目的 研究癌胚抗原(CEA)-紅細胞生成素(EPO)質粒的構建及其誘導的造血干細胞定向生成紅細胞疫苗的抗結腸癌效果。 方法 構建 CEA-EPO 重組質粒,同時構建空載體質粒、CEA 質粒和 EPO 質粒。用含抗體 CD117 磁珠分離純化和收集小鼠骨髓造血干細胞,用重組腺病毒法將 CEA-EPO 基因體外轉染到造血干細胞內,檢測 CEA 和 EPO 基因及其蛋白的表達;將疫苗注入小鼠體內,進行擴增,使造血干細胞定向生成攜帶 CEA-EPO 基因的紅細胞,經過提取和純化獲得 CEA-EPO 基因共轉染紅細胞疫苗,再進行基因共轉染紅細胞疫苗的體外和體內實驗。實驗分組為空載體組、CEA 組、EPO 組和 CEA-EPO 組。 結果 成功收集造血干細胞,流式細胞儀分析結果表明:分選后的陽性管標本純化后的 CD117 陽性細胞比例較純化前升高,差異有統計學意義(P<0.01);CEA-EPO mRNA 及其蛋白表達的檢測結果表明:造血干細胞體外轉染 CEA-EPO 基因成功,獲得 CEA-EPO 基因共轉染紅細胞疫苗;采用細胞紅系相關標志抗體 GPA 和 CD71 標記后,流式細胞儀結果證實紅細胞疫苗培養成功;相關疫苗激活的單核細胞對結腸癌細胞株 CT26 細胞殺傷作用的實驗結果表明:在比例為 40∶1 時,CEA-EPO 組的殺傷作用強于空載體組、CEA 組和 EPO 組(P<0.05);體內試驗的成瘤性研究結果表明:處理后 2 周 CEA-EPO 組的腫瘤體積和死亡率小于或低于其他 3 組(P<0.05),且 CEA-EPO 組的生存時間長于其他 3 組(P<0.05)。 結論 攜帶 CEA-EPO 基因腫瘤抗原的紅細胞疫苗對結腸癌有明顯的抗腫瘤作用,既可以誘導造血干細胞定向分化成紅細胞疫苗,又可以合成攜帶腫瘤抗原的紅細胞疫苗,有望發展成為臨床治療結腸癌的重要疫苗。
目的 探討應用經肛“瓦”形直腸脫垂吻合器切除術治療直腸脫垂的療效。 方法 回顧性分析 2013 年 12 月至 2015 年 8 月期間于武漢大學人民醫院胃腸外科接受經肛“瓦”形直腸脫垂吻合器切除術治療的 31 例直腸脫垂患者的臨床資料。手術在靜吸復合全身麻醉和(或)硬膜外麻醉下完成,使用直線切割吻合器同時切開 2~4 個點位的脫垂直腸腸壁,形成數個“瓦”形直腸瓣,再用弧形切割吻合器完成吻合。 結果 31 例直腸脫垂患者中男 8 例,女 23 例;年齡(65.8±3.2)歲。Ⅱ度直腸脫垂 14 例,Ⅲ度直腸脫垂 17 例,均無其他盆腔臟器脫垂。中位病程 5.8 年。術后 31 例患者隨訪 0.5~7.0 個月,其中 24 例痊愈,7 例好轉。Ⅱ度直腸脫垂切開 4 個點位和Ⅲ度直腸脫垂切開 3 個點位者所切除脫垂標本質量最重,明顯重于其他點位數切開者(P<0.05),并且發現Ⅱ度直腸脫垂患者切開 4 個點位者沒有出現復發,其他點位數切開者則出現 2 例輕度復發;Ⅲ度直腸脫垂患者切開 3 個點位者沒有出現復發,其他點位數切開者則出現 5 例復發。 結論 本組有限病例的初步研究結果提示,經肛“瓦”形直腸脫垂吻合器切除術安全、有效,其最關鍵的步驟在于使用直線切割吻合器同時切開 2~4 個點位的脫垂直腸腸壁,形成數個“瓦”形直腸瓣,再用弧形切割吻合器完成吻合,其切開點位數目與手術療效有關。