目的 總結可吸收線皮下隱性減張縫合脛腓骨骨折切開復位內固定術后切口的效果。 方法 2003 年10 月－ 2008 年10 月，對203 例220 側脛腓骨骨折患者切開復位內固定術后切口分別使用可吸收線皮下隱性減張縫合（試驗組，102 例112 側）及普通間斷縫合（對照組，101 例108 側）。男179 例，女24 例；年齡3 ～ 75 歲，中位年齡36 歲。交通傷170 例，重物砸傷21 例，高處墜落傷12 例。單側186 例，雙側17 例。閉合骨折127 側；開放骨折93 側，按Gustilo 分型：Ⅰ型38 側，Ⅱ型45 側，Ⅲ A 型10 側。骨折部位：脛骨上段55 側，中段126 側，下段39 側。X 線片示橫形骨折65 側，斜形骨折53 側，螺旋形骨折45 側，粉粹性骨折57 側。骨折肢體無血管、神經損傷，無骨筋膜室綜合征和擠壓綜合征等。受傷至手術時間2 h ～ 7 d，平均2 d。220 側骨折中45 側采用髓內釘內固定，其余均采用鋼板螺釘內固定。 結 果 對照組術后切口70 例（69.3%）Ⅰ期愈合；31 例（30.7%）Ⅱ期愈合，經重新清創換藥或植皮后愈合。試驗組93 例（91.2%）Ⅰ期愈合；9 例（8.8%）Ⅱ期愈合，經換藥后愈合。兩組術后切口Ⅰ期愈合率差異有統計學意義（P lt; 0.05）。患者均獲隨訪，隨訪時間6 個月～ 2 年，平均9 個月。試驗組Ⅰ期愈合患者無切口并發癥，切口瘢痕較小；3 例Ⅱ期愈合患者瘢痕增寬。對照組Ⅰ期愈合患者切口瘢痕較試驗組明顯，有蜈蚣樣瘢痕；Ⅱ期愈合患者瘢痕均較明顯。 結論 可吸收線皮下隱性減張縫合解決了脛腓骨骨折切開復位內固定術后切口皮膚張力大、難以縫合的問題，降低了術后發生皮膚壞死及需要游離植皮或皮瓣移位修復的可能，有利于術后切口愈合。
目的探索氧化應激活化RAW264.7巨噬細胞對MC3T3-E1成骨細胞遷移、增殖及成骨基因表達的影響。 方法取MC3T3-E1細胞系及RAW264.7細胞系，分別培養傳至第7代進行實驗。利用不同濃度（0、25、50、100 μmol/L）H2O2刺激RAW264.7細胞，MTS檢測培養1、3、6 h后細胞增殖率，采用超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）檢測試劑盒檢測培養1 h時細胞內SOD含量，篩選H2O2引起RAW264.7細胞氧化應激的最佳濃度和作用時間，并對應收集RAW264.7細胞（加或不加H2O2處理）24 h上清液。取第7代MC3T3-E1細胞，分別以100 μL無血清DMEM培養基（A組）、未氧化應激RAW264.7細胞上清液（B組）、氧化應激RAW264.7細胞上清液（C組）培養，采用MTS法檢測細胞增殖情況，行劃痕實驗檢測細胞遷移能力；另取細胞分為4組，空白對照組，以完全培養基培養；陽性對照組，以含50 μg/mL維生素C及10nmol/L的β甘油磷酸鈉的完全培養基進行成骨誘導培養；正常對照組，以含50 μg/mL維生素C及10nmol/L的β甘油磷酸鈉的完全培養基及未氧化應激RAW264.7細胞上清液培養；實驗組，以含50 μg/mL維生素C及10nmol/L的β甘油磷酸鈉的完全培養基及氧化應激RAW264.7細胞上清液培養。培養3、7、14 d，RT-PCR檢測細胞內成骨相關基因ALP、Runx2、骨橋蛋白（osteopontin，OPN）、Ⅰ型膠原蛋白（collagen typeⅠ，COL-Ⅰ）、骨鈣素（osteocalcin，OC）、骨唾液酸蛋白（bone sialoprotein，BSP）表達水平。 結果MTS和SOD檢測結果顯示：25μmol/L H2O2刺激1h為構建RAW264.7細胞氧化應激模型最佳濃度和作用時間。細胞生長檢測顯示：1、2、3 d B、C組細胞增殖率顯著高于A組（P＜0.05），C組低于B組，其中2、3 d時組間比較差異有統計學意義（P＜0.05）。劃痕實驗顯示12h時B、C組MC3T3-E1細胞遷移顯著快于A組，C組快于B組，細胞遷移距離比較差異有統計學意義（P＜0.05）；24h時B、C組劃痕已被細胞爬滿。除3 d外，實驗組各時間點ALP、Runx2、OC、BSP mRNA相對表達量均較陽性對照組明顯降低，OPN、COL-ⅠmRNA相對表達量較空白對照組降低，差異有統計學意義（P＜0.05）。 結論H2O2構建RAW264.7細胞氧化應激模型的最佳濃度為25μmol/L、作用時間為1 h。氧化應激活化RAW264.7巨噬細胞上清液能促進MC3T3-E1成骨細胞遷移、抑制其增殖及成骨相關基因的表達。
目的探討 H2O2 誘導的 miR-21 下調對 MC3T3-E1 細胞成骨分化的作用及機制。方法取 MC3T3-E1 細胞系，培養傳至第 7 代進行實驗。取 MC3T3-E1 細胞，以不同濃度 H2O2（0、40、80、160、320 μmol/L）培養，經實時熒光定量 PCR 檢測 miR-21 表達、MTS 法檢測細胞活性，選擇 H2O2 最合適實驗濃度。取 MC3T3-E1 細胞分為空白對照組（A 組）、H2O2 組（B 組）、成骨誘導組（C 組）、H2O2+成骨誘導組（D 組），對應培養后實時熒光定量 PCR 檢測 miR-21 表達以及成骨標志基因 Runx2、骨橋蛋白（osteopontin，OPN）及Ⅰ型膠原蛋白（collagen type Ⅰ alpha 1，Col1a1）表達，Western blot 檢測磷酸酶與張力蛋白同源物（phosphatase and tensin homolog，PTEN）蛋白表達，茜素紅染色觀察細胞外鈣基質沉積情況，分析 H2O2 對 MC3T3-E1 細胞成骨分化的影響。然后再取 MC3T3-E1 細胞，分為 H2O2 組（A1 組）、H2O2+成骨誘導組（B1 組）、H2O2+miR-21 抑制劑+成骨誘導組（C1 組）、H2O2+miR-21 抑制劑陰性對照+成骨誘導組（D1 組）；以及 H2O2 組（A2 組）、H2O2+成骨誘導組（B2 組）、H2O2+siRNA-PTEN 陰性對照+成骨誘導組（C2 組）、H2O2+siRNA-PTEN+成骨誘導組（D2 組）；對應培養后檢測成骨標志基因（Runx2、OPN、Col1a1）表達以及細胞外鈣基質沉積情況，分析下調 miR-21 或沉默 PTEN 對細胞成骨分化的影響。結果結合實時熒光定量 PCR 檢測以及 MTS 法結果，選擇 160 μmol/L H2O2 進行實驗。第 1、2 周 B 組 miR-21 相對表達量低于 A 組（P<0.05），D 組低于 C 組（P<0.05）；第 2 周 C 組 PTEN 蛋白相對表達量均低于 A、D 組（P<0.05）；第 1、2 周 D 組 Runx2、OPN 及 Col1a1 mRNA 相對表達量均低于 C 組（P<0.05），茜素紅染色顯示 D 組鈣基質沉積少于 C 組。C1 組 PTEN 蛋白相對表達量高于 D1 組（P<0.05）；第 1、2 周 B1、D1 組 Runx2、OPN mRNA 相對表達量均高于 C1 組（P<0.05），第 2 周 B1、D1 組 Col1a1 mRNA 均高于 C1 組（P<0.05）；茜素紅染色顯示 C1 組鈣基質沉積少于 B1、D1 組。第 1 周 D2 組 OPN、Col1a1 mRNA 相對表達量高于 B2、C2 組（P<0.05），第 3 周茜素紅染色顯示 D2 組鈣基質沉積明顯多于 B2、C2 組。結論H2O2 抑制 MC3T3-E1 成骨分化可能與 miR-21 下調有關。