目的探討人羊膜間充質干細胞（human amniotic mesenchymal stem cells，hAMSCs）是否具有MSCs的特性及經誘導后在體外能否向韌帶細胞分化。 方法取產婦胎盤通過酶消化法獲得hAMSCs，流式細胞術鑒定hAMSCs表型特征。取第3代hAMSCs分別加入含不同誘導液的L-DMEM/F12培養基：A組TGF-β1+bFGF，B組透明質酸（hyaluronic acid，HA），C組TGF-β1+bFGF+HA，D組為空白對照組。倒置相差顯微鏡觀察誘導后21 d各組細胞形態學變化；磺酰羅丹明B（sulforhodamine B，SRB）比色法檢測各組細胞生長活性；誘導后7、14、21 d分別采用免疫組織化學染色及實時熒光定量PCR檢測韌帶特異性蛋白和基因Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原、肌腱蛋白C（tenascin C，TNC）表達。 結果流式細胞術鑒定結果表明hAMSCs表達MSCs表型。倒置相差顯微鏡觀察示誘導21 d A、B、C組細胞均呈長梭形纖維細胞樣生長，C組細胞形態更單一、有明顯方向性且較A組排列更緊湊。SRB比色法檢測示各組細胞于培養6 d左右達增殖高峰，6 d時A、B、C組細胞活性均顯著高于D組。免疫組織化學結果示：誘導培養7 d，各組均未檢測到TNC表達；7、14、21 d A、B、C組Ⅰ型膠原表達均顯著高于D組，14、21 d A、B、C組Ⅲ型膠原表達顯著高于D組，差異均有統計學意義（P<0.001）。B組Ⅰ型膠原表達以及A、C組Ⅲ型膠原、TNC表達隨時間增加均呈逐漸增高趨勢，各時間點間比較差異均有統計學意義（P<0.001）。實時熒光定量PCR結果示：誘導培養21 d，C組Ⅰ型膠原、TNC mRNA相對表達量顯著高于A、B組，B組Ⅲ型膠原mRNA相對表達量顯著高于A、C組，差異均有統計學意義（P<0.05）。A、C組Ⅰ型膠原、TNC以及C組Ⅲ型膠原mRNA相對表達量隨時間增加呈逐漸上調趨勢，各時間點間比較差異均有統計學意義（P<0.001）。 結論hAMSCs具有MSCs的特性，有良好增殖能力，經體外誘導后韌帶特異性基因表達上調，韌帶特異性蛋白合成增加，可作為韌帶組織工程種子細胞來源之一。
目的總結采用組織工程技術促進股骨頭壞死（osteonecrosis of the femoral head，ONFH）骨組織再血管化的研究進展。方法廣泛查閱近年國內外相關文獻，闡明股骨頭血管化機制，對組織工程技術在促進 ONFH 骨組織再血管化中的應用進展進行總結歸納。結果重建或改善股骨頭血供是治療 ONFH 的關鍵，目前組織工程研究熱點主要基于種子細胞、支架材料以及促血管生成因子三方面，聯合 3D 打印技術和藥物遞送系統來促進股骨頭骨組織再血管化。結論基于組織工程技術的股骨頭再血管化策略，有望改善局部血供，延緩甚至逆轉 ONFH 進展。
目的 探討人羊膜間充質干細胞（human amniotic mesenchymal stem cells，hAMSCs）是否具有 MSCs 特性，以及經 TGF-β1 和 VEGF 聯合誘導后是否具有向韌帶成纖維細胞分化的能力。 方法 取自愿捐贈的足月產婦胎盤，采用胰蛋白酶膠原酶聯合消化法分離培養 hAMSCs，流式細胞術檢測 hAMSCs 表型分子，免疫熒光染色檢測 hAMSCs 其角蛋白-19（cytokeratin-19，CK-19）和波形蛋白表達情況。取第 3 代 hAMSCs，分別使用含 TGF-β1 和 VEGF 的 L-DMEM/F12 成韌帶或纖維細胞誘導培養基（實驗組）和普通 L-DMEM/F12 培養基（對照組）培養，細胞增殖-毒性檢測試劑盒（cell counting kit-8，CCK-8）檢測兩組細胞增殖能力；培養 5、10、15 d 分別采用免疫熒光染色及實時熒光定量 PCR 檢測韌帶及血管生成相關特異性蛋白和基因表達。 結果 倒置相差顯微鏡觀察示 hAMSCs 呈單層貼壁生長；流式細胞術結果示 hAMSCs 表達 MSCs 表型分子；免疫熒光染色示 hAMSCs 高表達波形蛋白、低表達 CK-19；hAMSCs 具有向成骨、成軟骨及成脂細胞分化的能力。CCK-8 法檢測示，7 d 時兩組細胞均達增殖高峰，實驗組細胞增殖能力于 7 d 后顯著高于對照組（P<0.05）。免疫熒光染色示，培養 5、10、15 d 時實驗組 Ⅰ 型膠原、Ⅲ 型膠原、纖維連接蛋白（Fibronectin）、細胞連接素（Tenascin-C）表達染色均較對照組增強。實時熒光定量 PCR 結果示，隨時間延長實驗組 Ⅰ 型膠原、Ⅲ 型膠原、Fibronectin、α-肌動蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）、VEGF mRNA 相對表達量均逐漸上調（P<0.05）。除培養 5 d 兩組 Ⅰ 型膠原、Ⅲ 型膠原、VEGF mRNA 相對表達量比較差異無統計學意義（P>0.05）外，其余各時間點實驗組 Ⅰ 型膠原、Ⅲ 型膠原、Fibronectin、α-SMA 和 VEGF mRNA 相對表達量均顯著高于對照組（P<0.05）。 結論 hAMSCs 具有 MSCs 特征，且體外增殖能力良好，可作為組織工程種子細胞來源；體外誘導后韌帶成纖維細胞及血管生成相關特異性基因表達上調，韌帶成纖維細胞特異性蛋白分泌增加，TGF-β1 聯合 VEGF 可作為構建組織工程韌帶的生長因子選擇。