目的 制備NGF-胰島素復合凝膠并觀察其對大鼠深Ⅱ度燙傷創面愈合的影響。 方法以卡波姆980為基質，分別加入NGF 4 000 U、胰島素800 U，制備胰島素凝膠、NGF凝膠、NGF-胰島素復合凝膠。觀察NGF-胰島素復合凝膠性狀，并行體外藥物釋放檢測。75只SPF級雄性Wistar大鼠，體重200～250 g，隨機分為正常對照組（A組）、糖尿病對照組（B組）、局部胰島素凝膠治療組（C組）、局部NGF凝膠治療組（D組）、局部NGF-胰島素復合凝膠治療組（E組），每組15只。B、C、D、E組大鼠采用一次性腹腔注射鏈脲佐菌素（55 mg/kg）制備1型糖尿病模型，A組注射相同劑量檸檬酸鈉緩沖液。造模成功后，采用恒溫水浴箱法于各組大鼠背部制備深Ⅱ度燙傷模型。A、B組創面外敷空白凝膠基質，C、D、E組對應外敷胰島素凝膠、NGF凝膠、NGF-胰島素復合凝膠，每天換藥1次。燙傷后觀察各組大鼠存活情況，于3、7、11、15、21 d觀察創面愈合情況并計算創面愈合率，各時間點每組處死3只大鼠取皮膚全層標本行組織學及免疫組織化學染色觀察。 結果制備的NGF-胰島素復合凝膠清亮透明，保濕性及黏附性良好，易于涂抹及清洗。體外釋放檢測示NGF-胰島素復合凝膠釋藥時間可達24 h以上，且30 d內穩定性良好。各組大鼠均存活至實驗完成。燙傷后3 d各組創面無縮小，7、11、15、21 d時E組創面愈合率最高，B組最低，與其余各組比較以及E、B組間比較，差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。組織學觀察示各時間點E組肉芽組織和膠原纖維生長均優于其余各組。免疫組織化學染色示各組CD34、增殖細胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）均于3 d開始表達，且隨時間延長陽性細胞逐漸增多；各時間點E組微血管密度及PCNA最高，B組最低，與其余各組比較以及E、B組間比較差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。 結論局部應用NGF-胰島素復合凝膠可顯著促進大鼠深Ⅱ度燙傷創面愈合。
目的 表皮干細胞（epidermal stem cells，ESCs）能主動參與創面修復，促進創面再上皮化。建立糖尿病（diabetes mellitus，DM）大鼠模型，觀察DM 大鼠皮膚中ESCs 增殖分化相關蛋白——角蛋白19（keratin19，K19）、β1整合素（β1-integrin）、β- 連環素（β-catenin）及增殖細胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）的表達，探討DM大鼠皮膚創面難愈合的潛在機制。 方法 20 只雄性SD 大鼠，體重250 ～ 300 g，隨機分為DM 組和正常對照組，每組10 只。DM 組大鼠一次性腹腔注射鏈脲佐菌素（streptozocin，STZ，65 mg/kg）制備DM 大鼠模型，正常對照組不作處理。給藥后4 周取兩組大鼠胰腺組織，HE 染色觀察胰島組織學變化。取兩組動物背部全層皮膚，分離培養ESCs，取第2 代ESCs 行免疫細胞化學染色鑒定K19、β1-integrin、β-catenin 和PCNA 陽性表達，流式細胞儀檢測細胞周期，細胞接種1 周后檢測兩組細胞克隆形成率。 結果 DM 大鼠造模成功率為90%。DM 組胰腺HE 染色可見胰島細胞數明顯減少，出現變性壞死；正常對照組胰島細胞結構清楚，無變性壞死。DM 組大鼠ESCs 的K19、β1-integrin、β-catenin 及PCNA 陽性表達分別為82.63 ± 14.77、21.59 ± 4.71、76.49 ± 6.58、90.77 ± 12.44，均低于正常對照組的151.24 ± 42.83、54.48 ± 17.43、116.39 ± 9.26、110.62 ± 20.67，差異均有統計學意義（P lt; 0.01）。DM 組ESCs 克隆形成率為6.43% ± 1.01%，明顯低于正常對照組的11.37% ± 1.62%，差異有統計學意義（P lt; 0.01）。流式細胞儀分析顯示DM 組88.89% 細胞處于G0/G1 期，凋亡細胞數為3.98%；正常對照組91.50% 細胞處于G0/ G1 期，無凋亡細胞。 結論 通過腹腔一次性注射65 mg/kg STZ 可有效建立DM 大鼠模型。DM 大鼠ESCs 數量少、增殖分化能力低可能是DM 創面難愈合的重要機制之一。
目的探尋一種簡便、高效的糖尿病大鼠主動脈平滑肌細胞體外原代培養的方法，建立長久穩定的體外糖尿病血管平滑肌細胞模型，為研究糖尿病血管慢性病變奠定基礎。 方法采用鏈脲佐菌素腹腔注射加高脂高糖飼養自制糖尿病Wister大鼠模型20只，采用改良酶消化法體外培養主動脈平滑肌細胞。 結果成功建立糖尿病大鼠模型，用改良酶消化法體外培養的血管平滑肌細胞傳代生長快，細胞存活率達96%，能滿足進行體外細胞實驗要求。 結論與傳統方法相比，改良酶消化法簡單、經濟、成活率高。