肺的損傷主要分為急性和慢性損傷,如急性呼吸窘迫綜合征和慢性阻塞性肺疾病。肺的功能恢復主要依靠損傷后炎癥的調控、肺組織和氣道的重塑,以及肺內干細胞的增生分化和組織的修復。臨床治療急性肺損傷采用抑制炎癥、調控凝血和纖維蛋白溶解、保護性肺通氣等改善缺氧;針對慢性氣道疾病,則采用改善氣道黏液高分泌、擴張氣道平滑肌、調節氣道炎癥免疫狀態、改善氣道重塑等策略。肺組織和氣道功能的修復基于肺內干細胞的增生和修復,臨床治療的核心是改善病理生理,為肺的修復創造條件。
目的觀察水通道蛋白 1(AQP1)對內皮祖細胞(EPC)增殖遷移功能的影響。方法體外分離 AQP1 野生型(WT)(n=6)和敲除型(KO)小鼠(n=6)骨髓細胞并定向培養分化為 EPC。應用免疫熒光法檢測細胞表面抗原鑒定 EPC,通過無標記活細胞動態分析技術、細胞 Transwell 遷移實驗及劃痕實驗比較 AQP1 WT 和 KO 小鼠中 EPC 的功能差異。結果對小鼠 EPC 培養觀察發現,細胞最初保持懸浮狀態,7 d 內逐漸黏附貼壁成典型的間充質干細胞,間充質干細胞經內皮細胞專用培養基培養 7 d 后逐漸分化貼壁,14 d 后細胞繼續增殖,形態為梭形或多邊形,并融合成鋪路石樣的 EPC 細胞。細胞表面標志鑒定發現,應用內皮細胞專用培養基培養 7 d 后細胞 CD133 及 CD31 表達陽性,隨著培養時間的延長在 14 d 時 CD34 及 Flk-1 表達陽性。免疫熒光法驗證結果顯示,AQP1 僅在 AQP1 WT 小鼠的 EPC 中表達陽性。對不同 AQP1 狀態下 EPC 的功能研究結果顯示,培養 72 h 的 AQP1 WT 小鼠與 KO 小鼠 EPC 細胞增殖數目無顯著差異。Transwell 檢測結果顯示,AQP1 KO 小鼠其 EPC 遷移能力較 WT 小鼠明顯減弱。細胞劃痕實驗檢測結果顯示,AQP1 KO 小鼠 EPC 的劃痕愈合能力也明顯低于 WT 小鼠。結論EPC 最初表現出干細胞特征,隨著培養時間延長,逐漸表現出內皮細胞特征。AQP1 可影響 EPC 的遷移能力而非增殖能力。
目的 建立H7N9禽流感患者恢復期T細胞受體庫,尋找H7N9特異性T細胞受體變化。 方法 收集2013年3月至5月確診的8例人感染禽流感H7N9患者恢復期血液以及10例健康人血液,分離基因組DNA,采用Illumina HeSeq2000測序平臺對T細胞受體庫β鏈(TRB)抗原互補決定區3進行高通量測序,分析TRB庫的多樣性等特征。 結果 與正常組比較,H7N9患者某些TRBV基因使用頻率如TRBV30、TRBV27存在顯著差異。使用主成分分析降維后,發現恢復期患者TRBV-TRBJ基因配對模式與正常人有顯著差別,可用于區分H7N9患者和正常人群。患者-患者、正常人-正常人之間的共享序列數量和頻率明顯大于患者-正常人,且患者間TRB庫具有較高相似度。多樣性指數在患者組明顯低于正常人群,顯示在感染恢復期其免疫功能仍處于相對低下狀態。同時H7N9患者中超高表達克隆明顯增多,且序列間存在較高相似性。 結論 H7N9恢復期患者T細胞受體庫有H7N9特征性變化,這些特征將為疾病的診斷和治療性T細胞的研究提供重要信息。
目的探究血小板變化與急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)患者預后的關系。方法通過回顧性分析方法納入復旦大學附屬中山醫院 2008 年至 2015 年收治的 275 例 ARDS 患者,從病案系統中采集患者的臨床癥狀、實驗室檢查指標、疾病轉歸等信息。用 COX 回歸分析、Kaplan-Meier 生存曲線等統計學方法分析疾病前 3 d 內血小板下降與 ARDS 預后的關系,并進行亞組分析。結果按照納入與排除標準,共 233 例患者入組,根據其疾病前 3 d 內血小板計數分為下降組和非下降組。單因素分析、COX 回歸分析、Kaplan-Meier 生存曲線均顯示兩組的預后差異有統計學意義(均 P<0.05)。根據初始的血小板計數和 3 d 內血小板變化情況把所有入組患者分為 9 個亞組。通過比較這些亞組的死亡率得到兩個風險組,包括持續性低血小板組(初始血小板計數<139×109/L,且疾病前 3 d 血小板增加<16×109/L),以及血小板下降組(初始血小板計數≥139×109/L,且疾病前 3 d 血小板下降>30×109/L)。其余亞組合并為非風險組。將兩個風險組合并后與非風險組進行比較,單因素分析、COX 回歸分析、Kaplan-Meier 生存曲線均顯示風險組與非風險組的預后差異有統計學意義(均 P<0.05),各項凝血功能指標差異無統計學意義(均P>0.05)。血小板計數也可以作為風險組中手術亞組(P=0.003)、非高血壓亞組(P=0.018)和肺炎亞組(P<0.001)的獨立預后指標。結論血小板低下、血小板減少與 ARDS 的不良預后相關,可以作為臨床預后評價的指標。