目的 觀察聚嘧啶束結合蛋白相關剪接因子（PSF）高表達對過氧化氫（H2O2）誘導下視網膜色素上皮（RPE）細胞凋亡的影響。 方法 體外培養的人RPE細胞分為正常細胞組、損傷組（N+H2O2組）、空載體對照組（Vec+H2O2組）、PSF高表達組（PSF+H2O2組）。應用脂質體2000將pEGFP空載體、pEGFP-PSF真核表達質粒分別導入Vec+H2O2組、PSF+H2O2組；N+H2O2組僅作轉染處理；正常細胞組為正常培養細胞。細胞轉染24 h后，以200 μmol/L H2O2刺激細胞2 h。蘇木精-伊紅染色觀察各組細胞形態；噻唑藍比色法檢測N+H2O2組、Vec+H2O2組、PSF+H2O2細胞活性，以酶聯免疫檢測儀測量波長490 nm處各組細胞的吸光度[A，舊稱光密度（OD）]值表示；LIVE/DEAD?細胞活性/細胞毒性試劑盒檢測各組細胞生存力；細胞凋亡檢測試劑盒檢測N+ H2O2組、Vec+H2O2組、PSF+H2O2組細胞凋亡；二氯熒光素二乙酸酯檢測各組細胞內活性氧（ROS）水平。 結果 N+H2O2組、Vec+H2O2組細胞體積縮小，胞質致密濃縮、嗜酸性染色增強；PSF+H2O2組細胞形態尚飽滿，胞質染色較均勻，偶見體積縮小。與PSF+H2O2組比較，N+H2O2組、Vec+H2O2組細胞活性下降，差異有統計學意義（F=46.98，P=0.000）。正常細胞組細胞呈綠色，偶見紅色熒光；N+H2O2組、Vec+H2O2組細胞中呈紅色熒光的死亡細胞數量明顯增多，呈綠色熒光的活細胞數量顯著減少；PSF+H2O2組活細胞數量明顯增多，死亡細胞數量顯著減少。與N+H2O2組、Vec+H2O2組細胞凋亡比較，PSF+ H2O2組細胞凋亡下降，差異有統計學意義（F=62.24，P=0.000）。與N+H2O2組、Vec+H2O2組比較，PSF+H2O2組細胞中ROS表達量下降，差異有統計學意義（F=295.235，P=0.000）。 結論 高表達PSF通過抑制ROS的產生緩解H2O2誘導的人RPE細胞凋亡。
目的觀察丁基苯酞（NBP）對過氧化氫（H2O2）誘導下視網膜Müller細胞凋亡的保護作用。方法體外培養的人視網膜Müller細胞分為正常對照組、模型組（H2O2組）、實驗組（H2O2+NBP組）。H2O2組、H2O2+NBP組細胞培養液中加入200 μmol/L H2O2刺激2 h后，H2O2組更換為完全培養基，H2O2+NBP組更換為含1 μmol/L NBP的完全培養基。正常對照組為常規培養細胞。蘇木精-伊紅（HE）染色觀察各組細胞形態改變；噻唑藍（MTT）比色法檢測NBP作用24、48 h后各組細胞活性；Hoechst33258染色觀察各組細胞凋亡情況；LIVE/DEAD®細胞活性/細胞毒性試劑盒檢測各組細胞生存力；二氯熒光素二乙酸酯（DCFH-DA）+內質網（ER）紅色熒光探針（ER-Tracker Red）雙染色觀察各組細胞ER中活性氧（ROS）的表達水平。單因素方差分析聯合Dunnett統計學方法進行數據分析。結果HE染色結果顯示，H2O2+NBP組細胞數量較H2O2組增加。MTT比色法檢測結果發現，NBP作用24、48 h后，正常對照組與H2O2組、H2O2組與H2O2+NBP組細胞生存力比較，差異均有統計學意義（t=28.96、3.658、47.58、20.33，P＜0.001、0.022）。Hoechst33258結果顯示，H2O2+NBP組細胞少數細胞核邊集呈新月狀且細胞核碎裂減少，其余細胞藍色熒光均勻。LIVE/DEAD®細胞活性/細胞毒性試劑盒檢測結果顯示，H2O2組中呈紅色熒光的死亡細胞明顯增多，呈綠色熒光的活細胞數量顯著減少；H2O2+NBP組呈綠色熒光的活細胞數量增多，呈紅色熒光的死亡細胞減少。DCFH-DA+ER-Tracker Red雙染色結果顯示，H2O2組細胞中綠色熒光強度明顯增強；H2O2+NBP組細胞中綠色熒光強度較H2O2組明顯降低。結論NBP通過抑制ROS的產生緩解H2O2誘導的人視網膜Müller細胞凋亡。
目的高表達多聚嘧啶序列結合蛋白相關剪接因子（PSF）對糖基化終產物（AGEs）誘導下視網膜Müller細胞凋亡的影響。方法實驗研究。體外培養的人Müller細胞分為正常細胞組（N組）、空白對照組（N+AGEs組）、空載體對照組（Vec+AGEs組）及PSF高表達組（PSF+AGEs組）。N組為常規培養的Müller細胞；N+AGEs組僅做轉染處理并聯合AGEs誘導；Vec+AGEs組、PSF+AGEs組利用轉染試劑脂質體2000分別將增強型綠色熒光蛋白（pEGFP）空載體、pEGFP-PSF真核表達質粒導入Müller細胞并聯合AGEs誘導。細胞轉染24 h后應用AGEs（150 μg/ml）誘導72 h，采用HE、Hoechst 33258染色觀察各組細胞形態；分別采用MTT比色法、ELISA細胞凋亡試劑盒及2’,7’-二氯熒光素二乙酸酯法檢測N+AGEs組、Vec+AGEs組、PSF+AGEs組細胞生存力、細胞凋亡值及細胞內ROS水平。結果N組細胞形態飽滿，胞漿染色均一；N+AGEs組、Vec+AGEs組細胞體積縮小，胞質致密濃縮、嗜酸性染色增強；PSF+AGEs組細胞形態尚飽滿，胞漿染色較均勻，胞核染色均一。N+AGEs組、Vec+AGEs組、PSF+AGEs組細胞生存力分別為0.42±0.11、0.35±0.12、0.68±0.12；細胞凋亡值分別為1.08±0.16、0.96±0.20、0.44±0.08；細胞內ROS水平分別為28 833.67±3 550.06、28 356.67±4 854.81、18 616.00±3 382.54。與N+AGEs組、Vec+AGEs組比較，PSF+AGEs組細胞生存力明顯提高（F=20.65，P=0.000），細胞凋亡值（F=43.43，P=0.000）及細胞內ROS水平（F=18.86，P=0.000）明顯降低，差異均有統計學意義。結論高表達PSF通過抑制ROS產生來緩解AGEs誘導下人Müller細胞凋亡，從而發揮對Müller細胞的保護作用。