目的探討內質網應激對吸煙誘導的髓核細胞凋亡與炎性反應的影響。方法以 2016 年 10 月—2018 年 10 月 25 例接受椎間盤摘除術的頸椎間盤突出癥患者為研究對象，分為吸煙組（14 例）和非吸煙組（11 例）。兩組患者年齡、性別、突出節段、Pfirrmann 分級比較，差異均無統計學意義（P>0.05）。將術中獲取的髓核組織，行 TUNEL 染色和 Western blot 檢測，觀察細胞凋亡情況。然后，采用酶序貫消化法分離培養髓核細胞并傳代，取第 3 代細胞行 ELISA 檢測炎性因子 IL-1β 和 TNF-α 含量，免疫熒光染色觀察細胞中 P65 核轉移情況，Western blot 檢測內質網應激相關蛋白 GRP78 和 CHOP 表達，透射電鏡觀察細胞內質網超微結構。最后，為驗證內質網調控作用，采用特異性抑制劑 4-PBA 處理吸煙組髓核細胞后，Western blot 檢測 GRP78、CHOP、IL-1β、TNF-α 及 P65 蛋白相對表達量，流式細胞術檢測細胞凋亡率；并以吸煙組未作處理的髓核細胞作對照。結果髓核組織觀測顯示，吸煙組細胞凋亡率及凋亡相關蛋白 Caspase-3 和 PARP 相對表達量均明顯高于非吸煙組（P<0.05）。髓核細胞觀測顯示，吸煙組髓核細胞分泌 IL-1β、TNF-α 水平以及 GRP78、CHOP 蛋白相對表達量均明顯高于非吸煙組（P<0.05）；免疫熒光染色示吸煙組細胞 P65 主要表達在細胞核，而非吸煙組在細胞質；透射電鏡觀察顯示，與非吸煙組相比，吸煙組內質網處于應激損傷狀態。吸煙組髓核細胞經 4-PBA 處理后，GRP78、CHOP、IL-1β、TNF-α 及 P65 蛋白相對表達量以及細胞凋亡率均較處理前明顯降低（P<0.05）。結論吸煙可通過內質網應激導致髓核細胞凋亡和炎性反應加劇，抑制內質網應激有望成為延緩吸煙導致椎間盤退變的新靶點。
目的探討鋅指蛋白 A20 對兔腰椎間盤退變的影響。方法取 3 月齡新西蘭大白兔 26 只，體質量 2.0～2.5 kg，經腹細針穿刺法制備 L3、4、L4、5、L5、6 椎間盤退變模型，其中 24 只術后 4 周 MRI 檢查明確造模成功，隨機分為 4 組（n=6），于目標椎間盤中分別注射鋅指蛋白 A20 過表達腺病毒（過表達 A20 組）、空載體腺病毒（空載體組）、PBS 液（對照組）、鋅指蛋白 A20干擾腺病毒（干擾 A20 組）。于注射前 1 d 及注射后 1、2、3、6 d 行生物反應綜合評分；注射后 2、4、8 周，各組行 MRI 檢查并測量 T2 弛豫時間（T2 信號值）后，取材行阿利辛藍染色觀察椎間盤髓核細胞退變情況，免疫組織化學染色檢測鋅指蛋白 A20 以及椎間盤退變相關指標（Ⅱ型膠原、蛋白聚糖）的表達，Western blot 檢測鋅指蛋白 A20、NF-κB 結合蛋白［P65、磷酸化 P65（phosphate P65，P-P65）、Ⅱ型膠原、蛋白聚糖］、自噬相關蛋白［LC3 （LC3Ⅱ/LC3Ⅰ）、P62］以及炎癥因子（TNF-α、IL-1β）的表達。結果各組注射后各時間點生物反應綜合評分均明顯低于注射前 1 d（P<0.05）；注射后 6 d 干擾 A20 組評分明顯低于其他組（P<0.05），其他組間比較差異均無統計學意義（P>0.05）。MRI 檢測提示，注射后 2、4、8 周過表達 A20 組 T2 信號值均最高（P<0.05），2、4 周時干擾 A20 組最低（P<0.05），其余組間差異均無統計學意義（P>0.05）。阿利辛藍染色顯示，注射后 4 周過表達 A20 組蛋白聚糖含量最高（P<0.05）、干擾 A20 組最低（P<0.05）；8 周時過表達 A20 組蛋白聚糖含量顯著高于其他組（P<0.05），其他組間比較差異無統計學意義（P>0.05）。免疫組織化學染色示，鋅指蛋白 A20、Ⅱ型膠原、蛋白聚糖表達過表達 A20 組最高（P<0.05），干擾 A20 組上述蛋白表達最低（P<0.05）。Western blot 檢測示鋅指蛋白 A20、蛋白聚糖、Ⅱ型膠原、LC3 （LC3Ⅱ/LC3Ⅰ）蛋白相對表達量過表達 A20 組最高、干擾 A20 組最低，而 P-P65、TNF-α、IL-1β、P62 蛋白相對表達量過表達 A20 組最低、干擾 A20 組最高，與其他組比較差異均有統計學意義（P<0.05）；各組 P65 蛋白相對表達量差異均無統計學意義（P>0.05）。結論鋅指蛋白 A20 能通過抑制炎癥反應，有效延緩兔腰椎間盤退變的進程。