目的通過檢測體外缺氧/激素作用下內皮細胞（endothelial cells，ECs）增殖、遷徙以及巨噬細胞移動抑制因子（macrophage migration inhibitory factor，MIF）和VEGF的表達變化，探討激素性股骨頭缺血性壞死（steroid-induced avascular necrosis of femoral head，SANFH）血管修復障礙發生機制。 方法取第3代人臍靜脈ECs（human umbilical vein ECs，HUVECs）進行分組干預。正常對照組（A組）細胞不作任何干預；地塞米松組（B組）：用含1.0×10-6 mol/L地塞米松的完全培養液干預；缺氧培養組（C組）：細胞在低氧細胞培養罐內培養；地塞米松+缺氧培養組（D組）：細胞在低氧細胞培養罐內培養，同時用含1.0×10-6 mol/L地塞米松的完全培養液干預。干預培養后24 h，行AlamarBlue細胞活性檢測及活/死細胞染色觀測細胞增殖情況，細胞骨架染色觀察細胞骨架形態；采用劃痕實驗比較各組細胞遷徙能力，ELISA法檢測各組細胞MIF及VEGF表達水平。 結果干預培養后24 h，AlamarBlue細胞活性檢測及活/死細胞染色示C組細胞活性最好且活細胞數多，D組細胞活性最差、活細胞數最少，組間比較差異均有統計學意義（P＜0.05）。細胞骨架染色見，A、B組細胞形態正常；C組細胞大量增殖，細胞內見大量分泌顆粒；D組細胞骨架形態異常。劃痕實驗示C組細胞遷移能力最強，D組最弱。各組MIF和VEGF累積濃度隨時間延長均顯著增高。各時間點，C組MIF累積濃度顯著高于其他各組（P＜0.05）。干預培養24 h內，各組組內1～8 h時MIF階段濃度顯著低于0～1 h及8～24 h時（P＜0.05）；且C組0～1 h和8～24 h時MIF階段濃度顯著高于其他組（P＜0.05）。干預培養2 h內，各組組內0.5～1 h MIF階段濃度顯著高于其他各時間段（P＜0.05）。8、24 h時C組VEGF累積濃度顯著高于其他各組（P＜0.05）。干預24 h內，C、D組8～24 h時VEGF階段濃度顯著高于其他各時間段（P＜0.05）；干預培養2 h內，各組組內各時間段及組間VEGF階段濃度比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）。 結論缺氧條件下ECs增殖及遷徙能力增強，MIF及VEGF分泌增加；而高濃度地塞米松會抑制上述過程，引發血管修復障礙，導致SANFH發生、發展。
目的 探討維生素 E 防治大鼠早期激素性股骨頭缺血性壞死（steroid-induced avascular necrosis of femoral head，SANFH）的可能性及作用機制。 方法 取雄性 SD 大鼠 72 只，隨機分為對照組、模型組和干預組，每組 24 只。對照組大鼠不作處理；模型組及干預組采用脂多糖聯合激素法制備 SANFH 模型，干預組在注射激素的同時每天肌肉注射維生素 E 40 mg/kg，連續 7 d。末次激素注射后 2、4、8 周取股骨頭，HE 染色觀察骨壞死發生情況，計算空骨陷窩率；TUNEL 染色觀察細胞凋亡情況，計算細胞凋亡指數；免疫組織化學染色及 Western blot 檢測觀察胱天蛋白酶 9（Caspase-9）、Caspase-3、細胞色素-c（cytochrome-c，Cyt-c）蛋白表達情況。 結果 組織學觀察示，干預組空骨陷窩率僅 8 周時與對照組比較差異有統計學意義（P<0.05），4、8 周時與模型組比較差異有統計學意義（P<0.05）；干預組細胞凋亡指數各時間點均低于模型組（P<0.05），8 周時與對照組比較差異有統計學意義（P<0.05）。免疫組織化學染色及 Western blot 觀察示，干預組各時間點 Cyt-c、Caspase-9、Caspase-3 蛋白表達顯著低于模型組（P<0.05），8 周時與對照組相比差異有統計學意義（P<0.05）。 結論 維生素 E 可通過減輕線粒體依賴性骨細胞凋亡來延緩大鼠早期 SANFH 病程發展。
目的 探討Wnt/β-catenin信號通路在大鼠激素性股骨頭缺血性壞死（steroid-induced avascular necrosis of femoral head，SANFH）中的作用。 方法 12月齡清潔級雄性SD大鼠72只，體質量 200～230 g，隨機分為對照組（A組，n=24）、模型組（B組，n=24）和干預組（C組，n=24）。B、C組大鼠采用脂多糖聯合甲潑尼龍法制備SANFH模型；C組在第1次注射甲潑尼龍時開始肌肉注射人重組分泌型卷曲相關蛋白1（secreted frizzled related protein 1，SFRP1）[1 μg/（kg·d）]，持續30 d。A組于B組各注射時間點同法給予等量生理鹽水。觀察B、C組動物造模期間以及造模后一般情況。于末次注射甲潑尼龍后2、4、8 周，各組取8只動物雙側股骨頭標本行HE染色并計算空骨陷窩率，TUNEL染色并計算細胞凋亡率，免疫組織化學染色及Western blot 檢測活性β-catenin、c-Myc表達情況。 結果 B、 C組造模期間共6只動物死亡，均對應補充；其余動物均存活至實驗完成。組織學觀察示，A組為正常骨組織結構；B、C組隨時間延長均出現骨質紊亂、骨小梁斷裂等骨壞死表現。各時間點C組空骨陷窩率及細胞凋亡率均高于A、B組，B組高于A組，比較差異均有統計學意義（P < 0.05）。免疫組織化學染色及Western blot檢測示，各時間點C組活性β-catenin及c-Myc表達水平均低于A、B組，B組低于A組，比較差異均有統計學意義（P < 0.05）。 結論 Wnt/β-catenin信號通路異常參與了大鼠SANFH早期病變，作用機制可能與其調控c-Myc表達，導致骨細胞凋亡有關。