目的：采用常壓間歇性低氧(intermittent hypoxia,IH)大鼠的動物模型，觀察間歇性常壓低氧預處理的促血管生成作用。方法:成年雄性Wistar大鼠25只，體重210～215 g，隨機分為2大組:對照組(C組，n=5)和間歇性低氧預處理組(IH組，n=20)。IH組動物進行間歇性低氧預處理(4 h/d，間歇缺氧1 d者為IH1組，7 d者為IH2組，14 d者為IH3組，28 d者為IH4組)，按計劃完成實驗后測定心肌血管內皮生長因子(VEGF) 蛋白表達及毛細血管密度。結果：間歇性低氧預處理大鼠心肌VEGF蛋白表達增加，心肌毛細血管密度增高。結論：間歇性低氧預處理能促進大鼠心肌內的血管生成，其機制可能與心肌VEGF表達增高有關。
目的 觀察中藥制劑明睛顆粒對激光誘導脈絡膜新生血管（CNV）小鼠外周血骨髓來源細胞（BMCs）在CNV趨化和黏附的影響。方法 將75只C57BL/6J小鼠按隨機數字表方法隨機分為3組：干預組、對照組、正常空白組。干預組和對照組各30只小鼠，正常空白組15只小鼠。干預組和對照組小鼠采用氪激光光凝誘導CNV發生。激光造模后0.5~1 h給予尾靜脈注射綠色熒光蛋白（GFP）轉基因小鼠的BMCs。造模后第1天干預組小鼠予以明睛顆粒溶劑每日灌胃直至處死取樣，每只小鼠灌胃0.3 ml，相當于30 g/（kg?d）生藥；對照組予以等體積蒸餾水灌胃；正常空白組小鼠常規喂養。分別在灌胃干預后第7、14、28天，采用脈絡膜鋪片觀察CNV及BMCs在CNV處的趨化和黏附情況；光學顯微鏡觀察小鼠視網膜脈絡膜組織病理改變；酶聯免疫吸附測定法（ELISA）檢測小鼠外周血趨化因子受體4（CXCR4）的含量；免疫熒光法觀察基質細胞衍生因子-1（SDF-1alpha;）、血管細胞黏附分子（VCAM-1）、細胞間黏附分子（ICAM-1）在CNV區域的表達。結果 脈絡膜鋪片觀察顯示，干預組和對照組均可見CNV生成，而正常空白組均未見CNV；明睛顆粒干預后第7、14天，干預組CNV中BMCs明顯少于對照組，CNV面積亦較對照組小（t=10.9，P=0.007、0.024）。光學顯微鏡觀察顯示，干預組視網膜脈絡膜病變較對照組輕。ELISA檢測結果顯示，干預后7、14天干預組外周血CXCR4含量明顯低于對照組和正常對照組（F=8.107、4.499，P＜0.05）；免疫熒光法檢測結果顯示，干預組CNV區域SDF-1alpha;、ICAM-1、VCAM-1表達較對照組減弱。結論 中藥制劑明睛顆粒能在CNV形成早期抑制外周血BMCs在CNV的趨化和黏附及參與CNV形成作用。其機制可能與明睛顆粒減少外周血及CNV周圍趨化因子和黏附因子的蛋白表達有關。
目的 觀察重組干擾素誘導蛋白-10（IP-10）對人視網膜血管內皮細胞（HREC）和人臍靜脈血管內皮細胞（HUVEC）增生、遷移及管腔形成能力的影響。方法 逆轉錄聚合酶鏈反應（RT-PCR）法檢測HREC和HUVEC中CXC趨化因子受體3（CXCR3） mRNA的表達情況；以細胞計數試劑盒-8（CCK-8)增生分析法比較HREC和HUVEC在不同IP-10濃度下增生能力的差異；采用細胞劃痕法測定IP-10對HREC和HUVEC遷移的作用；采用基質體外三維成型法檢測IP-10對HREC和HUVEC管腔形成的影響。結果 HREC和HUVEC均在基因水平表達CXCR3。CCK8增生分析法檢測結果顯示IP-10抑制HREC增生，并呈劑量依賴性（F=6.202，P＜0.05），但IP-10對HUVEC增生無明顯影響（F=1.183，P＞0.05）。細胞劃痕法測定結果顯示，HREC和HUVEC在10、100 ng/ml IP-10干預時的遷移距離均小于對照組遷移距離，差異有統計學意義（F=25.373、23.858，P＜0.05）。10、100 ng/ml IP-10對HREC完整管腔形成數量無明顯影響，1000 ng/ml IP-10可使HREC完整管腔形成數量明顯減少；10、100、1000 ng/ml IP-10干預和未行IP-10干預的HREC完整管腔形成數量比較，差異有統計學意義（F=5.359，P＜0.05）。結論 IP-10對HREC的增生、遷移、管腔形成均有抑制作用，對HUVEC的遷移有抑制作用。
目的 觀察脂質體Lipofectamine TM 2000（LF2000）介導pSUPER為載體的缺氧誘導因子-1alpha;（HIF-1alpha;）特異性小干擾RNA重組質粒（pSUPERsiHIF-1alpha;）對小鼠視網膜新生血管的抑制作用。方法 構建重組質粒pSUPER siHIF-1alpha;。將48只7日齡C57BL/6J小鼠分為正常組、空白對照組、空載體組和基因治療組，每組12只。正常組小鼠在正常空氣中飼養。空白對照組、空載體組和基因治療組建立氧誘導的視網膜新生血管模型。后空白對照組小鼠不再作任何處理。于出艙前1 d，空載體組小鼠玻璃體腔注射pSUPER 和LF2000脂質體混合物1 mu;l，基因治療組小鼠玻璃體腔注射重組質粒pSUPERsiHIF-1alpha;和LF2000脂質體混合物1 mu;l。采用熒光造影視網膜鋪片觀察各組小鼠視網膜血管形態變化；作病理切片，光學顯微鏡下計數各組突破視網膜內界膜的新生血管內皮細胞核數；免疫組織化學染色法檢測各組小鼠視網膜中HIF-1alpha;、血管內皮生長因子（VEGF）的蛋白表達；逆轉錄聚合酶聯反應（RT-PCR）檢測各組小鼠視網膜中HIF-1alpha; mRNA的表達。結果 視網膜鋪片熒光顯微鏡觀察顯示，正常組小鼠整個視網膜血管分布呈均勻網狀；空白對照組、空載體組小鼠視網膜中周部可見大片無灌注區及新生血管叢，伴熒光滲漏；基因治療組無灌注區及新生血管叢空白對照組、空載體組明顯減少，視網膜血管網狀結構基本正常。光學顯微鏡觀察發現，空白對照組、空載體組突破視網膜內界膜的血管內皮細胞數較正常組明顯增多，差異有統計學意義（F=5850.016，P＜0.05）；基因治療組突破視網膜內界膜的血管內皮細胞數較空白對照組明顯下降，差異有統計學意義（F=3012.469，P＜0.05）。免疫組織化學染色結果 顯示，HIF-1alpha;蛋白陽性表達主要位于細胞核中，VEGF蛋白陽性表達主要位于細胞漿中。正常組小鼠視網膜中HIF-1alpha;蛋白表達均呈陰性，VEGF蛋白表達呈弱陽性；空白對照組、空載體組小鼠HIF-1alpha;、VEGF蛋白表達均呈陽性；基因治療組小鼠視網膜中HIF-1alpha;、VEGF蛋白表達均呈弱陽性。RT-PCR檢測結果顯示，空白對照組、空載體組較正常組小鼠視網膜中HIF-1alpha; mRNA表達上調，差異有統計學意義（F=3102.326，P＜0.05）。基因治療組小鼠視網膜中HIF-1alpha; mRNA表達較空白對照組下調，差異也有統計學意義（F=3336.425，P＜0.05）。結論 脂質體介導重組質粒pSUPERsiHIF-1alpha;轉染視網膜可有效抑制氧誘導小鼠視網膜新生血管的形成。
目的 觀察15-脂氧合酶-1（15-LOX-1）基因轉移對氧誘導小鼠視網膜新生血管的抑制作用。 方法 7日齡C57BL/6J小鼠96只，隨機分為正常對照組、氧誘導視網膜病變（OIR）模型組、基因治療組和空白載體組。將小鼠與哺乳母鼠共同置于氧濃度為（75plusmn;2）%的氧箱內飼養5 d后轉移至正常環境中飼養5 d，建立OIR模型。小鼠出生后第12天基因治療組玻璃體腔注射攜帶增強型綠色熒光蛋白(EGFP)和小鼠15-LOX-1基因的重組腺病毒（Ad-15-LOX-1-EGFP）載體 1 mu;l；空白載體組注射等量攜帶EGFP的重組腺病毒（Ad-EGFP）載體。注射后第2天行視網膜鋪片熒光顯微鏡觀察EGFP的表達。注射后第5天行免疫熒光染色法、實時熒光定量聚合酶鏈反應和蛋白免疫印跡法檢測15-LOX-1-基因轉染視網膜的表達；視網膜鋪片觀察視網膜血管變化，測量視網膜無灌注區和新生血管的相對面積；石蠟切片蘇木精伊紅染色并計數突破視網膜內界膜的血管內皮細胞核。結果 Ad-15-LOX-1-EGFP注射第2天，視網膜鋪片上觀察到EGFP的表達。免疫熒光染色結果顯示,15-LOX-1基因轉染視網膜主要表達在外叢狀層、內核層和神經節細胞層。基因治療組15-LOX-1蛋白和mRNA表達水平明顯高于OIR模型組和空白載體組，差異有統計學意義(t蛋白表達水平=22.74、24.13，tmRNA表達水平=12.51、13.40；P＜0.01)；基因治療組視網膜無灌注區和新生血管面積較OIR模型組和空白載體組顯著減小，差異有統計學意義(t無血管區面積=16.22、14.31，t新生血管面積=9.97、9.07；P＜0.01)；基因治療組中突破視網膜內界膜的血管內皮細胞核與OIR模型組和空白載體組比較明顯減少，差異有統計學意義(t=14.25、11.62，P＜0.01)。結論 15-LOX-1基因轉移不僅可以減少氧誘導小鼠視網膜無灌注區面積,并且對視網膜新生血管有顯著的抑制作用。
絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號通路中主要存在3種亞型，分別為細胞外信號調節激酶（ERK）、c-Jun氨基末端激酶（JNK）和p38 MAPK。它們在各亞群內部均存在著類似的、相互獨立的三級級聯反應，在適當刺激因素下作用于不同的底物可產生不同的細胞生物學效應。眼底新生血管是多種致盲眼病的病理基礎，是多種因子相互作用導致促血管生成因子和抗血管生成因子間的平衡失調的結果；而有關多種因子發揮生物效應的MAPK信號通路在眼底新生血管發生發展過程中的作用越來越引起注意。MAPK信號通路在糖尿病視網膜病變、早產兒視網膜病變、老年性黃斑變性、視網膜靜脈阻塞等疾病的新生血管形成中發揮重要的調控作用。通過對MAPK信號通路在眼底新生血管作用機制的探索，有助于深入詳盡地了解眼部疾病的形成和發展規律，為預防和控制眼底新生血管形成和發展提供新的思路和方案。在未來，針對MAPK信號通路的靶向治療將成為有效抑制眼底新生血管形成的重要治療方案之一。
目的 觀察光動力療法（PDT）聯合玻璃體腔注射抗血管內皮生長因子單克隆抗體bevacizumab（商品名Avastin）治療滲出型老年性黃斑變性（AMD）的療效。方法 臨床確診為滲出型AMD患者28例34只眼納入研究。其中，典型性為主型脈絡膜新生血管（CNV）者25只眼，輕微典型性CNV者9只眼。光相干斷層掃描（OCT）檢查結果顯示黃斑區視網膜下液（SRF）11只眼，視網膜內液（IRF）23只眼。所有患者常規行PDT治療后3~7 d再行玻璃體腔注射bevacizumab治療。治療后每1個月行最佳矯正視力（BCVA）和OCT檢查。OCT檢查發現SRF和（或）IRF增多，或連續注射2次后，積液較上次隨訪無明顯變化，但視力下降ge;1行者行再次玻璃體腔注射治療；若 無視網膜積液者，或連續2次復查顯示積液較上次隨訪無明顯變化，且視力無下降者停止治療。對比分析治療前和治療后6個月患眼的視力變化情況、視網膜厚度變化和bevacizumab注射次數。分析治療后視力的相關影響因素，BCVA、中心視網膜厚度（CRT）與CNV類型、治療后視網膜是否有積液之間的關系；玻璃體腔注射bevacizumab次數與CNV類型、SRF、IRF之間的關系。結果 治療后6個月，患眼平均BCVA（44.9plusmn;21.3）個字母，較治療前提高（9.4plusmn;10.2）個字母，差異有統計學意義（t=5..438，P＜0.01）。患眼平均CRT為（177.1plusmn;95.8） mu;m，較治療前下降（184.6plusmn;214.6） mu;m，差異有統計學意義（t=4.810，P＜0.01）。患眼玻璃體腔注射bevacizumab總次數為63次，平均注射次數為（1.9plusmn;0.9）次。治療后6個月的視力僅與治療前視力相關 (r=0.802.P＜0.01)；與治療前病灶大小（r=-0.183）、視網膜厚度（r=-0.089）、CNV分型（r=0.053）和OCT積液分型（r=0.139）均無相關性（P＞0.05）。SRF患眼治療后BCVA的變化多于IRF患眼，差異有統計學意義（t=-2.207，P=0.035）。CNV類型（t=-0.076）、治療后有無積液（t=1.159）與治療后BCVA的變化無關（P＞0.05）。治療后CRT變化與CNV類型（t=-1.028）、OCT積液分型（t=-0.020）無關（P＞0.05）。玻璃體腔注射bevacizumab的次數與CNV類型（Z=-1.505）、OCT積液分型（Z=-0.237）及治療后視網膜是否有積液（Z=-1.194）均無相關性（P＞0.05）。結論 PDT聯合玻璃體腔注射bevacizumab治療滲出型AMD可短期內提高患眼視力，降低患眼視網膜厚度。
目的 觀察出血性老年性黃斑變性（AMD）的病理組織特點。方法 手術中獲取的36例出血性AMD患者的石蠟標本納入研究。患者中，隱匿性脈絡膜新生血管（CNV）26例；息肉樣脈絡膜血管病變（PCV）10例。病理標本常規處理后行蘇木精伊紅、糖原法、Masson染色。光學顯微鏡觀察。在最大垂直和水平的病理標本切片上，記錄細胞及細胞外基質中細胞的組成種類，以及病理組織與視網膜和脈絡膜的位置關系。依據病變組織組成不同分為新生血管為主型、膠原纖維為主型、出血后的紅細胞聚集為主型、變性增厚的Bruch膜為主型。結果 36例患者中，新生血管為主型19例，其中隱匿性CNV 18例，PCV 1例；膠原纖維為主型6例，均為隱匿性CNV；出血后紅細胞聚集為主型8例，其中隱匿性CNV 1例，PCV 7例；變性增厚的Bruch膜為主型3例，其中隱匿性CNV 1例，PCV 2例。以新生血管為主型的隱匿性CNV ，病變組織血管管徑細小，血管內徑為單層內皮細胞附著，并伴有血管內、外紅細胞聚集；以新生血管為主型的PCV病變組織位于Bruch膜下，血管管徑粗大，血管壁厚，可見脈絡膜黑色素細胞。視網膜色素上皮細胞散在分布于所有標本中，且以偏向視網膜方向為主。5份標本新生血管附近可見大量炎性細胞存在。結論 出血性AMD組織結構呈多樣性。
目的 比較單純玻璃體腔注射雷珠單抗（ranibizumab，商品名Lucentis）與光動力療法（PDT）聯合玻璃體腔注射雷珠單抗治療特發性脈絡膜新生血管（ICNV）的臨床療效及安全性。方法 隨機對照臨床前瞻性研究。經最佳矯正視力（BCVA）、全視網膜鏡眼底檢查、眼底血管造影及光相干斷層掃描（OCT）檢查確診的ICNV患者27例27只眼納入研究。采用隨機數表對患者隨機分為2組。其中，單純玻璃體腔注射雷珠單抗組（單純藥物注射治療組）13例13只眼；PDT治療1周后玻璃體腔注射雷珠單抗組（聯合治療組）14例14只眼。單純藥物注射治療組行玻璃體腔注射雷珠單抗0,5 mg；聯合治療組參照PDT治療老年性黃斑變性研究制定的標準先行PDT治療，1周后行玻璃體腔注射雷珠單抗0.5 mg。治療后1、2、3、6、12個月，采用治療前相同的設備和方法 檢查BCVA、脈絡膜新生血管（CNV）滲漏以及視網膜厚度的變化。其中，BCVA轉換為最小分辨角對數（logMAR）視力。CNV未完全閉合仍有滲漏者，則再次行玻璃體腔注射雷珠單抗治療。2次玻璃體腔注射雷珠單抗治療之間的最短間隔時間為1個月。結果 2組患者治療后視力較治療前均有明顯提高。治療后12個月，單純藥物注射治療組患者平均logMAR視力為0,22plusmn;0.11，聯合治療組患者平均logMAR視力為0.21plusmn;0.12；2組患者平均logMAR視力比較，差異無統計學意義（t=0.187，P=0.853）。眼底血管造影檢查結果顯示，單純藥物注射治療組患者中10例CNV完全閉合，占77.92%；3例CNV部分閉合，輕微熒光滲漏，占23.08%。聯合治療組患者中12例CNV完全閉合，占85.71%；2例CNV部分閉合，輕微熒光滲漏，占14.29%。OCT檢查結果顯示，2組患者治療后CNV強反射區域縮小，視網膜下積液吸收，黃斑區視網膜厚度下降。單純藥物注射治療組患者黃斑區平均視網膜厚度為（167.96plusmn;10.69）mu;m，聯合治療組患者黃斑區平均視網膜厚度為（171.64plusmn;11.30） mu;m；2組患者平均視網膜厚度比較，差異無統計學意義（t=-0.887，P=0.389）。單純藥物注射治療組患者接受玻璃體腔注射的平均次數為（2.4plusmn;1.0）次；聯合治療組患者接受玻璃體腔注射的平均次數為（1.5plusmn;0.7）次。兩組患者接受玻璃體腔注射的平均次數比較，差異有統計學意義（t=2.821，P=0.009）。治療及隨訪過程中，單純藥物注射治療組患者中1例出現結膜下出血，其余患者未發現其他眼部及全身不良反應。結論 單純玻璃體腔注射雷珠單抗或PDT聯合玻璃體腔注射雷珠單抗均能減輕CNV滲漏，降低視網膜厚度，改善ICNV患者視力，無嚴重的眼部和全身不良反應。PDT聯合玻璃體腔注射雷珠單抗治療可減少玻璃體腔注射的次數。