目的 改良法構建攜帶金屬蛋白酶抑制劑1(TIMP1)基因的Ⅱ型重組腺相關病毒(rAAV2)。方法 采用PCR法從pDNR-LIB質粒中擴增人全長TIMP1基因,利用基因重組的方法將TIMP1全長cDNA插入通用型AAV2載體質粒pSNAV的多克隆位點,構建成pSNAV-TIMP1; 用脂質體轉染的方法將重組質粒轉入BHK-21細胞中,G418細胞篩選得到轉入重組質粒并能表達目的基因的細胞系BHK-21/rAAV2-TIMP1; 用具有rAAV2包裝功能的重組Ⅰ型單純皰疹病毒(rHSV1-rc/△UL2)感染BHK-21/rAAV2-TIMP1,純化后得到rAAV2-TIMP1。結果 用改良法成功構建rAAV2-TIMP1,病毒滴度達到1×1012 v.g./ml。結論 成功構建rAAV2-TIMP1,為其進一步應用于基因治療的研究提供實驗基礎。