目的通過觀察脊髓圓錐損傷膀胱功能重建術后大鼠膀胱逼尿肌及神經肌肉接頭(neuromuscular junction,NMJ)的形態學變化規律,探討膀胱重建術抑制或改善膀胱逼尿肌退行性變的可行性。 方法成年雌性SD大鼠104只,體重200~250 g,隨機分為3組,正常組(n=8)、脊髓圓錐損傷對照組(對照組,n=48)及脊髓圓錐損傷膀胱功能重建組(實驗組,n=48)。正常組大鼠不作任何處理;對照組大鼠采用L4、5平面銳性橫斷脊髓制作脊髓圓錐損傷模型;實驗組在脊髓圓錐損傷模型基礎上將雙側L5前、后根與S2前、后根吻合制作脊髓圓錐損傷后膀胱功能重建模型。術后觀察大鼠存活情況,于術后3 d及1、2、3、4、5、6個月前連續3 d分別測定大鼠殘余尿量;術后1、2、3、4、5、6個月取膀胱逼尿肌行HE染色觀測肌纖維截面積變化規律,Masson三色染色計算結締組織百分比,透射電鏡觀察膀胱逼尿肌和NMJ的變化。 結果術后11只大鼠死亡,均對應補充。對照組術后膀胱殘余尿量隨時間延長逐漸增加(P lt; 0.05);實驗組術后膀胱殘余尿量逐漸增加,3個月后逐漸減少,除術后3 d與5個月比較差異無統計學意義(P gt; 0.05)外,其余各時間點間比較差異均有統計學意義(P lt; 0.05)。兩組間除術后3 d及1、2個月外,其余各時間點比較,差異均有統計學意義(P lt; 0.05)。HE染色及Masson三色染色示,對照組術后逼尿肌肌纖維排列紊亂、萎縮隨時間延長逐漸加重,肌束間大量結締組織浸潤;實驗組術后4、5、6個月逼尿肌形態逐漸恢復,結締組織數量無明顯增加。各時間點對照組及實驗組逼尿肌肌纖維截面積及結締組織百分比與正常組比較,差異均有統計學意義(P lt; 0.05)。對照組隨時間延長逼尿肌肌纖維截面積逐漸減小,結締組織百分比逐漸增加(P lt; 0.05)。實驗組中術后3個月內隨時間延長逼尿肌肌纖維截面積下降,4個月后逐漸增大;結締組織百分比隨時間延長緩慢增加。術后1、2、3個月實驗組與對照組比較逼尿肌肌纖維截面積無統計學意義(P gt; 0.05),4、5、6個月實驗組顯著高于對照組(P lt; 0.05);術后1~6個月實驗組與對照組結締組織百分比比較,均有統計學意義(P lt; 0.05)。透射電鏡觀察示,對照組隨時間延長,突觸小泡數量明顯減少,3個月時NMJ呈空泡狀改變,6 個月時罕見逼尿肌間NMJ;實驗組中1、3個月逼尿肌細胞間的NMJ內突觸小泡數量減少,6個月時突觸小泡較3個月時明顯增多。 結論利用損傷平面以上正常的L5神經根作為動力神經重建脊髓圓錐損傷后大鼠膀胱功能,能夠有效延緩膀胱逼尿肌退行性變,改善其顯微結構變化。
目的 初步探討大鼠脊髓圓錐損傷后膀胱逼尿肌及其神經肌肉接頭(neuromuscular junction, NMJ)組織形態學的變化規律。 方法 成年SD大鼠48只隨機分為六組,每組8只。分別為正常對照組,脊髓圓錐損傷術后4、6、8、10及12周組,依次記作A~F組。采用L4、5平面銳性橫斷性脊髓圓錐損傷的動物模型。分別于術后相應時間點取材,先作膀胱逼尿肌HE染色,以觀測肌纖維截面積的變化規律;同時制作電鏡標本,觀察膀胱逼尿肌及其NMJ超微結構的變化規律;最后將逼尿肌行Masson三色染色,計算平滑肌及結締組織所占的百分比。 結果 HE染色觀察,大鼠逼尿肌肌纖維截面積在E、F組與A組間差異有統計學意義(P<0.05);透射電鏡觀察,B~F組逼尿肌細胞外形、大小不一致,分布不均勻,排列走行紊亂;間質中大量排列紊亂的膠原纖維,粗面內質網明顯擴張,線粒體水腫,且程度逐漸加重。逼尿肌NMJ透射電鏡觀察,B、C及D組可見其形態結構類似于A組,但線粒體及突觸小泡的數量略少;E組可見明顯退變的NMJ,突觸小泡含量明顯減少,伴有線粒體等細胞器減少;F組NMJ進一步退變,突觸小泡含量進一步減少甚至缺如,細胞器減少或消失,并可見退變小體。Masson三色染色可見逼尿肌中結締組織所占的比例在E、F組與A組間差異有統計學意義(P<0.05);且E、F組間差異亦有統計學意義(P<0.05)。 結論 大鼠圓錐脊髓損傷術后10周可作為逼尿肌及其NMJ發生變化的時間節點,神經修復手術宜在此前完成。
逼尿肌和尿道括約肌注射 A 型肉毒毒素(botulinum toxin A, BTX-A)可以阻斷神經肌肉接頭處突觸前傳出神經的乙酰膽堿釋放,抑制目標肌的收縮,改善膀胱壓力和尿動力學參數,降低尿路感染發生率和提高生活質量。目前,BTX-A 已被美國食品藥品監督管理局批準用于治療神經源性逼尿肌過度活躍癥和難治性膀胱過度活動癥。最近 BTX-A 治療逼尿肌-括約肌協調障礙的臨床試驗也報告了有希望的治療效果。該文對上運動神經元損傷特別是大腦皮質和骶上脊髓損傷引起的神經源性逼尿肌過度活動和逼尿肌-括約肌協同失調的 BTX-A 注射治療進行綜述。