目的探討基質金屬蛋白酶（MMP）-9調控CD73自視網膜色素上皮（RPE）細胞膜表面脫落的機制。方法以脂多糖及腫瘤壞死因子-α共同干預體外培養的人RPE細胞，誘導RPE細胞膜表面CD73脫落。同時給予磷脂酶C（PLC）抑制劑ET-18-OCH3 30.0 μmol/L或廣譜MMP抑制劑ONO-4817 5.0 μmol/L進行干預；流式細胞儀檢測RPE細胞膜表面CD73含量變化。以選擇性MMP-2、MMP-9抑制劑或相應siRNA進行干預；利用基因定點突變技術改造CD73中潛在的MMP-9識別位點，在CD73-/- RPE細胞中過表達野生型（Wt）及突變型（Mut）CD73，檢測Wt、Mut-CD73脫落情況。結果廣譜MMP抑制劑可有效抑制CD73自RPE細胞膜表面脫落；PLC抑制劑不能抑制CD73自RPE細胞膜表面脫落。選擇性抑制MMP-9活性或以siRNA下調MMP-9的表達也均可抑制CD73自RPE細胞膜表面脫落。表達于CD73-/-RPE細胞膜表面的Wt-CD73可發生脫落，而Lys547-Phe548編碼位點突變的CD73未見脫落。結論MMP-9通過水解Lys547-Phe548位點而參與炎癥狀態下CD73自RPE細胞膜表面的脫落。
目的初步探討MMP-9抑制劑阻斷RPE細胞表面CD73脫落，防治實驗性自身免疫葡萄膜炎（EAU）的機制。方法體外培養分離自野生型C57BL/6小鼠及CD73基因敲除（CD73-/-）小鼠的RPE細胞，以脂多糖及TNF-α共同干預，誘導RPE表面CD73脫落。依據是否同時加入MMP-9抑制劑CTK8G1150（終濃度5.0 μmol/L），將兩種小鼠培養的RPE細胞分別設為MMP-9抑制劑干預組及無干預對照組。每組細胞給予溶媒、1 μmol/L 單磷酸腺苷（AMP）、1 μmol/L AMP 及3 μmol/L 5'-α,β-亞甲基-二磷酸腺苷（APCP）（AMP+ APCP）進行干預。氚化胸苷摻入法檢測不同組別RPE細胞對CD4+ T細胞增生的刺激作用。分別以野生型B6小鼠及CD73-/-小鼠為受體，過繼免疫誘發EAU。受體小鼠分別隨機分為MMP-9抑制劑干預組及未干預對照組，于過繼免疫后4、7、10 d視網膜下腔分別注射CTK8G1150或溶媒。實時定量PCR（RT-PCR）、Western blot法檢測受體小鼠RPE細胞中CD73 mRNA及蛋白表達。組間比較采用單因素方差分析。結果刺激方式為AMP時，C57BL/6 MMP-9抑制劑干預組CD4+ T細胞的增生能力較無干預組顯著下降，差異有統計學意義（F=13.28，P＜0.01）；溶媒、AMP + APCP時，兩組CD4+ T細胞增生能力比較，差異無統計學意義（F=7.78、6.58，P＞0.05）。CD73-/-MMP-9抑制劑干預組、無干預組不同刺激方式CD4+ T細胞增生能力比較，差異均無統計學意義（F=5.24、6.12、7.04，P＞0.05）。RT-PCR檢測結果顯示，B6受體小鼠MMP-9抑制劑組、無干預對照組RPE細胞中CD73 mRNA相對表達量比較，差異無統計學意義（F=6.54，P＞0.05）。Western blot檢測結果顯示，B6受體小鼠MMP-9抑制劑組RPE細胞中CD73蛋白表達較未干預對照組顯著增加，差異有統計學意義（F=15.24，P＜0.01）。結論MMP-9抑制劑阻斷RPE細胞表面CD73的脫落對EAU具有保護作用。