目的對MSCs衰老的特征及發生機制的研究進展進行綜述。 方法廣泛查閱近年來國內外研究MSCs衰老的相關文獻，并進行分析總結。 結果MSCs在實驗培養傳代過程中存在著衰老跡象，表現為形態的衰老變化，增殖、分化能力逐漸減低及免疫調節功能的改變等，影響了其在臨床的應用前景。目前關于MSCs衰老機制的研究主要集中在端粒與端粒酶調控、應激損傷等，涉及到端粒酶活性調控機制、p53/p21、P13K/Akt及Wnt/β-連環蛋白等信號通路的調節。 結論對MSCs衰老機制的研究有助于加速MSCs向臨床應用的轉化。
目的探討同一年齡段、不同程度腰椎間盤退變患者髓核中p16INK4a的表達，明確其與椎間盤退變的關系，為退變椎間盤的生物學修復提供依據。 方法收集腰椎間盤退變患者退變髓核標本17例，年齡40～50歲；退變按Pfirrmann分級為Ⅲ級10例、Ⅳ級7例。檢測衰老相關-β-半乳糖苷酶（senescence-associated β-galactosidase，SA-β-gal）活性，評價細胞衰老情況；免疫組織化學染色和Western blot檢測聚集蛋白聚糖（Aggrecan）、含血小板凝血酶敏感蛋白的解聚素與金屬蛋白酶5（A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 5，ADAMTS 5）、Sry相關的HMG盒轉錄因子9（Sry-related HMG box transcription factor 9，Sox-9）、p16INK4a蛋白表達。采用Bivariate過程分析ADAMTS 5和p16INK4a蛋白表達的相關性。 結果Ⅲ、Ⅳ級髓核組織內均可見到綠染的SA-β-gal陽性髓核細胞（nucleuspulposus cells，NPCs），多呈簇狀分布，其中Ⅲ級中也可見少量單個分布的綠染NPCs，呈圓形，其外周由多層細胞外基質包裹，而Ⅳ級中難以見到單個分布的綠染NPCs；Ⅲ、Ⅳ級髓核組織陽性細胞百分比分別為22.7%±5.4%和37.1%±7.6%，差異有統計學意義（t=-9.666，P=0.000）。免疫組織化學染色和Western blot檢測示，Ⅳ級髓核組織中p16INK4a、ADAMTS5染色陽性細胞百分比和蛋白相對表達量明顯多于Ⅲ級，而Aggrecan、Sox-9明顯少于Ⅲ級，差異均有統計學意義（P<0.05）。退變髓核組織中ADAMTS 5與p16INK4a的蛋白表達成線性相關（r=0.908，P=0.000）。 結論過早衰老NPCs的累積與椎間盤退變程度密切相關，p16INK4a參與的NPCs過早衰老對椎間盤退變進程起著主導作用。
目的對大鼠腰椎及尾椎間盤髓核細胞（nucleus pulposus cells，NPCs）進行體外分離培養、形態學鑒定，并對比研究細胞生長特性。 方法分別取8周齡SD大鼠腰段（L1、2～L6、S1）及尾段（C1、2～C17、18）椎間盤，采用組織貼壁法分離培養NPCs；倒置相差顯微鏡觀察細胞形態變化，行HE、甲苯胺藍及Ⅱ型膠原免疫組織化學染色觀察；分別取兩組第1～5代細胞測定細胞活力（錐蟲藍染色）、總蛋白含量（BCA法）及衰老水平[衰老相關β-半乳糖苷酶（senescence-associated β-galactosidase，SA-β-gal）染色]；取第1代細胞行增殖能力（細胞計數試劑盒8法）測定。 結果成功分離培養各節段椎間盤NPCs。尾段原代NPCs貼壁時間及生長達90%融合時間顯著少于腰段原代NPCs（P＜0.05）。HE染色示NPCs細胞質呈粉色，細胞核呈卵圓形，均一藍黑色；甲苯胺藍染色示NPCs細胞質呈藍色；Ⅱ型膠原免疫組織化學染色示細胞質見黃褐色顆粒沉著核周區顯著，細胞核呈藍黑色。腰段組細胞以長梭形為主，尾段組以多角形、不規則形為主。細胞活力測定示腰段及尾段兩組間及兩組內各代次間NPCs活力比較差異均無統計學意義（P＞0.05）。增殖能力檢測示，腰段細胞培養4～5 d后進入對數生長期，尾段細胞培養3 d后即進入對數生長期；培養3～9 d尾段細胞吸光度（A）值高于腰段細胞（P＜0.05）。總蛋白合成檢測示，尾段及腰段NPCs總蛋白含量組內各代次間比較差異均無統計學意義（P＞0.05），尾段各代NPCs總蛋白含量均顯著高于同代腰段NPCs（P＜0.05）。衰老水平檢測示，兩組間第1、2、3代比較老化細胞陽性率差異無統計學意義（P＞0.05），腰段組第4、5代老化細胞陽性率較同代尾段細胞高，差異有統計學意義（P＜0.05）。 結論與同時間點大鼠腰椎間盤NPCs相比，尾椎間盤NPCs生長狀態更佳，更適宜作為研究椎間盤退變的種子細胞。