汶川地震醫療救援中，四川大學華西第二醫院科學指揮，迅速確定在此次地震醫療救援中的定位，確立并提出“保證院內病人安全，配合華西醫院主戰場，集合主力資源主動奔赴災區救援”的總方針。醫院管理模式迅速從常態進入雙軌制應急狀態，科學合理配置和調動資源，保證抗震救災高效、有力地進行。截至6 月2 日，醫院先后派出12批醫療隊、共148人赴北川、什邡、都江堰等重災區參與現場救治；共接診地震傷員329例，其中住院132例，無一例傷病員死亡。
在兒童過敏性哮喘治療方法中，特異性免疫治療是目前唯一針對支氣管哮喘的對因治療，舌下特異性免疫療法（sublingual immunotherapy，SLIT）是近年來提倡的針對過敏性哮喘的新療法，與傳統的皮下特異性免疫療法相比，SLIT 對兒童過敏性哮喘患者具有更高的安全性且易于管理，SLIT 日益受到關注，并引發了大量的研究。SLIT 的作用機制雖已有一些研究，但尚不十分明確，大多數的研究是以臨床研究為主。近年來，大量國內外研究表明，SLIT 對兒童過敏性哮喘治療安全、有效，無嚴重不良事件發生，且可以減少過敏的發生頻率。但 SLIT 臨床應用中仍有很多問題需進一步研究解決，如其確切的作用機制、準確的劑量、是否應該減少 SLIT 藥物的用量以及可否用來進行預防等。該文就其研究進展進行了綜述。
目的 探討在體神經元缺氧缺血條件下缺氧誘導因子1α（hypoxia inducible factor 1α，HIF-1α）蛋白的表達及三磷酸肌醇激酶（phosphoinositid 3-kinase/Akt，PI3K/Akt）信號通路的激活，推測PI3K/Akt 信號通路與神經元HIF-1α 表達調節的關系，以期更確切地闡明PI3K/Akt 在發育期腦缺氧缺血性損傷（hypoxia ischemia brain damage，HIBD）神經元HIF-1α 表達中的作用。 方法 10 d 齡SD 大鼠56 只，分為正常對照組（n=12）、假手術組（n=12）、實驗組（n=24）、wortmannin 干預組（n=4）和溶劑干預組（n=4）。實驗組在乙醚麻醉下行右側頸總動脈結扎，氮氧混合氣（92% N2、8% O2）缺氧2.5 h，即為HIBD 模型；假手術組不結扎頸總動脈，不作缺氧處理；正常對照組不作任何處理。wortmannin 干預組和溶劑干預組分別在側腦室內注射wortmannin 和DMSO、PBS 3 μL，30 min 后制備HIBD 模型。分別于建模后4、8 及24 h處死動物取腦組織，應用免疫組織化學法檢測HIF-1α、Akt 蛋白的分布和表達，Western blot 檢測HIF-1α、Akt 及p-Akt 蛋白含量。 結 果 實驗組HIF-1α 蛋白表達在術后4 h 明顯升高，8 h 達高峰，24 h 后下降；p-Akt 蛋白于術后4 h 明顯升高，8 h 后下降。正常對照組各時間點HIF-1α 和p-Akt 均有極少量弱陽性表達。實驗組各時間點HIF-1α 蛋白表達明顯高于正常對照組，差異有統計學意義（P lt; 0.01） ；實驗組p-Akt 于4 h 和8 h 明顯高于正常對照組，差異有統計學意義（P lt; 0.05）。Akt 蛋白表達隨術后時間的延長無明顯變化，與正常對照組比較差異無統計學意義（P gt; 0.05）。術后4 h wortmannin 干預組的HIF-1α 蛋白的表達明顯下降，與溶劑干預組及實驗組比較差異有統計學意義（P lt; 0.01）。 結論 發育期HIBD 時，可激活PI3K/Akt 信號通路，并誘導HIF-1α 表達增加，可針對PI3K/Akt 信號通路和HIF-1α 尋找新生兒HIBD新的治療靶點。
目的 探討缺氧缺血性腦損傷(hypoxia ischemia brain damage, HIBD)時缺氧誘導因子1α（hypoxia inducible factor 1α, HIF 1α）表達與神經元凋亡的相關性，探索HIF-1α在神經元凋亡中的作用及對損傷神經修復重建的意義。方法 新生10 d SD大鼠40只，隨機分為對照組和實驗組，每組20只。實驗組在乙醚麻醉下行右側頸總動脈結扎，氮氧混合氣（92%氮氣、8%氧氣 ）缺氧2.5h，即為HIBD模型；對照組分離頸總動脈，不結扎，不作缺氧處理。分別于術后4、8、24、48及72h處死兩組動物取腦組織，應用免疫組織化學法檢測HIF-1α、活化的半胱天冬氨酸酶3（cleaved caspase 3，CC3）的表達，應用TUNEL檢測凋亡細胞。結果 實驗組HIF-1α蛋白表達在術后4h明顯升高，8 h達高峰，24h后下降；CC3蛋白于術后4 h開始表達，8 h有少量表達，24h明顯升高，48h及72h維持較高 水平。對照組各時間點HIF-1α和CC3均有極少量弱陽性表達。實驗組HIF-1α和CC3蛋白表達明顯高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.01）。TUNEL染色顯示實驗組術后隨時間延長陽性細胞數逐漸增多，72h達高峰；但對照組TUNEL陽性細胞極少。兩組比較差 異有統計學意義(P＜0.01)。結論 HIF-1α與促凋亡蛋白CC3表 達趨勢相反， HIF-1α對新生兒HIBD神經元可能具有保護作用，可望對缺氧缺血神經的修復重建發揮一定作用。
目的探討不同營養模式對宮內發育遲緩幼鼠胰島素樣生長因子及受體表達的影響。 方法用母鼠全程饑餓法建立宮內發育遲緩（IUGR）動物模型，IUGR新生雌鼠隨機分為4組，新生幼鼠母乳喂養，各組分別給予母鼠下述相應飲食飼料喂養3周至斷乳：①IUGR對照組給予常規飲食；② IUGR高糖飲食組（A組）；③ IUGR高蛋白飲食組（B組）；④ IUGR高脂飲食組（C組）。各組幼鼠在3周哺乳期間母鼠分別攝取上述飼料。各組幼鼠斷乳后同樣分別攝取上述飼料。另以正常母鼠所生正常新生雌鼠為正常對照組（C/N組）。生后母乳喂養至3周斷乳，母鼠及斷乳后幼鼠均給予常規飲食喂養。各組幼鼠分別取肝、肺進行免疫組織化學染色檢測和胰腺組織進行蘇木精-伊紅染色檢測。 結果幼鼠多肽糖金屬蛋白酶12（ADAM12）的測定結果各個月之間均無統計學意義（P＞0.05）。幼鼠孕期相關血漿蛋白酶A（PAPP-A）的測定結果在各組幼鼠的第1個月有統計學意義（P＜0.05），但在第2、3、4個月無統計學意義（P＞0.05）。幼鼠Toll樣受體（TLR-4）的測定結果各個月之間均無統計學意義（P＞0.05）。幼鼠胰腺組織結果在幼鼠的第1個月有統計學意義（P＜0.05），但在第2、3、4個月無統計學意義（P＞0.05）。 結論ADAM12和PAPP-A的表達量或許與幼鼠的追趕生長密切相關；盡管TLR-4的檢測結果在統計學上無明顯意義，但高糖飲食組和高脂飲食組胰腺發生炎癥的可能性較大。
目的 探討缺氧缺血性腦損傷（hypoxia ischemia brain damage，HIBD）時端粒酶逆轉錄酶（telomerase reverse transcriptase，TERT）的表達及神經元凋亡情況。 方法 42 只清潔級7 日齡SD 大鼠，雌雄不限，體重12 ～ 18 g，隨機分為假手術組（6 只）和缺氧缺血組（36 只）。缺氧缺血組實驗動物分離右側頸總動脈，雙線結扎，縫合皮下組織及皮膚，并低氧處理，制備HIBD 動物模型；假手術組僅將縫線從右側頸總動脈下穿過，不結扎，縫合切口，不作低氧處理。分別于術后4、8、12、24、48 及72 h 處死大鼠取腦組織，采用免疫組織化學法檢測TERT 和CC3 蛋白表達，采用TUNEL 染色檢測細胞凋亡。 結果 缺氧缺血組TERT 蛋白表達于術后4 h 開始增加，24 ～ 48 h 達高峰，之后略有下降；CC3 蛋白表達于術后4 h 開始增加，24 h 明顯升高，48 h 及72 h 維持較高水平。假手術組TERT 和CC3 僅有少量弱陽性表達。缺氧缺血組術后各時間點TERT 及CC3 蛋白表達與假手術組比較，差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。TUNEL 染色顯示，缺氧缺血組術后4 ～ 8 h 神經細胞凋亡開始增多，24 ～ 48 h 達高峰，72 h 仍維持在較高水平；假手術組偶見陽性細胞。缺氧缺血組術后各時間點陽性細胞計數與假手術組比較，差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。 結論 缺氧缺血能誘導腦組織中TERT 表達增加，TERT 可能對神經細胞凋亡起一定保護作用。
目的 探討缺氧誘導因子1α（hypoxia-inducible factor 1α，HIF-1α）及細胞外調節蛋白激酶1/2（extracellular signal-regulated kinase1/2，ERK1/2）在體外培養的胎鼠大腦皮質神經元缺氧缺血再灌注后變化的趨勢及其相互關系。 方法 取15 只16 ～ 18 d 孕齡SD 大鼠的大腦皮層，進行皮質神經元原代培養，取培養5 d 的原代神經元建立氧糖剝離（oxygen and glucose deprivation，OGD）模型。實驗分為實驗組1：OGD 模型制備后，更換培養液為含葡萄糖的神經元完全培養基，以形成再灌注；取再灌注0、2、4、8、12、24 h 觀察；對照組1：正常培養液孵育的神經元；實驗組2：U0126預處理神經元后制備OGD 模型，于再灌注后4、8 h 觀察；對照組2：DMSO 預處理神經元后制備OGD 模型，余同實驗組2。應用Western blot 定量測定各組HIF-1α、VEGF 蛋白及ERK1/2、p-ERK1/2 的表達變化，SABC 免疫細胞化學法檢測p-ERK1/2、HIF-1α 蛋白表達及分布情況。 結果 培養5 d 的皮質神經元突起間互相連接成網狀。實驗組1 HIF-1α、VEGF 蛋白表達逐漸升高，8 h 表達量最高，12 h 后逐漸下降，與對照組1 比較差異有統計學意義（P lt; 0.05）。各時間點實驗組1 與對照組1 ERK1/2 蛋白表達無明顯差異（P gt; 0.05）。實驗組1 p-ERK1/2 蛋白表達在2 h 時開始增加，4 h 達高峰，8 h 開始下降，與對照組1 比較差異有統計學意義（P lt; 0.01）；實驗組2 p-ERK1/2 蛋白表達下降，HIF-1α 及VEGF 蛋白表達也隨之下調，與對照組2 比較差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。各時間點實驗組2 和對照組2 ERK1/2 蛋白表達差異無統計學意義（P gt; 0.05）。免疫細胞化學染色顯示神經元黃棕色著色減弱，p-ERK1/2、HIF-1α 表達下降。 結論 HIF-1α及其靶基因VEGF 蛋白在OGD 再灌注后的皮質神經元表達具有一定時間規律性，抑制ERK1/2 信號通路后這兩個蛋白表達均下降，提示該通路在神經元OGD 后誘導HIF-1α 及VEGF 的調控中起重要作用。
建立一種經濟高效的大鼠胰島細胞分離純化方法，為胰腺的修復重建奠定實驗基礎。 方 法 成年雄性SD 大鼠25 只，體重230 ～ 380 g，共進行5 次實驗，每5 只大鼠一組進行消化和分離。采用醫用復方氯化鈉注射液（compound sodium chloride injection，CSCI）經胰總管灌注大鼠胰腺，0.5 mg/mL Ⅴ型膠原酶消化后，分別采用濃度為27.0%、23.0%、20.5%和11.0%的 Ficoll 400 形成不連續密度梯度介質，離心純化胰島細胞。雙硫腙（dithizon，DTZ）染色行純化前后胰島細胞計數和純度檢測；熒光染料碘化丙啶（propidium iodide，PI）和二乙酸熒光素（fluorescein diacetate，FDA）儲存液雙染色鑒定胰島細胞活性；RPMI1640 培養基培養3 d 后，分別用濃度為2.8 mmol/L 的低糖和25.0 mmol/L 的高糖行葡萄糖刺激胰島素釋放實驗檢測胰島細胞功能。 結果 5 次實驗胰島細胞消化時間為（13.8 ± 1.6） min。DTZ 染色鑒定純化前胰島細胞數為（5 626 ± 422）個，純化后為（2 914 ± 485）個，純化后的胰島細胞數較純化前明顯減少（P lt; 0.01），回收率51.6% ± 6.0%，每個胰腺收獲胰島細胞數為（583 ± 97）個/ 只。5 次分離獲得的胰島細胞純度為90.2% ± 3.4%，活性為81.6% ± 7.0%。培養3 d 后，葡萄糖刺激胰島素釋放實驗顯示：低糖環境下胰島素水平為（39.7 ± 7.5）EU/L，高糖環境為（116.1 ± 17.4）EU/L，比較差異有統計學意義（P lt; 0.01）；刺激指數為3.0 ± 0.4。 結 論 采用CSCI 作為大鼠胰島細胞分離純化的主要液體試劑，并采用低濃度Ⅴ型膠原酶消化，不僅可降低實驗成本，同時可獲得高質量的胰島細胞。