目的 金屬磨損產物對人工關節的無菌性松動有影響，通過觀察Co2+、Cr3+ 對小鼠成骨細胞凋亡、細胞周期以及在離子刺激下對成骨細胞分泌ALP 的影響，為防治人工關節置換術后假體周圍骨溶解提供實驗依據。 方 法 體外培養小鼠顱骨成骨細胞MC3T3-E1 至第3 ～ 5 代，調整細胞密度至5 × 105 個/mL，根據干預方法不同將細胞分為兩組。實驗組：成骨細胞于含10%FBS 的α-MEM 培養基中培養，待細胞完全貼壁后，加入CoCl2 與CrCl3 混合溶液；對照組：成骨細胞于含10%FBS 的α-MEM 培養基中培養。于培養12、24、48 h 后，采用流式細胞儀檢測細胞凋亡率及周期分布，ELISA 法檢測培養上清液中ALP 含量。 結果 培養12、24、48 h，實驗組凋亡率分別為13.90% ± 0.52%、14.80% ± 0.41%、13.40% ± 0.26%，對照組分別為8.56% ± 0.31%、8.19% ± 0.24%、2.15% ± 0.11%，差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。各時間點實驗組細胞G2M期分布比例明顯較對照組降低，G0G1 期分布比例較對照組增多，差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。培養12、24、48 h，實驗組ALP 含量檢測吸光度（A）值分別為0.955 ± 0.052、0.624 ± 0.041、0.498 ± 0.026，對照組分別為1.664 ± 0.041、1.986 ± 0.024、2.192 ± 0.041，兩組比較差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。 結論 Co2+、Cr3+ 對成骨細胞的細胞周期分布有明顯影響，抑制其增殖，使細胞大部分處于G0G1 期，同時增加其凋亡率，抑制成骨細胞釋放ALP。
目的 進一步研究血管內皮細胞（vascular endothelial cells，VECs）和脂肪干細胞（adipose-derived stromal cells，ADSCs）聯合培養對ADSCs 成骨分化的影響，為聯合培養VECs 和ADSCs 作為骨組織工程種子細胞的可能性提供實驗依據。 方法 分別自足月妊娠SD 大鼠和18 周齡SD 大鼠制備臍血來源的VECs 和ADSCs，行形態學觀察及免疫熒光染色鑒定。取第3 代ADSCs 與誘導培養6 周的VECs 按細胞比例分別為3 ∶ 1、1 ∶ 1 和1 ∶ 3 設為實驗組A、B、C 組，ADSCs、VECs 單獨培養設為對照組D、E 組。培養第7、14 天取各組細胞行ALP 和飽和茜素紅鈣染色，進行ALP 和骨鈣定性檢測；第4、7、14 天定量測定各組細胞ALP 和骨鈣素（osteocalcin，OC）含量。 結果 誘導培養6 周的臍血來源VECs 可見短梭形和多角形細胞混合生長，免疫熒光染色可見血管性血友病因子為陽性。ADSCs 培養可見貼壁單個核細胞形態單一，呈梭形生長，無重疊現象；免疫熒光染色可見CD90+。各組細胞培養第7 天，ALP 染色示A、D、E 組呈陰性反應，B、C 組可見部分陽性細胞；第14 天時D、E 組仍呈陰性反應，A、B、C 組可見片狀陽性細胞。培養第7 天，茜素紅染色示各組均未發現紅色陽性細胞；第14 天時A、B、C 組可見極少數陽性細胞，D、E 組未發現陽性細胞。各組ALP 含量隨時間延長均逐漸增高，其中B 組各時間點含量均最高，與其余各組比較差異均有統計學意義（P lt; 0.01），各時間點A、C 組與D、E 組比較差異均有統計學意義（P lt; 0.01），A、C 組間及D、E 組間比較差異無統計學意義（P gt; 0.05）。各組OC 含量隨時間延長逐漸增高，培養第7、14 天時B 組含量最高，各時間點B 組與其余各組比較差異均有統計學意義（P lt; 0.01），第4、14 天時C、D 組間比較差異均有統計學意義（P lt; 0.01），第14 天時A、C 組和E 組比較差異有統計學意義（P lt; 0.05），其余各時間點各組間比較差異均無統計學意義（P gt; 0.05）。 結論 大鼠臍血來源的VECs 能在體外誘導ADSCs 向成骨細胞方向分化，1 ∶ 1 比例分化能力最強。
目的初步探討原發性肝癌行聯合肝臟離斷和門靜脈結扎二步肝切除術（ALPPS）的適應證與禁忌證。 方法回顧性分析2014年8月至2015年3月期間四川大學華西醫院肝臟外科行ALPPS手術的15例患者的臨床資料，通過血液學檢測、剩余肝臟增長體積以及術后隨訪結果評價其療效。 結果14例患者完整接受ALPPS手術，1例患者因第一步手術后剩余肝臟體積增長不達標而未行第二步手術；術后平均肝臟增長體積為205.5 cm3（-7.92～270.6 cm3），平均增長百分率為56.5%（-1.89%～134.74%）。1例圍手術期發生肝功能衰竭死亡，2例分別術后3個月及4個月因腫瘤復發、轉移死亡，1例術后6個月發現AFP升高而無影像學證據證明復發，1例已帶瘤生存4個月，其余10例患者存活未發現復發轉移。 結論對原發性肝癌患者行ALPPS手術，其安全性與可行性值得肯定，并根據目前資料，初步制定行ALPPS手術的適應證與禁忌證。
目的探討大鼠滑膜間充質干細胞（synovium-derived mesenchymal stem cells, SMSCs）生物學特性及誘導成骨的可行性，評估SMSCs復合羥基磷灰石/殼聚糖/聚乳酸（hydroxylapatite/chitosan/poly L-latic acid, HA/CS/PLLA）支架材料在體內異位成骨能力。 方法采用酶消化法和貼壁法分離培養SMSCs，并利用流式細胞儀檢測細胞表型，SMSCs成脂及成骨誘導后分別行油紅O染色、ALP染色和茜素紅染色鑒定。取第3代SMSCs，成骨誘導1、7、14、21、28 d后，采用實時熒光定量PCR檢測骨鈣素（osteocalcin, OCN）、Ⅰ型膠原、ALP以及Runx-2 mRNA表達情況；成骨誘導后1、3、5、7、9、11 d，采用ELISA法檢測ALP活性；成骨誘導后7、14、21、28 d，采用茜素紅S法檢測鈣鹽沉積；以正常培養SMSCs作為對照組。體內實驗：取SD大鼠24只，隨機分為實驗組和對照組（n=12）；取第3代SMSCs接種于HA/CS/PLLA支架材料，體外復合培養72 h后植入實驗組大鼠右下肢肌袋，對照組大鼠植入單純HA/CS/PLLA支架材料；術后4、8周通過X線片及組織學觀察分析SMSCs體內成骨情況。 結果提純后SMSCs CD147、CD90、CD105、CD44表達超過95%，而CD117、CD34、CD14、CD45表達低于10%；油紅O染色可見紅色脂滴形成，茜素紅染色可見紅色鈣化灶，ALP染色可見細胞質呈咖啡樣深染。實時熒光定量PCR檢測示，SMSCs成骨誘導7 d，Ⅰ型膠原、ALP、Runx-2 mRNA表達顯著增加，誘導14 d OCN mRNA表達顯著增加。成骨誘導后5、7、9、11 d ALP活性明顯高于對照組，7 d時達峰值（P<0.05）。成骨誘導14 d，鈣含量顯著增加，且隨誘導時間延長鈣含量逐漸增加（P<0.05），且均高于對照組（P<0.05）。體內實驗術后4、8周影像學和組織學觀測結果顯示，兩組均可見新生骨形成，但實驗組成骨量明顯多于對照組（P<0.05）。 結論SMSCs在體內、體外均可誘導成骨，可成為骨組織工程的種子細胞。