目的 探討生存素（survivin）反義核酸（anti-pcDNA3-svv）對胃癌細胞SGC7901的凋亡誘導，對泰索帝的化療增敏作用及降低多藥耐藥基因-1（MDR-1）表達的作用。方法 采用脂質體法轉染SGC7901細胞,并篩選陽性克隆，Western blot檢測survivin蛋白的表達，RT-PCR檢測 MDR-1 mRNA的表達，透射電鏡觀察轉染后對SGC7901細胞的凋亡誘導作用，MTT法檢測轉染細胞對泰索帝的敏感性。結果 survivin蛋白的表達在重組質粒組比空質粒組和空白對照組明顯降低（P＜0.05），重組質粒組MDR-1 mRNA表達也較其他2組明顯降低（P＜0.01）； 透射電鏡下可見重組質粒組細胞呈凋亡晚期變化，其MDR指數為0.196±0.013，明顯低于空質粒組的2.958±0.024和空白對照組的3.126±0.019（P＜0.01）； 重組質粒組對泰索帝的IC50值為（16.7±1.98） ng/ml,也明顯低于空質粒組的（49.9±1.21） ng/ml和空白對照組的(55.7±1.89) ng/ml（P＜0.01）。結論 survivin反義核酸可誘導SGC7901細胞凋亡，增強泰索帝化療敏感性，可能逆轉耐藥。
目的 探討生存素（survivin）的反義寡脫氧核苷酸(ASODNs)抑制survivin基因表達對移植靜脈內膜增生的抑制作用。方法 Wistar大鼠60只，建立自體靜脈移植模型，然后隨機均分為對照組、survivin ASODNs 50 μg和200 μg組、正義寡脫氧核苷酸組(ODNs組)及Lipofectin+pluronic組共5組，施加不同的處理因素，分別在靜脈移植術后7和14 d取材。組織形態學方法比較移植靜脈內膜增生程度，半定量RT-PCR法檢測survivin基因mRNA的表達，Western blot檢測survivin基因的蛋白產物表達，免疫組化法檢測survivin及增殖細胞核抗原(PCNA)的表達，TUNEL檢測血管平滑肌細胞(VSMC)凋亡的變化。結果 對照組、ODNs組和Lipofectin+pluronic組移植術后7 d、14 d移植靜脈內膜增生明顯，但3組間差異無統計學意義(Pgt;0.05)，局部轉染50 μg survivin ASODNs能明顯抑制其內膜增生(P＜0.05)，200 μg組受抑制程度更明顯(P＜0.05)。對照組survivin mRNA及蛋白產物表達顯著增加，而survivin ASODNs組卻顯著減少(P＜0.05)，VSMC中PCNA表達也同時減少(P＜0.05)，而VSMC凋亡明顯增加(P＜0.05)。 結論 survivin ASODNs可顯著抑制移植靜脈內膜增生，其作用可能是通過抑制survivin的基因及蛋白產物表達，從而減輕VSMC增殖，促進其凋亡而實現的。
為了研究生存素基因負性突變體生存素-D53A(SVV-D53A)對人肺腺癌SPC-A1移植瘤的治療作用, 并探討其作用機制, 我們在體外實驗中使用SVV-D53A質粒轉染人肺腺癌SPC-A1細胞, 蛋白免疫印跡檢測生存素突變體表達, 同時通過流式細胞檢測細胞凋亡情況。在體內實驗中, 裸鼠皮下接種人肺腺癌SPC-A1細胞建立肺癌移植瘤模型, 使用陽離子脂質體包裹SVV-D53A質粒進行治療。治療結束后免疫組化檢測各組腫瘤標本細胞增殖, 末端脫氧核苷酸轉移酶脫氧尿苷三磷酸切口末端標記(TUNEL)檢測腫瘤細胞凋亡。與對照組相比, SVV-D53A質粒在體外顯著誘導SPC-A1細胞凋亡, SVV-D53A組裸鼠皮下移植瘤體積減小, 細胞增殖減弱, 大量腫瘤細胞發生凋亡。研究結果表明SVV-D53A的表達在體外和體內均能夠顯著抑制人肺腺癌SPC-A1細胞的生長, 其作用機制主要為誘導腫瘤細胞凋亡。
目的 利用小干擾 RNA（small interfering RNA，siRNA）片段沉默卵巢癌細胞人垂體瘤轉化基因 1（human pituitary tumor-transforming gene 1，hPTTG1）基因表達，探討其抑制細胞凋亡的分子機制。 方法 通過脂質體將 hPTTG1 siRNA 轉染 A2780 細胞（hPTTG1 siRNA 干擾組），并設立正常組和陰性對照組，轉染 48 h 后進行檢測。采用實時熒光定量聚合酶鏈反應檢測轉染前后 hPTTG1 mRNA 表達水平的變化，采用逆轉錄-聚合酶鏈反應和蛋白質印跡法檢測 survivin mRNA 和蛋白表達水平，采用 DNA 梯帶電泳法和碘化丙啶單染法分析細胞凋亡，采用比色法測定胱天蛋白酶（caspase）-3 活性。 結果 hPTTG1 siRNA 可抑制 A2780 細胞內 hPTTG1 mRNA 表達；hPTTG1 siRNA 干擾組可見典型的細胞凋亡階梯狀電泳，流式細胞儀檢測該組細胞凋亡率為（17.53±2.17）%，明顯高于正常組和陰性對照組[（8.97±1.56）%、（9.64±1.31）%]，差異有統計學意義（P<0.05）；hPTTG1 干擾后 survivin mRNA 和蛋白表達均下調，caspase-3 活性增強。 結論 hPTTG1 siRNA 可下調 survivin 基因表達，活化 caspase-3，導致 A2780 細胞凋亡，其可成為卵巢癌基因治療的潛在靶點。