本研究目的是探討超順磁性殼聚糖FGF-2明膠微球(SPCFGM)對小鼠間充質干細胞增殖分化作用的影響。采用化學共沉淀法制備超順磁性氧化鐵殼聚糖納米粒子(SPIOCNs),與質粒FGF-2結合后,用乳化交聯法制備SPCFGM和不含質粒FGF-2的超順磁性殼聚糖明膠微球(SPCGM),激光粒度分析儀和透射電鏡檢測SPCFGM、SPIOCNs表征,測定SPCFGM的載藥量、包封率及體外釋放活性,分別用等量SPCFGM、SPCGM、加入C3H10細胞培養基中,設SPCFGM組、SPCGM組、空白對照組3組細胞。DAPI染色觀察細胞凋亡,Western blot法驗證各組FGF-2的表達水平,CCK8法和流式細胞術檢測細胞的增殖活力及細胞周期分布。結果顯示:SPIOCNs微粒和SPCFGM微球都呈球形,粒徑分別為(25±9) nm和(140±12) μm。SPCFGM的載藥量為57.13%±5.41%,包封率為69.97%±0.04%。3組細胞無凋亡形態,SPCFGM組FGF-2蛋白水平表達較其它兩組明顯增高,細胞增殖活力明顯增高(P＜0.05)。SPCFGM可釋放FGF-2,并保持FGF-2的生物活性,促進C3H10細胞增殖分化,對細胞無毒副作用。
目的 bFGF-2 具有促進組織或血管形成的作用，通過局部應用bFGF-2 評估其對糖尿病大鼠脛骨種植體周圍骨結合的影響。 方法 采用W/O/W 雙層乳液法制備負載bFGF-2 的聚乳酸- 聚羥基乙酸共聚物[poly（lacticco-glycolic acid，PLGA）] 微球。SPF 級9 周齡雄性SD 大鼠35 只，體重220 ～ 250 g，取10 只作為正常對照組，常規飼料喂養；另外25 只經高脂高糖飼料喂養后腹腔注射鏈脲佐菌素（30 mg/kg），其中20 只成功建立2 型糖尿病模型后，隨機分為糖尿病對照組和bFGF-2 干預組（n=10）。各組實驗動物分別于右側脛骨近骺端制備種植窩，植入經微弧氧化表面處理的純鈦種植體；其中bFGF-2 干預組在種植體植入前從種植窩抽血與bFGF-2 PLGA 微球均勻混合，在血液初凝時充分貼附在種植體表面粗糙螺紋間的微孔內。術后4、8 周，取出帶種植體的脛骨行組織學觀察，比較各組大鼠種植體周圍骨結合情況。 結果 術后4 周，正常對照組種植體周圍大部分被新生薄層的板狀骨環繞，骨板連續性較好；而糖尿病對照組種植體周圍結合骨板較薄，連續性較差，可見一定量的新生骨，存在較多纖維組織顆粒，同時有廣泛的區域骨組織吸收；bFGF-2 干預組沿種植體界面可見新骨形成明顯，骨板連續性較好。術后8 周各組種植體周圍骨結合情況與術后4 周相似。術后4 周，糖尿病對照組種植體周圍骨- 種植體接觸率顯著低于正常對照組和bFGF-2 干預組，差異有統計學意義（P lt; 0.05）；bFGF-2 干預組雖然低于正常對照組，但差異無統計學意義（P gt; 0.05）。術后8 周，正常對照組及bFGF-2 干預組均顯著高于糖尿病對照組，差異有統計學意義（P lt; 0.05）；bFGF-2 干預組與正常對照組比較，差異無統計學意義（P gt;0.05）。 結 論 將bFGF-2 PLGA 微球加載于糖尿病大鼠種植體周圍可以形成較好的骨結合效果。
目的 探討 S100 鈣結合蛋白 B（S100B）在骨性關節炎（osteoarthritis，OA）軟骨損傷修復中的作用及機制。 方法 取 20 只新西蘭兔隨機分為對照組和模型組，每組 10 只。模型組兔右膝關節制動法制備軟骨損傷模型，對照組不作任何處理。4 周后采用 ELISA 法檢測關節液 IL-1β、TNF-α 水平，實時熒光定量 PCR（real-time fluorescence quantitative PCR，qRT-PCR）和 Western blot 檢測軟骨組織 S100B、FGF-2、FGF 受體 1（FGF receptor 1，FGFR1）基因及蛋白表達。分離培養人滑膜成纖維細胞（synovial fibroblasts，SF），觀察過表達、干擾 S100B 以及拮抗 FGFR1 對細胞 IL-1β 和 TNF-α 水平（ELISA 法）以及 FGF-2 和 FGFR1 基因（qRT-PCR 檢測）和蛋白（Western blot 檢測）表達的影響。 結果 ELISA 檢測示模型組兔關節液中 IL-1β 和 TNF-α 表達水平均明顯高于對照組（P<0.05）；qRT-PCR 和 Western blot 檢測示，模型組兔軟骨組織 S100B、FGF-2、FGFR1 mRNA 和蛋白表達量均顯著高于對照組（P<0.05）。過表達和干擾 S100 能夠分別顯著升高和降低脂多糖（lipopolysaccharides，LPS）誘導的 IL-1β 和 TNF-α 水平及 FGF-2 和 FGFR1 mRNA 和蛋白表達，差異均有統計學意義（P<0.05）。而拮抗 FGFR1 能夠顯著降低 LPS 誘導的 IL-1β 和 TNF-α 水平及 FGF-2 和 FGFR1 mRNA 和蛋白表達，差異均有統計學意義（P<0.05）。 結論 S100B 能夠調節 SF 炎性反應并可能影響 OA 軟骨損傷修復，其機制可能與激活 FGF-2/FGFR1 信號通路有關。