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目的 探討應用生長分化因子5(growth differentiation factor 5,GDF-5)誘導脂肪干細胞(adiposederived stem cells,ADSCs)成軟骨細胞分化的可能性及效果。 方法 3 月齡清潔級健康日本大耳白兔6 只,雌雄不限,體重2 ~ 3 kg。取兔皮下脂肪4 ~ 6 mL,采用膠原酶消化離心貼壁培養法培養ADSCs,取第3 代細胞進行實驗。波形蛋白免疫組織化學和CD44、CD49d、CD106 免疫熒光染色鑒定ADSCs。調整細胞密度為1 × 106 個/mL,分別用普通細胞培養液以及含0、10 、100 ng/mL GDF-5 的軟骨細胞誘導液誘導培養。倒置相差顯微鏡觀察細胞形態變化;MTT 法檢測細胞增殖情況;RT-PCR 檢測誘導細胞Col Ⅱ和蛋白多糖mRNA 的表達;免疫組織化學、阿利新藍染色、甲苯胺藍染色和Western blot 法檢測誘導細胞Col Ⅱ和蛋白多糖表達。 結果 ADSCs 呈小圓形、梭形、多角形分布,表面抗原標志CD44、CD49d 呈陽性表達,CD106 和波形蛋白呈陰性表達。100 ng/mL GDF-5 誘導的ADSCs 呈圓形或類圓形,且細胞增殖旺盛。普通培養液和0、10、100 ng/mL GDF-5 成軟骨細胞誘導培養后7 d,Col Ⅱ、蛋白多糖 mRNA 表達均呈濃度依賴性增加,除0、10 ng/mL GDF-5 兩組間差異無統計學意義(P gt; 0.05)外,其余各組差異均有統計學意義(P lt; 0.05);100 ng/ mL GDF-5 誘導培養14 d,Col Ⅱ、蛋白多糖mRNA 以及蛋白表達達高峰,阿利新藍、甲苯胺藍染色以及Col Ⅱ免疫組織化學染色均呈陽性。 結論 經一定濃度的GDF-5 誘導的ADSCs,Col Ⅱ和蛋白多糖表達明顯增加,具有軟骨細胞的部分生物學功能。
目的 總結一期前路病灶清除、椎體間植骨及前路內固定治療頸椎及頸胸段脊柱結核的臨床療效,探討重建脊柱穩定性的必要性和安全性。 方法 2002 年4 月- 2006 年3 月,采用一期前路病灶清除、椎體間植骨及前路內固定治療13 例頸椎及頸胸段脊柱結核患者。男8 例,女5 例;年齡21 ~ 58 歲。病程1 ~ 7 個月,平均4 個月。頸椎結核10 例,頸胸段結核3 例。術前X 線片、CT、MRI 檢查示病變部位為:C3、4 1 例,C5 2 例,C5、6 3 例,C6、7 4 例,C7、T12 例,C7 ~ T2 1 例。后凸Cobb 角為20 ~ 50°,平均35.7°。神經功能ASIA 分級:B 級1 例,C 級4 例,D 級6 例,E 級2 例。術前血沉34 ~ 78 mm/h,平均42 mm/h。 結果 術后患者均獲隨訪,隨訪時間9 ~ 34 個月,平均14 個月。均未出現傷口深部感染或竇道形成,平均1.5 個月血沉降至20 mm/h 以下。患者植骨均完全融合,融合時間3 ~ 5 個月,平均3.4 個月。術后后凸Cobb 角17 ~ 39°,平均29.3°;隨訪14 個月時為9 ~ 21°,平均14.5°。神經功能除1 例B 級恢復至D 級外,余均達E級。 結論 一期前路病灶清除同期植骨內固定治療頸椎及頸胸段脊柱結核能徹底清除病灶、防止復發、矯正畸形、重建脊柱穩定性,促進脊柱植骨融合,提高脊柱結核的治愈率。