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      2. 華西醫學期刊出版社
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        找到 作者 包含"王江文" 3條結果
        • MSCs來源外泌體在創面修復中的研究進展

          目的總結近年來 MSCs 來源外泌體(exosomes,EXOs)在創面修復中的研究進展。方法廣泛查閱國內外有關 MSCs-EXOs 在創面修復中作用的文獻,總結分析 MSCs-EXOs 在創面修復過程中的作用機制及其臨床應用前景。結果MSCs-EXOs 在創面愈合過程中可抑制早期的炎性反應,促進血管新生和上皮細胞的增殖與遷移,后期調控膠原合成并抑制瘢痕增生。與 MSCs 相比,MSCs-EXOs 具有高穩定性、易于儲存、不易致瘤、無需增殖、便于定量使用等優點,有著廣闊的臨床應用前景。結論MSCs-EXOs 能夠促進創面修復,且有希望發展成為臨床上一種促進急性或慢性創面修復的產品。

          發表時間:2019-05-06 04:48 導出 下載 收藏 掃碼
        • 脂肪干細胞來源外泌體促進大鼠皮瓣移植后血管新生的研究

          目的探討脂肪干細胞來源外泌體(adipose-derived stem cell derived exosomes,ADSC-Exos)對大鼠皮瓣移植后血管新生的影響。方法取抽脂術患者自愿捐贈脂肪組織,采用酶消化法分離培養 ADSCs;取第 3 代細胞光鏡觀察形態,流式細胞術鑒定細胞表面標志物,成脂誘導培養 14 d 后油紅 O 染色觀察。細胞鑒定為 ADSCs 后,采用密度梯度離心法提取 ADSC-Exos;透射電鏡觀察形態,Western blot 檢測膜表面標志蛋白(CD63、TSG101),納米顆粒跟蹤分析儀測量其粒徑分布。取 20 只雄性 SD 大鼠,體質量 250~300 g,隨機分為 ADSC-Exos 組和 PBS 組,每組 10 只。兩組大鼠背部沿長軸方向制作面積為 9 cm×3 cm 隨意皮瓣后,分別于近端、中間和遠端區域注射 ADSC-Exos(ADSC-Exos 組)或 PBS(PBS 組)。術后大體觀察皮瓣成活情況,第 7 天測算皮瓣成活率后切取皮瓣組織,HE 染色觀察組織形態,CD31 免疫組織化學染色測定皮瓣微血管密度(mean blood vessel density,MVD)。結果光鏡、流式細胞術及成脂誘導培養鑒定培養細胞為 ADSCs。ADSC-Exos 為邊緣清晰、大小形態均勻的圓形或橢圓形膜性囊泡,高表達標志蛋白 CD63 和 TSG101,粒徑分布在 30~200 nm,符合外泌體粒徑范圍。術后兩組皮瓣遠端均出現不同程度壞死表現,但 ADSC-Exos 組程度較 PBS 組輕;第 7 天 ADSC-Exos 組皮瓣成活率為 64.2%±11.5%,顯著大于 PBS 組的 31.0%±6.6%(t=7.945,P=0.000);中間區域皮膚附屬器官更完整,近端區域組織水腫程度輕、血管擴張更多。ADSC-Exos 組 MVD 為(103.3±27.0)個/視野,顯著多于 PBS 組(45.3±16.2)個/視野(t=3.190,P=0.011)。結論ADSC-Exos 可通過促進皮瓣移植后新生血管的形成,改善皮瓣血供,進而提高大鼠皮瓣成活率。

          發表時間:2019-12-23 09:44 導出 下載 收藏 掃碼
        • 脂肪干細胞來源外泌體促進糖尿病小鼠創面愈合的實驗研究

          目的探討脂肪干細胞來源外泌體(adipose-derived stem cell released exosomes,ADSC-Exos)對糖尿病小鼠創面愈合的影響。方法取患者自愿捐贈脂肪組織,采用酶消化法分離培養 ADSCs,并于第 3 代細胞上清液提取 Exos(ADSC-Exos);透射電鏡觀察 ADSC-Exos 形態,Western blot 檢測膜表面標志性蛋白 Alix、CD63,納米顆粒跟蹤分析儀檢測粒徑分布。取患者自愿捐贈皮膚組織,采用酶消化法分離培養成纖維細胞。將 PKH26 標記的 ADSC-Exos 與第 5 代成纖維細胞培養,共聚焦熒光顯微鏡觀察其能否進入細胞,采用細胞計數試劑盒 8(cell counting kit 8, CCK-8)及劃痕法觀察 ADSC-Exos 對成纖維細胞增殖及遷移的影響。取 24 只 8 周齡 Balb/c 雄性小鼠制備糖尿病模型后,背部制備直徑 8 mm 全層皮膚缺損創面,實驗組(n=12)及對照組(n=12)創面真皮層分別注射 0.2 mL ADSC-Exos 及 PBS。第 1、4、7、11、16、21 天大體觀察創面愈合情況,計算創面愈合率;第 7、14、21 天取材,行組織學(HE 及 Masson)及 CD31 免疫組織化學染色,觀察創面結構、膠原纖維及新生血管情況。結果ADSC-Exos 為邊緣清晰、大小分布均勻的膜性囊泡;粒徑為 40~200 nm,平均 102.1 nm;膜表面標志性蛋白 Alix、CD63 均呈陽性。ADSC-Exos 與成纖維細胞復合培養觀察示,ADSC-Exos 可進入成纖維細胞胞內,并能促進成纖維細胞增殖及遷移。動物實驗顯示,實驗組小鼠背部創面愈合明顯快于對照組,各時間點創面愈合率差異均有統計學意義(P<0.05)。與對照組比較,實驗組創面結構愈合更好,愈合前期新生微血管更多,愈合后期膠原纖維沉積更多;其中,第 7、14、21 天創面缺損長度,第 7、14 天微血管數量,第 14、21 天膠原纖維沉積百分比,組間差異均有統計學意義(P<0.05)。結論ADSC-Exos 通過促進創面血管新生以及成纖維細胞增殖、遷移和膠原合成來促進糖尿病小鼠創面愈合。

          發表時間:2020-02-18 09:10 導出 下載 收藏 掃碼
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