和 Giα蛋白含量差別均無統計學意義。缺血后 ,組 和組 Gsα蛋白水平顯著低于缺血前 (Plt;0 .0 1) ,組 較缺血前無明顯降低 (Pgt;0 .0 5 )。再灌注后 ,組 Gsα蛋白與缺血前水平相近 (Pgt;0 .0 5 ) ,且明顯高于組 和組 (Plt;0 .0 1)。缺血后和再灌注后 ,組 的 Giα蛋白含量與缺血前比較差別無統計學意義 (Pgt;0 .0 5 ) ,明顯低于組 和組 (Plt;0 .0 1) ;組 和組 仍明顯高于缺血前 (Plt;0 .0 1)。 結論 更多新生豚鼠心肌 2 0℃缺血 -再灌注時 Gsα蛋白含量明顯降低 ,而 Giα蛋白含量顯著升高。 St. Thomas 號液不能改變這種變化 ,而冷血心臟停搏液可使新生豚鼠心肌再灌注后的 Gsα和 Giα蛋白含量恢復至缺血前水平。Gsα和 Giα蛋白的平衡遭受破壞可能是未成熟心肌缺血 -再灌注損傷發生
目的 探索G蛋白偶聯受體激酶結合蛋白1(G protein coupledreceptor kinase interacting protein 1, GIT1)的RNA發夾結構(hairpin)(GIT1-RNAh)對成骨細胞遷移的影響，并分析其機制。方法 取培養至第6代的鼠成骨細胞，隨機分成兩組，分別用包含GIT1-RNAh(實驗組)和綠色熒光蛋白(green fluoresenceprotein, GFP)的RNA發夾結構(GFPRNAh)的腺病毒(對照組)感染12 h后，再將每組分成有、無血小板源性生長因子(platelet drived growth factor, PDGF)刺激的兩組。免疫熒光染色方法檢測成骨細胞內源性GIT1蛋白表達和Paxillin的位置。 Western Blot檢測Paxillin的磷酸化。 構建包含藍色熒光蛋白的GIT1-RNAh(CFP-GIT1-RNAh)實驗組和GFP-RNAh(CFP-GFP-RNAh)(對照組)， 免疫熒光雙染的方法檢測CFP-GIT1-RNAh和 CFP-GFP-RNAh對Paxillin位置的特異性作用。 用劃痕愈合法檢測GIT1-RNAh(實驗組)和GFP-RNAh(對照組) 腺病毒對成骨細胞在PDGF刺激下的遷移能力的影響。結果 免疫組織化學觀察，實驗組和對照組比較，明顯抑制成骨細胞內源性的GIT1蛋白表達和擾亂Paxillin的分布。 Western Blot觀察，和對照組相比，實驗組明顯抑制了Paxiliin的磷酸化(P＜0.05)。劃痕愈合法檢測觀察，和對照組相比，實驗組明顯抑制成骨細胞的遷移。結論 GIT1-RNAh通過擾亂Paxillin的分布和其磷酸化從而抑制成骨細胞的遷移。
【摘要】 中介素（intermedin，IMD）又稱腎上腺髓質素2，是降鈣素基因相關肽超家族的一員。IMD能夠無選擇性作用于降鈣素受體樣受體/受體活化修飾蛋白復合物，通過受體復合物上G蛋白的變構，激活下游的效應酶及離子通道，再進一步發揮生物學效應。IMD的作用廣泛，其對血管的作用主要包括血管生成作用、外周血管擴張作用、中樞升壓作用及抗血管鈣化作用；其對心臟的作用主要包括正性肌力作用、正性頻率作用、抗心肌肥厚的作用等。
全身麻醉的應用已有170多年歷史,然而其機制仍不清楚。同樣不清楚的問題還有麻醉藥是否會對機體產生不利影響。目前有一些關于全麻藥對機體影響的報道,但有關G-蛋白偶聯受體(GPCR)方面的研究較為少見。通過比對和種系發生分析,我們在水蚤中鑒定了18個GPCR基因,包括代謝型GABAB受體、代謝性谷氨酸受體、腎上腺素能受體、5-羥色胺受體、多巴胺受體和毒蕈堿型受體。我們成功檢測到這些基因的表達,并通過熒光定量PCR技術觀察到了異丙酚、依托咪酯和酒精對這18個GPCR基因表達的影響。
Ras同源蛋白（Rho）/Rho激酶（ROCK）通路是廣泛存在于人和哺乳動物細胞內的一種信號傳導通路，與視神經損害后修復受抑制密切相關。視神經損傷后，活化的Rho水平升高，ROCK表達上調，并激活其下游一系列串聯反應產生抑制軸突延伸和神經修復的效應；而ROCK抑制劑可阻斷這一過程，促進損傷視神經的修復，保護受損視網膜神經節細胞并促進軸突再生和延伸，還能抑制瘢痕形成、降低眼壓以及可能存在一定的抗炎作用。目前，部分種類的ROCK抑制劑已投入臨床使用，其應用價值日益凸顯，有望成為視神經疾病的新一代治療藥物。
目的檢測肝內膽管癌（intrahepatic cholangiocarcinoma，ICC）患者癌組織中膽汁酸 G 蛋白偶聯受體 5（takeda G protein-coupled receptor 5，TGR5）和熱休克蛋白 75 的表達情況，探討二者與患者預后的關系。方法選取 2015 年 3 月至 2018 年 3 月期間濮陽市安陽地區醫院收治住院并行手術治療的 ICC 患者 94 例作為研究對象，采用免疫組織化學法及 Western blot（WB）法檢測 ICC 癌組織及其癌旁組織中 TGR5 蛋白和熱休克蛋白 75 的表達情況，分析 ICC 癌組織中 TGR5 蛋白及熱休克蛋白 75 表達情況與 ICC 臨床病理特征及預后的關系；并采用多因素 Cox 比例風險回歸分析 ICC 患者預后不良的危險因素，采用 ROC 曲線分析 TGR5 蛋白和熱休克蛋白 75 表達水平對 ICC 患者預后不良的診斷價值。結果免疫組織化學結果顯示，ICC 癌組織中 TGR5 蛋白和熱休克蛋白 75 表達陽性率均高于癌旁組織（P<0.05）。WB 結果顯示，ICC 癌組織中 TGR5 蛋白和熱休克蛋白 75 相對表達量高于癌旁組織（P<0.05）。ICC 患者癌組織中 TGR5 蛋白的表達與患者性別、腫瘤直徑、分化程度、TNM 分期、衛星灶和肝硬變相關（P<0.05）；熱休克蛋白 75 的表達與腫瘤直徑、TNM 分期、神經受累、衛星灶和肝硬變相關（P<0.05）。預后不良組和預后良好組患者在性別、腫瘤直徑、TNM 分期、微血管侵犯、衛星灶、肝硬變以及 TGR5 蛋白和熱休克蛋白 75 表達情況方面比較，差異有統計學意義（P<0.05）。TGR5 蛋白表達陽性患者的累積 3 年總生存率（32.00%）低于 TGR5 蛋白表達陰性患者（63.16%），χ2=6.228，P=0.013；熱休克蛋白 75 表達陽性患者的累積 3 年總生存率（32.91%）低于熱休克蛋白 75 表達陰性患者（66.67%），χ2=6.079，P=0.014。多因素 Cox 比例風險回歸分析結果顯示，TGR5 蛋白和熱休克蛋白 75 表達陽性、TNM Ⅲ+Ⅳ期以及有衛星灶和肝硬變為 ICC 患者預后不良的危險因素（P<0.05）。ROC 結果顯示，以 TGR5 蛋白表達水平 0.932 為截斷值，診斷 ICC 患者預后不良的AUC為 0.783，敏感度為 72.4%，特異度為 72.2%；以熱休克蛋白 75 表達水平 0.756 為截斷值，診斷 ICC 患者預后不良的AUC為 0.805，敏感度為 84.4%，特異度為 63.9%；二者聯合診斷 ICC 患者預后不良的AUC為 0.884，敏感度為 79.3%，特異度為 83.3%。結論ICC 患者癌組織中 TGR5 蛋白和熱休克蛋白 75 高表達均與患者預后不良有關，是患者預后不良的危險因素，二者聯合檢測對預測預后不良具有一定價值，可作為潛在的生物學指標。