目的觀察腺病毒介導的重組Tum5基因(rAd-Tum5)對氧誘導視網膜病變(OIR)模型小鼠視網膜新生血管的抑制作用。 方法7日齡C57BL/6J小鼠96只,隨機分為正常組、OIR組、rAd-綠色熒光蛋白(GFP)空載體組(OIR rAd-GFP組)和重組Tum5基因組(OIR rAd-Tum5組),每組均為24只。參照文獻方法建立OIR模型。12日齡時,OIR rAd-GFP組、OIR rAd-Tum5組小鼠雙眼玻璃體腔分別注射病毒滴度為1×1011 pfu/ml的rAd-GFP、rAd-Tum5病毒1 μl。OIR組、正常組小鼠雙眼玻璃體腔分別注射等體積無菌生理鹽水。視網膜鋪片觀察視網膜無灌注區相對面積,病理切片計數突破內界膜的視網膜前細胞核數,免疫熒光法及蛋白免疫印跡法檢測小鼠視網膜中血管內皮生長因子(VEGF)表達情況。 結果正常組、OIR組、OIR rAd-GFP組、OIR rAd-Tum5組小鼠視網膜無灌注區相對面積比較,差異有統計學意義(F=61.224,P<0.01)。組間視網膜無灌注區相對面積比較,OIR rAd-GFP組與OIR組差異無統計學意義(P=0.827);OIR rAd-Tum5組與OIR組、OIR rAd-GFP組差異均有統計學意義(P<0.01)。4組間突破內界膜的視網膜前細胞核數比較,差異有統計學意義(F=635.738,P<0.01)。組間突破內界膜的視網膜前細胞核數比較,OIR rAd-GFP組與OIR組差異無統計學意義(P=0.261);OIR rAd-Tum5組與OIR組、OIR rAd-GFP組差異有統計學意義(P<0.01)。與正常組小鼠視網膜VEGF表達比較,OIR組和OIR rAd-GFP組VEGF表達均上調,OIR rAd-Tum5組小鼠視網膜VEGF表達較OIR組和OIR rAd-GFP組呈下降趨勢。 結論重組rAd-Tum5基因可以抑制視網膜新生血管生成,可能與下調VEGF表達有關。
目的觀察中老年近視患者黃斑區視網膜厚度, 探討其與眼軸長度(AL)、屈光度、矯正視力和性別的關系。 方法中老年近視患者85例96只眼納入研究。其中, 男性42例44只眼, 女性43例52只眼; 平均年齡(63.0±6.0)歲。所有患者均行矯正視力、眼壓、裂隙燈顯微鏡、間接檢眼鏡、光相干斷層掃描(OCT)、屈光度、AL檢查。根據AL、等效球鏡度數(SED)檢查結果, 將患者分為低中度近視組、高度近視組、超高度近視組。3組間年齡(χ2=1.875)、性別(χ2=0.667)、眼別(χ2=0.375)比較, 差異無統計學意義(P＞0.05);平均SED(F=239.05)、平均AL(F=345.75)、平均矯正視力(F=3.679)比較, 差異有統計學意義(P＜0.05)。采用日本Topcon公司3D-OCT 2000儀對患眼黃斑區進行掃描。測量黃斑整體視網膜平均厚度(TR)和黃斑中心區, 內、外環上方、顳側、下方、鼻側象限共9個區域的視網膜厚度。性別、AL、SED與黃斑區視網膜厚度的相關性采用Pearson相關分析; 不同性別TR和各區域視網膜厚度的比較采用獨立樣本t檢驗。 結果低中度近視組、高度近視組、超高度近視組間視網膜厚度比較, 除內環上方、下方, 其余所有區域視網膜厚度均有統計學意義(F=6.794、10.155、5.861、6.692、12.081、10.729、5.137, P＜0.05);3組間內、外環視網膜厚度以及TR比較, 差異有統計學意義(F=7.370、17.939、15.553, P＜0.05)。內環上方視網膜厚度與AL、SED均無相關性(r=-0.103、-0.098, P＞0.05)。內環下方視網膜厚度與AL無相關性(r=-0.161, P＞0.05), 但與SED呈負相關(r=-0.203, P＜0.05)。女性黃斑中心區(r=-2.082)、內環顳側(r=-2.564)、內環下方(r=-2.958)、內環(r=-2.777)視網膜厚度及TR(r=-2.400)均較男性降低, 差異有統計學意義(P＜0.05)。 結論中老年近視患者隨近視程度加深, 黃斑區視網膜普遍變薄; 中老年女性近視患者黃斑內環區平均視網膜厚度及TR均較男性降低。
目的分析氧誘導視網膜病變（OIR）小鼠模型的微小RNA表達譜，篩選可能與視網膜新生血管（RNV）形成有關的微小RNA。 方法7日齡健康C57BL/6J小鼠52只隨機分為正常對照組和OIR組，每組26只。OIR組建立OIR小鼠模型；正常對照組不做任何處理。小鼠17日齡時，行視網膜鋪片，觀察視網膜血管形態；行視網膜石蠟切片，計數突破內界膜的視網膜血管內皮細胞核數；行微小RNA芯片分析，檢測具有差異表達的微小RNA，再應用實時聚合酶鏈反應（RT-PCR）進行驗證。 結果正常對照組小鼠視網膜血管平滑、均勻有序分布；OIR組小鼠周邊視網膜血管紆曲、紊亂并伴有新生血管芽，中央視網膜無灌注區明顯。正常對照組、OIR組小鼠視網膜無灌注區的相對面積分別為（6.57±3.6）%、（25.81±2.12）%；OIR組小鼠視網膜無灌注區的相對面積較正常對照組明顯增大，差異有統計學意義（t=28.71，P＜0.001）。光學顯微鏡觀察發現，正常對照組小鼠內界膜結構完整、平滑，血管內皮細胞排列整齊，偶見突破內界膜的血管內皮細胞核。正常對照組、OIR組平均每張切片突破內界膜的視網膜血管內皮細胞核數分別為（0.16±0.31）、（28.41±4.01）個。兩組平均每張切片突破內界膜的視網膜血管內皮細胞核數比較，差異有統計學意義（t=54.45，P＜0.001）。微小RNA芯片分析結果顯示，與正常對照組比較，OIR組有21個微小RNA的表達發生了1.5倍以上的變化。其中，上調者9個，下調者12個。差異表達倍數≥3.0的微小RNA為miR-3078、miR-140、miR-29b、miR-29c。RT-PCR檢測發現，差異表達倍數≥3.0的4個微小RNA，其表達趨勢與芯片分析結果一致。與正常對照組比較，OIR組miR-3078的表達明顯上調，差異有統計學意義（t=-2.380，P＜0.05）；miR-140、miR-29b、miR-29c的表達明顯下調，差異也有統計學意義（t=2.638、2.323、2.415，P＜0.05）。 結論OIR小鼠模型的微小RNA表達譜中，miR-3078、miR-140、miR-29b、miR-29c的差異表達倍數≥3.0，其可能與RNV形成有關。