目的建立人甲狀腺未分化癌裸鼠自發轉移模型,觀察移植后腫瘤生長情況和轉移規律。方法用微量注射器于裸小鼠甲狀腺側葉內(甲狀腺原位移植組)和皮下(皮下對照組)注入等體積不同濃度的人甲狀腺未分化癌細胞系TAK細胞懸液,觀察動物體重、一般狀態、頸部情況及記錄生存時間,并動態觀察腫瘤局部生長和轉移情況; 取甲狀腺、氣管、食管、頸部及縱膈淋巴結、肺和骨組織行病理組織學檢查,并取移植瘤組織常規進行染色體分析。結果甲狀腺原位移植組于注射人甲狀腺未分化癌細胞系TAK細胞懸液后24~34 d裸鼠先后出現呼吸困難,實驗側甲狀腺腫物呈膨脹性生長,侵及頸前肌及周圍組織,壓迫氣管造成呼吸困難。病理組織學檢查證實原位移植成瘤率為100%,頸部淋巴結轉移率為5/10,肺轉移發生率為3/10,骨轉移發生率為1/10。移植瘤組織染色體分析證實為人類腫瘤。皮下移植組見移植瘤有完整包膜,未見侵犯局部肌層,也無局部和淋巴結轉移。結論利用裸鼠甲狀腺原位TAK細胞微量注射法,可以成功建立人甲狀腺未分化癌裸鼠原位移植模型,該模型是較為理想的用于研究甲狀腺癌轉移的動物模型。
為研究胰腺癌的轉移機理,在我校原建立的人胰腺癌JF305細胞系基礎上,利用細胞克隆,細胞電泳,流式細胞儀及人癌裸小鼠原位移植技術,建立了具有不同轉移潛能的人胰腺癌JF305單克隆細胞亞系和具有不同轉移潛能的人胰腺癌單克隆細胞亞系裸小鼠原位移植模型。結果表明該單克隆細胞亞系及其腫瘤移植模型的建立,為探討胰腺癌轉移機理提供了較理想的研究方法。
目的探討卵巢新型玻璃化冷凍法——細針穿刺浸入式玻璃化冷凍法(needle immersed vitrification,NIV)保存與移植重建化療性卵巢損傷大鼠模型的卵巢功能效果。 方法8~9周齡SPF級封閉群雌性Wistar大鼠52 只,體重250~300 g;選擇至少有2次正常動情周期的50只大鼠納入實驗研究。隨機取10只作為供體,采用NIV法冷凍保存卵巢組織并復蘇。剩余40只大鼠根據處理方法不同隨機分為3組:環磷酰胺組(C組,n=14)及環磷酰胺/移植組(C/T組,n=12)大鼠腹腔注射環磷酰胺,共21 d,建立化療性卵巢功能損傷模型,C/T組將復蘇的卵巢組織移植于大鼠左側卵巢囊內;對照組(NS組,n=14)大鼠每日腹腔注射生理鹽水,連續21 d。比較各組大鼠動情周期恢復情況、卵巢組織重量以及卵巢組織形態學改變、各級卵泡數目。 結果C/T組1只大鼠于移植術后2 d死亡,其余大鼠均存活至實驗完成。各組大鼠在注射結束后4周體重趨于一致,差異無統計學意義(P gt; 0.05)。NS組大鼠實驗期間均具有規律、正常的動情周期,C組和C/T組大鼠在注射藥物期間均出現動情周期紊亂。注射結束后,C組動情周期中位恢復時間為9 d(95%CI:7.9~10.1 d),C/T組為6 d(95%CI:4.9~7.1 d),兩組比較差異有統計學意義(χ2=6.571,P=0.010)。C組在注射結束后4周卵巢組織重量較前減輕;C/T組大鼠移植卵巢組織均存活生長良好,其重量呈逐漸增加趨勢。組織學觀察示,C組與NS組、C/T組相比始基卵泡及初級卵泡數目均顯著減少(P lt; 0.05),C/T組與NS組比較差異無統計學意義(P gt; 0.05);各組次級卵泡和竇狀卵泡數目比較,差異均無統計學意義(P gt; 0.05)。 結論將NIV法冷凍保存的正常卵巢組織移植于化療性卵巢損傷大鼠體內后,能顯著縮短動情周期恢復時間,移植卵巢組織生長良好,各級卵泡計數接近正常水平,初步提示具有化療后重建卵巢內分泌和生育能力的作用。
目的 觀察 stomatin 樣蛋白2(SLP-2)表達降低后裸鼠體內原位移植腫瘤的生長變化,進一步研究 SLP-2 在食管鱗狀細胞癌(鱗癌)發生、發展中的作用。 方法 采用 RNA 干擾技術,建立特異性抑制目的基因 SLP-2 表達和熒光素酶穩定表達的食管鱗癌細胞株(SLP-2-1 質粒感染的細胞、SLP-2-2 質粒感染的細胞)。將健康雌性裸鼠(體重 19~22 g)隨機分為 3 組,每組 12 只,6 只用于建立皮下移植瘤,另 6 只用于建立原位移植瘤模型;組 1 為 SLP-2-1 質粒感染的細胞,組 2 為 SLP-2-2 質粒感染的細胞,組 3 為空載質粒(SHGFP)感染的細胞。當某一只裸鼠開始出現體重減輕、一般情況差后為實驗終點。在處死原位移植瘤裸鼠前利用活體成像技術檢測腫瘤的熒光素酶值(ROI);處死裸鼠后,將原發腫瘤送病理學檢查。 結果 組 1 與組 2 的 ROI 值差異無統計學意義(P=0.943);組 1 和組 2 的 ROI 值均明顯低于組 3(P=0.002、0.000)。組 1、組 2 和組 3 移植腫瘤均有侵襲浸潤至食管肌層的表現。 結論 SLP-2 參與食管鱗癌的發生、發展過程,降低 SLP-2 表達可以抑制食管鱗癌的生長。
目的建立可以動態觀察直腸癌生長及淋巴轉移的原位移植模型,初步探討活體成像系統觀察直腸癌生長和轉移的可行性。方法采用裸鼠直腸黏膜下注射紅色熒光蛋白標記的人結直腸腺癌細胞 HCT 116 建立原位移植模型,借助活體成像系統在不同時間點采集熒光信號圖像,實時觀察癌細胞在裸鼠直腸的生長和轉移情況,應用病理學方法對原位移植淋巴轉移模型進行驗證。結果50 只可視化裸鼠直腸原位移植淋巴結轉移均成功構建。在原位移植后 2~7 周,所有裸鼠在活體成像系統中觀察到了腫瘤熒光蛋白表達。原位移植后隨著時間的延長,移植瘤體積的增大,積分光密度值逐漸增大。裸鼠直腸系膜根部淋巴結轉移、主動脈旁淋巴結轉移、肝轉移和肺轉移成時間依賴性增長。組織學檢查與依靠淋巴結表達熒光蛋白來判斷轉移情況的結果一致。結論可視化裸鼠直腸原位移植及淋巴轉移模型技術可靠可行。活體成像系統對可視化裸鼠直腸原位移植瘤生長進行實時、無創及動態觀測和淋巴轉移的觀察簡便有效。