目的 分析不同灌注方式和不同肝上下腔靜脈吻合方法對建立大鼠原位肝移植模型的影響。方法將80只SD大鼠隨機分為供肝獲取組和受體肝移植組,每組40只。供肝獲取組10只大鼠采用腹主動脈輸液器滴灌法(1滴/s),10只大鼠采用腹主動脈微量泵灌注法(6 mL/min),之后分別進行受體肝移植(每組對應10只大鼠肝移植),收集2組大鼠的供肝灌注時間和供肝獲取時間,并于灌注后、肝移植24 h取肝臟組織行HE染色。受體肝移植組10只大鼠肝移植時采用連續吻合法,10只采用減張力半針吻合法(2組均在成功完成10只肝移植后截止),收集2組大鼠的肝上下腔靜脈吻合時間、無肝期時間和術后發生并發癥發生情況。結果與腹主動脈輸液器滴灌組比較,腹主動脈微量泵灌注組的供肝灌注時間和供肝獲取時間較短(P<0.05);HE染色結果顯示,腹主動脈微量泵灌注組的肝細胞、門靜脈及膽管形態學無明顯改變,僅個別淋巴細胞浸潤。與連續吻合組比較,減張力半針吻合組大鼠的肝上下腔靜脈吻合時間和無肝期時間較短(P<0.05),術后吻合口出血和供肝灌注不全發生率較低(P<0.05)。結論相對于腹主動脈輸液器滴灌法,腹主動脈微量泵灌注法能提高供肝質量;與連續吻合法比較,減張力半針吻合方法能縮短無肝期與肝上下腔靜脈吻合時間,同時降低吻合口出血的發生率。
目的 建立同種異體致敏大鼠原位肝移植模型,研究該模型發生的排斥反應是否符合抗體介導的排斥反應(antibody-mediated rejection,AMR)的病理學特點。方法以12只雄性Lewis大鼠為受者,250~290 g,6只雄性 Brown Norway (BN)大鼠為供者,250~280 g。將Lewis大鼠采用隨機數字表法隨機分為4組(n=3);Lewis對照組(LC組,未做任何處理)、直接移植組(T組,BN大鼠的肝臟直接移植于Lewis大鼠體內)、致敏組(S組,Lewis大鼠體內輸入BN大鼠的脾臟淋巴細胞)和致敏后移植組(TS組,Lewis大鼠體內輸入BN大鼠脾臟淋巴細胞2周后,進行肝移植)。于肝移植后大鼠存活第14天,收集受者非致死量血液3~4 mL,檢測天冬氨酸轉氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸轉氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、總膽紅素(total bilirubin,TB)、堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和肌酐(creatinine,CRE)水平,并檢測Lewis大鼠體內供者特異性抗體(donor-specific alloantibody,DSA)及補體C4d表達情況。采用蘇木精-伊紅染色和Masson染色評定4組大鼠肝臟組織的形態學指標,采用CK-19、C4d和CD20免疫組織化學染色方法評定4組大鼠肝臟發生排斥反應的程度并進行排斥反應活性指數(rejection activity index,RAI)評分。結果與T組相比,TS組Lewis大鼠的血清AST、TB和ALP水平以及DSA(IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG2c)和C4d表達陽性率升高。與LC組相比,T組的Lewis大鼠出現部分膽管水腫及淋巴細胞浸潤,但未見明顯毛細血管結構的破壞;與T組相比,TS組Lewis大鼠的膽管前毛細血管出現大量的淋巴細胞或單核細胞浸潤及毛細血管的嚴重破壞;TS組的RAI評分和C4d評分均高于T組。結論致敏大鼠肝移植后肝臟發生更嚴重的急性排斥反應和移植肝失功能,且致敏大鼠的急性排斥反應符合AMR的特點。由于本研究樣本量較少,對AMR模型的探索還有待深入。