目的觀察重組腺相關病毒(rAAV)-多聚嘧啶序列結合蛋白相關剪接因子(PSF)對氧誘導視網膜新生血管的抑制作用。 方法7日齡C57BL/6J小鼠18只,隨機分為正常組、rAAV-PSF注射組、rAAV注射組,各組均6只。蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測各組小鼠視網膜組織中PSF的表達。7日齡C57BL/6J小鼠48只隨機分為正常組、氧誘導視網膜病變 (OIR)模型組、OIR rAAV-PSF治療組、OIR rAAV治療組,各組均為12只。除正常組外,其余各組小鼠與哺乳母鼠共同置于氧濃度為(75±2)%的氧箱內飼養5 d后轉移至正常環境中飼養5 d,建立OIR模型。12日齡時,OIR rAAV-PSF治療組小鼠玻璃體腔注射病毒滴度為5×1013 pfu/ml的rAAV-PSF重組載體2 μl;OIR rAAV治療組小鼠玻璃體腔注射相同病毒滴度的單純rAAV載體2 μl。OIR模型組小鼠出氧箱后不作任何處理。石蠟切片蘇木精-伊紅染色并計數突破視網膜內界膜的血管內皮細胞核;Western blot檢測視網膜中VEGF蛋白表達含量。 結果正常組小鼠視網膜PSF蛋白表達與rAAV-PSF注射組比較,差異有統計學意義(F=16.05,P=0.001),與rAAV注射組比較,差異無統計學意義(F=16.05,P=0.890)。正常組、OIR模型組、OIR rAAV-PSF治療組、OIR rAAV治療組突破內界膜的視網膜新生血管內皮細胞核數比較,正常組與OIR模型組差異有統計學意義(F=101.00,P=0.007);rAAV-PSF治療組與OIR模型組差異有統計學意義(F=101.00,P=0.002);OIR rAAV治療組與OIR模型組差異無統計學意義(F=101.00,P=0.550)。各組視網膜VEGF蛋白表達比較,正常組與OIR模型組差異有統計學意義(F=13.20,P=0.005),OIR模型組與OIR rAAV-PSF治療組差異有統計學意義(F=13.20,P=0.001);OIR模型組與OIR rAAV組差異無統計學意義(F=13.20,P=0.071)。 結論rAAV-PSF玻璃體腔注射可以抑制OIR小鼠視網膜VEGF表達,從而抑制其新生血管生成。
目的分析氧誘導視網膜病變（OIR）小鼠模型的微小RNA表達譜，篩選可能與視網膜新生血管（RNV）形成有關的微小RNA。 方法7日齡健康C57BL/6J小鼠52只隨機分為正常對照組和OIR組，每組26只。OIR組建立OIR小鼠模型；正常對照組不做任何處理。小鼠17日齡時，行視網膜鋪片，觀察視網膜血管形態；行視網膜石蠟切片，計數突破內界膜的視網膜血管內皮細胞核數；行微小RNA芯片分析，檢測具有差異表達的微小RNA，再應用實時聚合酶鏈反應（RT-PCR）進行驗證。 結果正常對照組小鼠視網膜血管平滑、均勻有序分布；OIR組小鼠周邊視網膜血管紆曲、紊亂并伴有新生血管芽，中央視網膜無灌注區明顯。正常對照組、OIR組小鼠視網膜無灌注區的相對面積分別為（6.57±3.6）%、（25.81±2.12）%；OIR組小鼠視網膜無灌注區的相對面積較正常對照組明顯增大，差異有統計學意義（t=28.71，P＜0.001）。光學顯微鏡觀察發現，正常對照組小鼠內界膜結構完整、平滑，血管內皮細胞排列整齊，偶見突破內界膜的血管內皮細胞核。正常對照組、OIR組平均每張切片突破內界膜的視網膜血管內皮細胞核數分別為（0.16±0.31）、（28.41±4.01）個。兩組平均每張切片突破內界膜的視網膜血管內皮細胞核數比較，差異有統計學意義（t=54.45，P＜0.001）。微小RNA芯片分析結果顯示，與正常對照組比較，OIR組有21個微小RNA的表達發生了1.5倍以上的變化。其中，上調者9個，下調者12個。差異表達倍數≥3.0的微小RNA為miR-3078、miR-140、miR-29b、miR-29c。RT-PCR檢測發現，差異表達倍數≥3.0的4個微小RNA，其表達趨勢與芯片分析結果一致。與正常對照組比較，OIR組miR-3078的表達明顯上調，差異有統計學意義（t=-2.380，P＜0.05）；miR-140、miR-29b、miR-29c的表達明顯下調，差異也有統計學意義（t=2.638、2.323、2.415，P＜0.05）。 結論OIR小鼠模型的微小RNA表達譜中，miR-3078、miR-140、miR-29b、miR-29c的差異表達倍數≥3.0，其可能與RNV形成有關。
目的觀察激光光凝、玻璃體腔注射雷珠單抗（IVR）治療早產兒視網膜病變（ROP）的臨床效果。 方法臨床確診為ROP的49例患兒96只眼納入研究。其中，閾值前病變1型7例14只眼，閾值期病變38例74只眼，急進性后部型ROP（AP-ROP）4例8只眼。屈光間質清楚，以纖維增生為主的Ⅱ區3期病變者接受激光光凝治療（激光治療組），共40例78只眼；屈光間質欠情楚，Ⅰ區病變、AP-ROP及全身情況較差者接受IVR治療（IVR治療組），共9例18只眼。對比分析不同治療組及不同分期患兒的首次治療治愈率。對比分析閾值前病變1型、閾值期病變及AP-ROP患兒的首次治療治愈率差異。 結果激光治療組78只眼中，首次治療成功75只眼，治愈率為96.15%；病情繼續進展至4A期3只眼，占3.85%，轉外院行玻璃體切割手術后病情穩定。IVR治療組18只眼中，首次治療成功8只眼，治愈率為44.44%；病情繼續進展10只眼, 占55.56%，經補充激光光凝治療或重復IVR治療后病情均穩定。激光治療組與IVR治療組首次治愈率比較，差異有統計學意義（Z=-5.749，P＜0.05）。閾值前病變1型、閾值期病變及AP-ROP患兒的治愈率分別為57.14%、95.95%、50.00%；3者之間首次治療治愈率比較，差異有統計學意義（χ2=24.787，P＜0.05）。 結論激光光凝治療以纖維增生為主的Ⅱ區3期病變有較好療效。IVR治療1區病變、AP-ROP和全身情況較差者也可獲得較好療效。