摘要： 由于羊水干細胞(AFSC)具有高度增殖能力、來源容易 、免疫原性弱、致瘤性低、符合倫理學等獨特優勢，并與其它干細胞一樣存在多向分化潛能，在細胞治療或組織工程研究中展現出廣闊的應用前景，使其極有望成為心血管疾病再生醫學的理想種子細胞。羊水干細胞在心血管疾病中的研究尚處于起步階段，盡管許多研究結果令人振奮，但將其應用于心血管疾病再生醫學中仍面臨許多挑戰，在很多方面的研究亟需深入。我們總結了羊水干細胞的性質、獲取羊水的時機對羊水干細胞的影響、分離純化及鑒定方法，重點綜述羊水干細胞向心血管細胞分化的潛能及在心臟組織工程中的應用現狀和相關問題。
目的對羊水干細胞（amniotic fluid-derived stem cells，AFSCs）的研究進展及在再生醫學等領域的發展進行綜述，探討今后AFSCs研究的相關問題。 方法查閱近年來AFSCs的相關文獻，對AFSCs在再生醫學領域研究的成果及其基礎與臨床研究展望進行綜述。 結果目前研究已表明AFSCs具有多向分化潛能，在組織工程或細胞替代治療的研究中展現出廣闊的應用前景。 結論羊水取材簡便，對母嬰創傷小，無致瘤性，無倫理學方面的限制，使AFSCs極有希望成為再生醫學、抗腫瘤等領域中理想的種子細胞，具有廣泛研究價值。
【摘 要】 目的 探討人羊水來源c-kit+ 間充質干細胞（c-kit+ human amniotic fluid-derived mesenchymal stemcells，c-kit+ HAFMSCs）的生物學特征及心肌誘導分化能力。 方法 通過產前診斷或自愿引產獲取50 份孕中期羊水標本，經流式細胞儀分選c-kit+ HAFMSCs，MTT 法觀察細胞增殖情況，并通過流式細胞儀、細胞免疫化學染色觀察行細胞表型鑒定。在體外經成骨及成脂誘導分化，于誘導培養后21 d 采用von Kossa 染色觀察鈣沉積顆粒，油紅O 染色觀察脂滴形成情況。實時熒光定量PCR 檢測細胞經5 氮-2’ 脫氧胞苷心肌誘導前后，NKx2.5、Tbx5、GATA-4、α-MHC 4 種心肌特異性基因表達情況。 結果 經流式細胞儀分選，人孕中期羊水中c-kit+ HAFMSCs 含量約為貼壁細胞的3.07% ± 1.03%；體外增殖迅速，表達MSCs 表面標志CD29、CD44、CD73、CD90、CD105，不表達造血干細胞表面標志CD34、CD45；表達人類白細胞抗原（human leukocyte antigen，HLA）-ABC，不表達HLA-DR。細胞免疫化學染色示CD29、CD44、CD73、CD90、CD105、Oct-4 染色呈陽性，CD34、CD45 染色呈陰性。MTT 檢測示第5、10、15 代c-kit+ HAFMSCs 具有相似的生長曲線。成骨和成脂誘導培養后21 d，細胞內有鈣鹽沉積和脂滴形成。實時熒光定量PCR 檢測示，心肌誘導后14 d， NKx2.5、Tbx5、GATA-4、α-MHC 4 種心肌特異性基因表達均較誘導前明顯增加，差異有統計學意義（P lt; 0.05）。 結論 通過流式細胞儀分選的c-kit+ HAFMSCs 在體外可以誘導分化為心肌樣細胞，可能成為心肌再生性治療的種子細胞。
【摘 要】 目的 體外分離培養人羊水間充質干細胞（human amniotic fluid-derived mesenchymal stem cells，HAFMSCs），觀察低溫凍存復蘇后HAFMSCs 生物學特征，為進一步研究奠定理論基礎。 方法 取12 份自愿捐贈的孕16 ～ 20 周羊水標本，采用改良兩步法分離培養HAFMSCs，用含量不同的FBS、DMSO 凍存液凍存細胞，液氮凍存12 周后42℃水浴復蘇，錐蟲藍染色檢測細胞存活率，MTT 法檢測細胞增殖速度并繪制生長曲線，流式細胞儀檢測凍存復蘇后HAFMSCs 表型。對凍存復蘇后的HAFMSCs 進行成脂、成骨誘導分化培養，并分別采用油紅O、von Kossa 染色進行鑒定；實時熒光定量PCR 分析細胞凍存前后Oct-4、Nanog mRNA 表達差異。 結果 細胞凍存12 周后，不同的凍存方案對細胞存活率影響有差異，優化的凍存方案為DMEM/FBS/DMSO=50%/40%/10%。凍存復蘇后的HAFMSCs 呈漩渦狀排列，生長曲線呈S 形，與凍存前細胞生長曲線相似。流式細胞儀檢測示凍存復蘇后細胞的MSCs 表型CD29、CD44、CD73、CD90 為陽性，造血干細胞表型CD34、CD45 為陰性。成脂、成骨誘導21 d，油紅O、von Kossa 染色均呈陽性。實時熒光定量PCR 檢測示凍存前后Oct-4、Nanog mRNA 表達水平差異無統計學意義（P gt; 0.05）。 結論 HAFMSCs 具有體外增殖快、分化能力強的優勢；并可耐受短期凍存，復蘇后細胞存活率高，生物學特征及分化潛能未發生明顯變化，凍存液DMEM/FBS/DMSO=50%/40%/10% 是較好凍存方案。
目的 研究人羊水來源干細胞（human amniotic fluid colony derived stem cells，hAFCSCs）是否參與小鼠肌肉損傷修復過程，探討應用hAFCSCs 治療肌肉損傷的方法及可行性。 方法 B 超引導下穿刺抽取人孕中期羊水，體外分離、培養得到hAFCSCs，取第6 ～ 8 代細胞備用，同時提取總RNA 行RT-PCR 鑒定干細胞相關基因。取16 只6 ～ 8周齡Nod/Scid 小鼠，體重20 ～ 24 g，利用心肌毒素聯合X 線照射建立雙側脛骨前肌肌肉損傷模型，右側脛骨前肌內注射hAFCSCs（3.3 × 107 個/mL）30 μL 作為實驗組，左側脛骨前肌同法注射等量完全培養液（含15%FBS、18%Chang B2%Chang C、1% 青鏈霉素、1%L- 谷氨酰胺的α-MEM 培養基）作為對照組。細胞移植術后2、4 周各處死小鼠8 只，取材行肝細胞生長因子受體（c-Met）、成肌調節因子（Myf-5）、層粘連蛋白（Laminin）、結蛋白（Desmin）與人特異性細胞核有絲分裂器（NuMa）組織免疫雙重熒光染色觀察。 結果 原代hAFCSCs 培養5 ～ 7 d 后可見細胞克隆形成；8 ～ 10 d 后可挑取細胞形態均一的克隆進行穩定傳代，6 ～ 8 代后可獲得足量的干細胞。RT-PCR 檢測示所獲得hAFCSCs 體外擴增培養至第6 代仍表達干細胞相關基因。細胞移植術后2 周免疫雙重熒光染色示，實驗組脛骨前肌內檢測到NuMa 表達，未檢測到hAFCSCs 表達肌源性細胞相關表型；術后4 周，實驗組脛骨前肌內檢測到NuMa 表達，部分細胞同時表達NuMa和c-Met、Myf-5，部分肌纖維同時表達NuMa 和Desmin、Laminin。術后2、4 周，對照組脛骨前肌均未檢測到NuMa 表達。 結論 hAFCSCs 體外培養后移植到小鼠肌肉損傷部位，可參與損傷肌肉的修復過程。
綜述羊水干細胞（amniotic fluid-derived stem cell，AFS）的研究進展及應用前景。 方法 查閱近年來有關AFS 的研究文獻，對AFS 的起源、培養方法、鑒定、定向分化進行綜述，并對其應用前景進行分析。 結果 1993 年有研究提出AFS 存在的可能性。在后續的研究中證實，AFS 與其他干細胞一樣存在一些表面標志物，并具有多分化潛能，在細胞治療或組織工程研究中也有廣闊的應用前景。 結論 AFS 作為一種新的干細胞，有進一步研究的價值。
【摘要】 目的 探討延期妊娠的結局及防治。 方法 回顧性分析2008年6月-2009年6月收治的1 157例延期妊娠臨床資料，根據妊娠時段分A、B、C三組，A組449例，妊娠40+1~40+3周；B組358例，妊娠40+4~40+6周；C組350例，妊娠41~41+6周。比較各組羊水糞染發生率，剖宮產率，新生兒轉歸情況。 結果 隨妊娠時段的延長，羊水糞染發生率，剖宮產率具有統計學意義的變化（Plt;0.05）。新生兒評分低，轉專科治療的新生兒增多。 結論 延期妊娠為高危妊娠，應加強監護及檢測手段，適時終止妊娠。【Abstract】 Objective To explore the outcome of prolonged pregnancy and treatment. Methods Clinical data of 1 157 cases of prolonged pregnancy were retrospectively analyzed during June 2008 to June 2009.They were divided into three groups according to the time of pregnancy.Group A: 449 cases, pregnant age 40+1 - 40+3 week; Group B:358 cases, pregnant age 40+4 - 40+6 weeks; Group C:350 cases, pregnant age 41 - 41+6 weeks. The incidence of amniotic fluid turbidity, the rate of cesarean section and the neonatal prognosis were compared among three groups. Results With the extension of time of pregnancy, the incidence of amniotic fluid turbidity and the rate of cesarean section were statistically different among three groups (Plt;0.05), neonatal score was low, and the number of cases who needed specialist treatment increased. Conclusion Prolonged pregnancy is a high-risk pregnancy.The monitoring and detection means for prolonged pregnancy should be strengthened.Termination of pregnancy should be considered if necessary.
目的分析成都市龍泉驛區產前篩查數據，評價產前篩查技術對該區出生缺陷的預防作用。 方法對2010年11月－2012年12月在成都市龍泉驛區產前篩查中心進行中孕期產前篩查的10 230例孕婦血清樣本進行檢驗分析，從而得出孕婦罹患21-三體綜合征、18-三體綜合征和開放性神經管缺陷的風險率，借助高風險轉診、孕期追蹤及妊娠結局隨訪等方式對產前篩查結果進行核實及評價。 結果成都市龍泉驛區10 230 例產前篩查數據中21-三體綜合征、18-三體綜合征及開放性神經管缺陷篩查高風險率分別為6.02%、0.42%及0.57%，高風險孕婦產前診斷依從率為51.56%，其中57例開放性神經管缺陷篩查高風險的孕婦中有53例進行了系統超聲診斷（依從率為92.98%），而647 例21-三體或18-三體綜合征高風險孕婦僅47.30%進行了羊水穿刺，超聲診斷與羊水穿刺產前診斷依從率差異有統計學意義（P＜0.05），通過診斷確診3例21-三體綜合征患者。 結論中孕期產前篩查對控制成都市龍泉驛區出生缺陷具有重要作用，該區產前篩查21-三體或18-三體綜合征高風險孕婦產前診斷依從率有待提高。
目的探討地諾前列酮用于妊娠足月羊水過少產婦引產的有效性和安全性。 方法選擇2009年3月－2014年3月140例足月妊娠羊水過少產婦，按引產方式不同分為地諾前列酮組（n=76）和縮宮素組（n=64），比較兩組的宮頸評分改變、臨產和分娩情況、新生兒情況以及不良反應。 結果地諾前列酮組與縮宮素組促宮頸成熟有效率分別為92.1%、62.4%，進入產程時間分別為（9.2±5.7）、（30.8±9.1）h，產程分別為（5.2±2.6）、（10.8±3.9）h，陰道分娩率分別為87.0%、56.1%，剖宮產率分別為13.0%、43.9%，住院時間分別為（3.5±1.3）、（6.3±1.5）d，以上指標組間差異均有統計學意義（P＜0.001）；兩組產后2 h出血量分別是（216±129）、（223±148）mL，新生兒窒息發生率分別是3.9%、3.1%，差異無統計學意義（P＞0.05）。 結論羊水過少并非陰道分娩禁忌證，地諾前列酮用于足月妊娠羊水過少產婦引產較為安全有效，能顯著提高陰道分娩率，降低剖宮產率。
目的 研究剖宮產術中羊水微生物培養結果對術后抗感染治療的臨床指導意義。 方法 采集四川省婦幼保健院 2016 年 8 月—2017 年 5 月剖宮產術中羊水 502 份進行細菌培養，對比分析羊水培養產婦術前相關危險因素、術中羊水培養結果與術后感染的關系。 結果 502 份送檢羊水標本中，有 131 份（26.1%）培養陽性。不同孕周羊水微生物培養結果差異有統計學意義（P=0.001）。502 例產婦中 6 例發生術后感染，其中 3 例術中羊水培養陽性，羊水培養陽性與陰性的產婦術后感染發生情況差異無統計學意義（P=0.382），術前是否存在感染、孕周、抗菌藥物使用時間以及術前胎膜早破情況與術后是否發生醫院感染存在關聯性（P<0.05）。 結論 羊水標本污染率高，對術后抗感染治療參考價值不高，剖宮產術后延長抗感染治療應根據感染部位選擇適宜的標本送檢。