目的 探討 Beclin-l 基因與胰腺癌發生發展的關系。 方法 ① 回顧性收集 2009 年 4 月至 2009 年 11 月期間四川大學華西醫院行手術切除的胰腺癌標本 25 例及正常胰腺組織 20 例,采用實時熒光定量 PCR 和免疫組化染色方法分別檢測胰腺癌組織及正常胰腺組織中 Beclin-1 mRNA 及其蛋白的表達水平,并分析胰腺癌組織中 Beclin-1 蛋白的表達水平與患者臨床病理學特征之間的關系。② 將 PANC-1 細胞分為 2 組,轉染組細胞轉染 PLenO-WPI-Beclin-1 重組慢病毒載體,未轉染組細胞未進行重組慢病毒載體轉染,分別于共培養 24 及 48 h 時采用 PCR 法檢測 Beclin-1 mRNA 的表達水平。③ 將 PANC-1 細胞分為 3 組,轉染組加入 PLenO-WPI-Beclin-1 重組慢病毒載體,空載體組加入 PLenO-WPI 載體,空白對照組未加入任何載體,各組細胞于培養 1~7 d 期間每天采用 MTT 法檢測細胞增殖情況。 結果 ① 人胰腺癌中 Beclin-1 mRNA 及其蛋白的表達水平均低于正常胰腺組織(P<0.05)。在胰腺癌患者中,Beclin-1 蛋白的表達水平與患者的年齡、性別、腫瘤直徑及分化程度均無關(P>0.05),而與 TNM 分期及淋巴結轉移有關,TNM Ⅲ期和Ⅳ期患者的 Beclin-1 蛋白的表達水平低于Ⅰ期或Ⅱ期患者(P<0.05);淋巴結轉移陽性患者的 Beclin-1 蛋白的表達水平低于陰性患者(P=0.011)。② 轉染 24 h 和 48 h 時,同時點轉染組細胞中 Beclin-1 mRNA 的表達水平高于未轉染組(P<0.05)。③ MTT 實驗結果顯示,轉染 1、2 及 3 d 時,轉染組、空載體組和空白對照組細胞的 OD 值比較差異均無統計學意義(P>0.05);從轉染 4 d 開始,至轉染 7 d 期間,同時點轉染組細胞的 OD 值較空白對照組和空載體組均較低(P<0.05)。 結論 Beclin-1 基因及其蛋白在胰腺癌組織中的表達均下調,其可能是胰腺癌發生發展的原因之一。將 Beclin-1 基因導入 PANC-1 細胞后,細胞的增殖能力降低,提示 Beclin-1 基因可能是胰腺癌基因治療的目標基因。
目的對自噬相關蛋白 Beclin-1 在胃癌組織中的表達及其與胃癌患者不同臨床病理特征的相關性及其臨床意義進行系統評價。方法計算機檢索 Cochrane Library、Springer Link、Web of Science、Embase、PubMed、中國知網、萬方、維普等數據庫建庫至 2018 年 6 月 1 日前公開發表的關于胃腫瘤組織中 Beclin-1 蛋白表達及其意義的研究,由 2 名研究者獨立篩選和評價文獻,提取相關數據后運用 Review Manager 5.3 及 Stata 15.0 軟件進行 meta 分析。結果最終納入 10 篇文獻,共有胃癌患者 1 402 例。meta 分析結果顯示,Beclin-1 蛋白表達陽性率在胃癌組織中明顯低于非胃癌組織 [OR=0.30,95% CI(0.13,0.72),P=0.007],其在胃癌 TNM 分期Ⅲ/Ⅳ期和有遠處轉移患者的胃癌組織中均明顯低于Ⅰ/Ⅱ期者 [OR=1.82,95% CI(1.03,3.20),P=0.04] 和無遠處轉移者 [OR=0.36,95% CI(0.20,0.63),P=0.000 4],其在胃癌組織中的表達與胃癌患者的性別、年齡、腫瘤大小、有無淋巴結轉移、是否侵及漿膜層及腫瘤分化程度均無關(P>0.05);對存在異質性較大者進一步進行亞組分析結果顯示,Beclin-1 蛋白表達陽性率在有淋巴結轉移、侵及漿膜層和低分化程度者的胃癌組織中均明顯低于無淋巴結轉移 [OR=0.35,95% CI(0.22,0.57),P<0.000 1]、未侵及漿膜層組織 [OR=0.56,95% CI(0.33,0.94),P=0.03] 和中/高分化程度者 [OR=0.29,95% CI(0.20,0.43),P<0.000 01]。結論自噬相關蛋白 Beclin-1 在胃癌組織中低表達且與腫瘤分期和遠處轉移有關,提示其可能不僅是胃癌發生的重要原因,也可能對胃癌的進展起調控作用。
目的 探討腺癌、鱗癌、黏液性囊腺瘤、慢性胰腺炎和正常胰腺組織中胰腺癌相關基因的表達。 方法 回顧性收集 2012 年 1 月至 2017 年 4 月期間于湖北醫藥學院附屬東風醫院肝膽胰外科住院行手術治療的 40 例胰腺疾病患者的術中標本,其中腺癌、鱗癌、黏液性囊腺瘤、慢性胰腺炎和正常胰腺組織各 8 例。采用實時熒光定量 PCR 和基因芯片法檢測 5 組組織中 Beclin-1 mRNA 和 microRNA(miR)-216a 的表達。對以上組織行原代細胞培養,分為空白對照組和 PD98095 組(加入 PD98095 抑制劑),采用 Western blot 法檢測細胞中血管內皮生長因子(VEGR)與磷酸化細胞外調節蛋白激酶 1/2(p-ERK1/2)的表達。 結果 與正常對照組比較,腺癌組和鱗癌組組織中 Beclin-1 mRNA 和 miR-216a 的表達水平較低(P<0.05),腺癌組、鱗癌組、黏液性囊腺瘤組和慢性胰腺炎組組織中 Beclin-1 mRNA 和 miR-216a 的表達水平比較差異無統計學意義(P>0.05)。與同類組織的空白對照組比較,腺癌組和鱗癌組加入 PD98095 后,細胞中 p-ERK1/2 和 VEGF 蛋白的表達水平下調(P<0.05),但黏液性囊腺瘤組、慢性胰腺炎組和正常對照組加入 PD98095 前后細胞中 p-ERK1/2 及 VEGF 蛋白的表達水平變化不大(P>0.05)。 結論 Beclin-1 mRNA、miR-216a 和 VEGF 蛋白的表達與胰腺癌的發生發展可能有關。