目的探討柚皮素對人肺成纖維細胞生成血管內皮生長因子(VEGF)的影響,并研究其可能的機制。 方法培養人胚肺成纖維細胞,分為對照組、香煙提取物(CSE)組和柚皮素干預組。柚皮素干預組分別與低、中、高劑量的柚皮素共孵育2 h后,與CSE組一起加入CSE,調整終濃度柚皮素5 μmol/L、10 μmol/L和20 μmol/L,CSE終濃度5%。培養24、48及72 h后,ELISA法測定各組VEGF含量,采用Western blot法觀察各組Smad3及磷酸化Smad3(p-Smad3)的表達情況。 結果在人胚肺成纖維細胞中,柚皮素能抑制CSE誘導的血管內皮生長因子生成。CSE能顯著提高p-Smad3水平,而添加了柚皮素后p-Smad3明顯減少,并隨柚皮素劑量的增加而p-Smad3水平愈低。 結論柚皮素能夠抑制Smad3的磷酸化,從而抑制CSE誘導的血管內皮生長因子的分泌。
目的觀察柚皮素對人支氣管上皮細胞趨化因子生成的影響, 并研究其可能的機制。 方法培養人支氣管上皮細胞, 分為對照組、瘤壞死因子α(TNF-α)組、柚皮素低劑量組、柚皮素中劑量組和柚皮素高劑量組。柚皮素干預組分別與2.5、5和10μmol/L的柚皮素共孵育2 h后, 與TNF-α組一起加入TNF-α進行刺激。24 h后用ELISA方法檢測各組細胞上清液中Eotaxin及RANTES的表達, Western blot法檢測細胞中IκBα含量; 另外在反應30 min時, 用EMSA法檢測核轉錄因子κB(NF-κB)的DNA結合活性。 結果TNF-α組的趨化因子水平較對照組明顯增高。隨著柚皮素干預劑量的增大, 趨化因子水平明顯降低。柚皮素能抑制IκBα降解, 并能降低NF-κB的DNA結合活性。 結論柚皮素可能通過抑制NF-κB的活性來影響人支氣管上皮炎性趨化因子的生成。