目的評估淫羊藿苷對低濃度糖皮質激素誘導的骨微血管內皮細胞(bone microvascular endothelial cells,BMECs)自噬和外泌體分泌的影響。方法從行全髖關節置換術切取的股骨頭中分離 BMECs,用一系列低濃度梯度氫化可的松(0、0.03、0.06、0.10 mg/mL)干預(設為 A、B、C、D 組),在此基礎上再用 5×10?5 mol/L 淫羊藿苷干預(設為 A1、B1、C1、D1 組),24 h 后采用 Western blot 檢測自噬相關蛋白微管相關蛋白輕鏈 3B(microtubule-associated protein 1 light chain 3B,LC3B)及死骨片 1(p62)的表達。從經淫羊藿苷處理(干預組)和未經淫羊藿苷處理(未干預組)的 BMECs 中提取外泌體,納米顆粒跟蹤分析技術檢測其直徑和濃度,BCA 法檢測外泌體總蛋白質含量,Western blot 檢測外泌體 CD9、CD81、TGF-β1 和 VEGFA 蛋白的表達。進一步將 BMECs 分為 3 組,實驗組和對照組分別分離經或未經淫羊藿苷處理的 BMECs 分泌的外泌體,與 BMECs 共培養;空白對照組為單純 BMECs。氫化可的松處理后,采用 Western blot 檢測 LC3B 和 p62 表達,劃痕實驗檢測細胞遷移能力,并觀察血管生成能力。結果隨氫化可的松濃度升高,各組 LC3B-Ⅱ蛋白相對表達量逐漸增加,p62 蛋白相對表達量減少,各組間差異均有統計學意義(P<0.01);相同激素濃度下,淫羊藿苷干預后,LC3B-Ⅱ蛋白相對表達量減少,p62 蛋白相對表達量增加(P<0.01)。干預組外泌體濃度顯著高于未干預組(t=?10.191,P=0.001);兩組外泌體直徑和總蛋白質含量比較差異均無統計學意義(P>0.05)。未干預組和干預組 CD9 和 CD81 蛋白均高度表達;干預組 VEGFA/CD9 和 TGF-β1/CD9 蛋白相對表達量比值均顯著高于未干預組(P<0.01)。外泌體共培養后,空白對照組、對照組和實驗組中 p62 蛋白相對表達量呈遞增趨勢,LC3B-Ⅱ蛋白相對表達量呈遞減趨勢,各組間比較差異均有統計學意義(P<0.05)。氫化可的松處理 12、24 h 時,對照組和實驗組劃痕閉合率明顯高于空白對照組(P<0.05),實驗組明顯高于對照組(P<0.05);氫化可的松處理 4、8 h 時,實驗組和對照組管腔數、出芽數和小管分支長度均顯著大于空白對照組(P<0.05);實驗組小管分支長度和管腔數顯著大于對照組(P<0.05)。結論淫羊藿苷及 BMECs 產生的外泌體能改善低濃度激素誘導的 BMECs 自噬,對內皮細胞起到保護作用。
目的 探討暫時性骨質疏松癥(transient osteoporosis of the hip,TOH)與股骨頭壞死繼發骨髓水腫在臨床癥狀及影像學上的差異。 方法 對2006 年1 月- 2008 年2 月收治的5 例(5 髖)TOH 及63 例(67 髖)股骨頭壞死繼發骨髓水腫患者分析其病因、發病誘因、疼痛程度、持續時間及病情轉歸等方面的差異,并分析X 線片、MRI 和ECT改變的異同點。5 例TOH 患者,男1 例,女4 例;年齡29 ~ 42 歲。63 例(67 髖)股骨頭壞死繼發骨髓水腫患者,男53 例,女10 例;年齡18 ~ 70 歲;根據ARCO 分期標準,Ⅱ期23 髖,Ⅲ期43 髖,Ⅳ期1 髖。 結果 TOH 與股骨頭壞死繼發骨髓水腫患者在發病誘因、疼痛程度、關節積液和ECT 改變上無差異。TOH 患者發病前無股骨頭壞死相關病因;發病前無不適癥狀;2 髖X 線片表現為密度降低;MRI 水腫信號改變在股骨頭頸的上方或整個股骨頭;治療后5 ~ 11 個月疼痛消失后無殘留癥狀。65 髖股骨頭壞死繼發骨髓水腫患者有股骨頭壞死的相關誘因;10 髖表現為疼痛加重;59 髖X 線片上有硬化改變;MRI 水腫信號改變在股骨頭壞死灶的外側,水腫信號消退后仍有輕度疼痛。 結論 TOH 與股骨頭壞死繼發骨髓水腫在臨床表現、X 線片及MRI 圖像改變上存在差異。