目的 為給單胚胎移植的臨床應用提供更可靠的證據，對國內外公開發表的選擇性單個與兩個卵裂期胚胎移植的臨床研究進行Meta分析。方法 計算機檢索PubMed、Ovid、EMbase、MEDLINE、CENTRAL等中外生物醫學數據庫，收集有關選擇性單個與兩個卵裂期胚胎移植的隨機對照試驗（RCT）。按Cochrane系統評價方法，由兩位研究者獨立選擇文獻、提取資料并評價納入研究的方法學質量后，采用RevMan 5.1軟件進行Meta分析。結果 共納入9個RCT，共計2 784例患者，其中試驗組1 452例，對照組1 332例。Meta分析結果顯示：與兩個卵裂期胚胎移植比較，選擇性單個卵裂期胚胎移植降低了每個移植周期的活產率［RR=0.66，95%CI（0.59，0.73），Plt;0.000 01］，顯著降低了多胎妊娠率［RR=0.05，95%CI（0.02，0.11），Plt;0.000 01］，亦降低了早產兒發生率［RR=0.39，95%CI（0.26，0.60），Plt;0.000 1］和低體重兒發生率［RR=0.25，95%CI（0.15，0.44），Plt;0.000 01］，但對異位妊娠率［RR=0.55，95%CI（0.11，2.77），P=0.47］、流產率［RR=1.33，95%CI（0.92，1.91），P=0.13］和圍產兒死亡率［RR=0.31，95%CI（0.03，2.76），P=0.29］無影響。結論 與兩個胚胎移植相比，選擇性單胚胎移植降低了每移植周期臨床妊娠率、多胎妊娠率、早產兒發生率及低體重兒發生率，在其他指標方面兩組無顯著差異。
目的 系統評價來曲唑+促性腺激素釋放激素拮抗劑方案對體外受精-胚胎移植（IVF-ET）中低反應患者促排卵的有效性。方法 計算機檢索VIP、CNKI、PubMed、EMbase和FMJS，收集有關來曲唑+拮抗劑方案對體外受精-胚胎移植低反應患者促排卵有效性的隨機對照試驗或臨床對照試驗。由2位評價員根據納入與排除標準獨立進行文獻篩選、資料提取和質量評價后，采用RevMan 5.0軟件進行Meta分析。結果 最終納入6個研究，共977例患者。Meta分析結果顯示：對體外受精-胚胎移植中低反應患者，來曲唑+拮抗劑方案與對照組相比，Gn用量［MD= –8.05，95%CI（–13.67，–2.43），P=0.005］、HCG日E2值［MD= –1 026.41，95%CI（–1 949.61，–103.20），P=0.03］均小于對照組；而兩組獲卵數［MD= –0.61，95%CI（–2.41，–1.19），P=0.51］和臨床妊娠率［OR=1.03，95%CI（0.53，2.02），P=0.92］無明顯差異。結論 對IVF-ET低反應患者促排卵治療的有效性而言，來曲唑+拮抗劑方案較對照組臨床結局無明顯改善，但能減少Gn用量，降低IVF治療費用。來曲唑+拮抗劑方案為卵巢低反應患者提供了另一種臨床選擇。由于納入文獻存在質量和數量不足以及方法學差異，建議本研究結論僅作為臨床分析的參考，尚需后效評價和不斷更新。
目的 系統性評價促性腺激素釋放激素（GnRH）拮抗劑在體外受精-胚胎移植治療中的有效性。方法 計算機檢索中國生物醫學文獻數據庫（1979～2010）、萬方數據庫（1994～2010）、中國學術期刊網專題全文數據庫（1994～2010）、中國生物醫學期刊數據庫（1989～2010）和PubMed（1997～2010）、ProQust Medical Library（1997～2010）、外文生物醫學期刊文獻數據庫（2000～2010），并手檢相關雜志，查找GnRH拮抗劑與GnRH激動劑比較在體外受精-胚胎移植治療中有效性的隨機對照試驗。按照納入與排除標準選擇試驗、評價質量后進行Meta分析。結果 共納入6個RCT，合計1 208例患者，其方法學質量均為B級。Meta分析結果顯示：與GnRH激動劑組相比，GnRH拮抗組刺激天數［WMD= –1.07，95%CI（–1.38，–0.76）］和獲卵數［WMD= –1.80，95%CI（–2.48，–1.12）］均更低，差異有統計學意義；而在Gn量［WMD= –0.49，95%CI（–1.63，0.66）］、HCG日子宮內膜厚度［WMD= –0.09，95%CI（–0.42，0.24）］、妊娠率［Peto OR=0.83，95%CI（0.65，1.05）］、OHSS率［Peto OR=0.77，95%CI（0.35，1.72）］和流產率［Peto OR=1.49，95%CI（0.79，2.82）］上，兩組差異均無統計學意義。結論 GnRH拮抗劑較之GnRH激動劑刺激天數短，所需Gn量少，不明顯影響妊娠率，同時可減少OHSS的發生，臨床上使用相對靈活，具有較好的接受性，為體外受精-胚胎移植超促排卵治療提供了另一種選擇。受納入研究質量和例數限制，上述結論尚需開展更多設計嚴謹的多中心、大樣本隨機對照試驗予以證實和更新。
目的 探討3種不同助孕方案在≥40歲婦女體外受精-胚胎移植（IVF-ET）周期中的臨床效果。 方法 回顧性分析2010年8月－2012年2月期間，于四川大學華西第二醫院生殖中心行IVF-ET助孕、年齡≥40歲婦女共245個周期的臨床資料，排除一側卵巢缺如患者3例，余242個周期根據助孕方案不同分為3組：拮抗劑組（GnRH-A方案組）44個周期、長方案組109個周期及短方案組89個周期，比較3種方式助孕的臨床效果。 結果 3組均無早發黃體生成素峰；長方案組應用促性腺激素（Gn）的時間最長，應用Gn數量最多，獲得最高的獲卵數及獲胚數（P＜0.05）；3組的受精率、優胚率、冷凍胚胎數、周期取消率、卵巢過度刺激綜合征發生率、早期流產率均無統計學意義（P＞0.05），短方案組的種植率及臨床妊娠率最低（P＜0.05）。 結論 GnRH-a長方案在≥40歲婦女的IVF-ET周期中具有較好的臨床結局，在≥40歲婦女IVF-ET周期中具有與長方案相似的結局，并且可以減少Gn使用量，提高卵泡及胚胎質量，短方案組對≥40歲婦女臨床效果較差。
介紹胚胎先灌后切多臟器聯合切取供帶血管胰及甲狀腺——甲狀旁腺移植的1例經驗。作者認為此法可避免熱缺血損害，并能同時提供多個臟器，優于常規的先切后灌法，從而為解決大齡胎尸供著缺乏的矛盾提供了一條新途徑。
目的 利用直接貼壁法體外誘導人胚胎干細胞分化為心肌細胞，并檢測其分化效率。 方法 人胚胎干細胞以1×105個/cm2的細胞密度傳代到鋪備有基質膠的培養皿中培養，用帶8 ng/ml堿性成纖維細胞生長因子（bFGF）的條件培養基培養6 d后，更換為RPMI 1640-B27培養基，同時加入100 ng/ml的人重組activin A處理24 h，接著再加入10 ng/ml的人重組骨形態發生蛋白4 （BMP4） 處理4 d，之后更換為不帶誘導因子的RPMI 1640-B27培養基，每隔2～3 d換1次培養基，持續2～3周。在光學顯微鏡下觀察記錄出現跳動心肌細胞的時間和跳動頻率，并計算跳動克隆百分比，24孔板一組，共記錄4組96孔；用免疫熒光染色法檢測心肌細胞特異標志物心肌肌鈣蛋白T （cTnT）；膜片鉗實驗檢測心肌細胞自發性動作電位；跳動心肌細胞經過24 h缺氧刺激后，用凋亡試劑盒檢測心肌細胞凋亡比例。結果 大量的自發跳動心肌細胞在誘導分化13 d左右開始出現。分化出現自發跳動心肌細胞的時間為（13.0±1.1） d，百分比為66.7%，跳動頻率為（63.0±7.0）次/分；跳動心肌細胞cTnT染色陽性；跳動心肌細胞檢測到自發性動作電位；跳動心肌細胞缺氧24 h后檢測到凋亡比率為8.0%±0.5%。 結論 國內首次利用直接貼壁法在體外誘導人胚胎干細胞分化為心肌細胞，分化效率達到66.7%，分化時間13 d左右。
目的建立一種安全、有效、經濟且適于人孤雌胚胎干細胞（human parthenogenetic embryonic stem cells，hPESCs）體外培養的無飼養層培養體系。 方法將常規體外培養的hPESCs分別以mTeSRTMl培養基（對照組）和人包皮成纖維細胞的條件培養基（human foreskin fibroblasts-conditional medium，hFFs-CM）（實驗組）擴增培養，倒置顯微鏡下觀察兩組無飼養層培養體系下hPESCs的生長狀態；采用ALP檢測和核型分析研究hPESCs生物學特性；采用RT-PCR檢測hPESCs全能性標記物Oct-4的表達情況；通過體外和體內分化實驗觀察hPESCs向3個胚層分化的潛能。 結果兩組hPESCs形態規則、不易分化，在形態、擴增速度等方面無明顯差異；已成功在體外培養15代，兩組均能保持正常女性的二倍體核型46，XX和全能性；RT-PCR檢測示兩組Oct-4 mRNA均呈陽性表達；體外分化均可形成擬胚體；在裸鼠體內均可形成含有3個胚層組織成分的畸胎瘤。 結論hFFs-CM無飼養層培養體系可長期支持hPESCs的生長并維持其未分化狀態，成功建立了一種不僅能維持hPESCs的有效擴增、減少動物源性污染、降低培養成本，還可滿足臨床大規模應用的hPESCs無飼養層培養體系。
目的 采用單層分步法誘導人胚胎干細胞（human embryonic stem cells，hESCs）分化為肝樣細胞，建立hESCs 分化為肝細胞的誘導體系。 方法 將hESC 株H1 細胞接種到Matrigel 包被的培養板上，早期（細胞貼壁4 d 后）加入含有細胞因子活化素A（Activin A）的分化液誘導5 d；中期將誘導液換為含FGF-1 和BMP-4 的肝分化液誘導6 d；最后添加肝細胞生長因子（hepatocyte growth factor，HGF）和制癌蛋白M（Oncostatin M，OSM）繼續誘導分化5 ～ 7 d。采用免疫細胞化學染色、RT-PCR、過碘酸- 雪夫（Periodicacid-Schiff，PAS）反應鑒定分化細胞的性質。 結果 經ActivinA、FGF-1、BMP-4、HGF 和OSM 連續誘導的hESCs 呈多角形、卵圓形或圓形，排列緊密；部分細胞出現二核或三核，呈現肝細胞所特有的形態。分化細胞在誘導早期表達SOX17、叉頭框（Forkhead box，FOX）A2、GATA-4，中期表達甲胎蛋白（αfetoprotein，AFP）、白蛋白、角蛋白18，晚期表達成熟肝細胞特異性基因乙醇脫氫酶1C、細胞色素P4501B1。免疫細胞化學染色示，Activin A 誘導后，細胞呈SOX17 和FOXA2 陽性；經FGF-1 和BMP-4 誘導后，呈AFP 和α1 抗胰蛋白酶陽性。HGF 和OSM 誘導后，PAS 糖原染色檢測陽性。 結論 采用單層分步法逐步添加細胞因子，可誘導hESCs 分化為肝樣細胞。該分化體系可為肝細胞移植、肝組織工程等臨床治療提供一個有效的細胞來源。
目的 采用簡單貼壁培養方法誘導胚胎干細胞（embryonic stem cell，ESC）分化為內皮樣細胞，為組織工程血管及細胞替代治療提供新的種子細胞。 方法 小鼠ESC 株SV129 按2 × 104 個/cm2 密度傳代培養，采用ESC培養基添加1 000 U/mL 白血病抑制因子（leukaemia inhibitory factor，LIF）維持其未分化狀態。撤除LIF，ESC 懸浮培養形成擬胚體（embryoid body，EB），將培養第4 天的EB 置于含VEGF 的培養基中貼壁培養，誘導分化。采用免疫組織化學染色、流式細胞儀分析、DiI 標記的乙酰化低密度脂蛋白（1，1-dioctadecyl-3，3，3，3-tetramethylindocarbocyanine-labeled acetylated low density lipoprotein，DiI-Ac-LDL）攝取實驗以及透射電鏡檢查鑒定分化細胞的性質。 結果 分化產生的內皮樣細胞具有內皮細胞形態特征，能攝取DiI-Ac-LDL。ESC 誘導分化培養產生的第15 代細胞免疫組織化學染色呈Flk-1 和CD31 陽性；流式細胞儀檢測ESC 傳至9 代后CD31 陽性細胞gt; 90%；透射電鏡可見懷布爾- 帕拉德體及內皮細胞間緊密連接。 結論 采用簡單貼壁培養的方法，單獨使用VEGF 即可誘導ESC 分化為內皮樣細胞。誘導培養方法操作簡便，經濟實用，可為組織工程血管及細胞替代治療提供所需內皮樣細胞
目的 探討1，25（OH）2VD3在誘導小鼠胚胎干細胞（embryonic stem cells，ESCs）向成骨細胞分化過程中的重要作用。 方法 取2 d 齡昆明小白鼠顱蓋骨進行成骨細胞分離培養；參照并改進zur Nieden 等的方法制備擬胚體（embryoid bodies，EBs）。將EBs 根據培養液不同分為4 組：A 組：不含白血病抑制因子EBs 培養液；B 組：EBs 培養液中添加50 μg/mL 維生素C、50 mmol/L β- 磷酸甘油；C 組：培養液同B 組，另每孔接種5 × 104 個第3 代成骨細胞；D組與C 組相同，另添加4 × 10-9 mol/L 1，25（OH）2VD3。檢測ALP 活性，實時定量PCR 檢測骨鈣素mRNA 的表達，茜素紅S 染色進行礦化骨結節計數。 結果 EBs 貼壁后前5 d，各組ALP 表達未發生明顯變化，5 d 后ALP 表達逐漸增加，其中D 組在第20 天表達水平最高。光鏡下可見輪廓清晰大小不等的紅色結節。茜素紅S 染色測得A、B、C、D 組骨結節數分別為（20 ± 8）、（18 ± 5）、（31 ± 1）、（50 ± 1）個；實時定量PCR 測得A、B、C、D 組骨鈣素 mRNA 分別為10.18 ± 1.17、20.29 ± 1.03、18.84 ± 4.07、32.15 ± 5.23；C、D 組與A、B 組比較差異均有統計學意義（P lt; 0.05），A、B 組間比較差異無統計學意義（P gt; 0.05），C、D 組間比較差異有統計學意義（P lt; 0.05）。 結論 在濃度為4 × 10-9 mol/L 1，25（OH）2VD3和維生素C、β- 磷酸甘油共同作用下，有效促進了ESCs 源性成骨細胞的產生。