【摘要】目的開發成年豬胰島分離方法。方法 取成年豬胰體尾部,胰管內注入0.1%冷膠原酶(type Ⅺ)消化液, 在38.5 ℃水箱中消化后,放入4 ℃ Hanks液中分離并用600 μm 的濾過網過濾。殘留的組織重新懸浮在冷Hanks液中,并放入Ricordi’s chamber內振蕩5 min后再次過濾。胰島分離分為對照組(n=14)、Pefabloc(胰蛋白酶抑制劑)組(n=8)及FOY(胰蛋白酶抑制劑)組(n=5)。 Pefabloc組和FOY組消化液中分別添加1.0 mmol/L Pefabloc或FOY。結果Pefabloc組及FOY組的胰島收獲量分別為(11 848±3 530) 個/g和(14 496±3 693) 個/g,明顯高于對照組的(8 505±3 349) 個/g,P<0.05。消化后的消化液胰蛋白酶活性對照組為(114.7±50.0)BAEEU,明顯高于胰管內注入前的(4.0±1.8) BAEEU及Pefabloc組的(5.5±2.7) BAEEU(P<0.01),但Pefabloc組與胰管內注入前卻差異無統計學意義。對照組胰島收獲量≥8 000個/g組的胰蛋白酶活性明顯低于收獲量<8 000 個/g組的活性〔(78.3±26.7) BAEEU vs (137.5±48.4) BAEEU〕,P<0.05。對照組、Pefabloc組及FOY組純化后的胰島對不同濃度葡萄糖顯示了良好的胰島素分泌能力。結論本實驗采用的胰島分離方法能夠獲得大量的豬胰島細胞,而且預防性添加胰蛋白酶抑制劑后進一步穩定地提高了胰島收獲量。
目的 采用 meta 分析的方法,評價胃遠端大部切除術后消化道重建中 Billroth-Ⅰ吻合及 Roux-en-Y吻合方式的圍手術期安全性及中遠期并發癥。 方法 通過 Embase、PubMed、MedLine 及 The Cochrane Library 數據庫檢索關于胃遠端大部切除術后消化道重建中采用 Billroth-Ⅰ吻合及 Roux-en-Y 吻合方式的隨機對照試驗(RCT)文獻。檢索開始于 2015 年 12 月 1 日,截止至 2016 年 3 月 1 日。根據制定的納入和排除標準對檢索到的文獻進行篩選,采用改良 Jadad 量表對納入研究的文獻進行質量評價,采用 Review Manager Version 5.1 軟件對數據進行 meta 分析。 結果 共納入 5 篇 RCT 文獻共 600 例患者,其中采用 Roux-en-Y 吻合的患者 302 例,采用 Billroth-Ⅰ吻合的患者 298 例。meta 分析結果提示:Billroth-Ⅰ吻合在手術時間〔WMD:38.95;95%CI:(19.86,58.04);P<0.000 1〕和術中出血量〔WMD:34.85;95%CI:(2.13,67.56);P=0.04〕方面較 Roux-en-Y 吻合有一定的優勢,但是行 Roux-en-Y 吻合的患者在預防膽汁返流〔OR:0.03;95%CI:(0.01,0.11);P<0.000 01〕和殘胃炎〔OR:0.37;95%CI:(0.25,0.54);P<0.000 01〕方面效果更好。在住院時間〔WMD:2.96;95%CI:(–0.00,5.93);P=0.05〕、吻合口漏〔OR:0.43;95%CI:(0.11,1.68);P=0.23〕、吻合口狹窄〔OR:1.84;95%CI:(0.61,5.53);P=0.27〕、返流性食管炎〔OR:0.63;95%CI:(0.28,1.44);P=0.27)及胃排空障礙〔OR:1.24;95%CI:(0.46,3.30);P=0.67〕方面 Billroth-Ⅰ吻合及 Roux-en-Y 吻合比較差異均無統計學意義。 結論 Billroth-Ⅰ吻合及 Roux-en-Y 吻合術式各有優缺點,Billroth- Ⅰ吻合在安全性方面更優,而 Roux-en-Y 吻合對于提高患者生活質量方面更優,但仍需要更多高質量的、設計精良、數據充足的 RCT 文獻進行進一步驗證。
【摘要】目的 觀察酒精對培養肝細胞極性的影響。方法 利用三明治構型培養成鼠肝細胞并觀察酒精干預下其形態、膜區域蛋白特異性分布以及P450b和白蛋白mRNA表達的變化,以確定酒精對肝細胞極性的影響。結果 酒精干預后,肝細胞變扁平、多核、胞漿稀薄,肝板樣結構消失; 免疫組織化學染色證明肝細胞膜區域蛋白失去特異性分布; 原位雜交顯示加入酒精后只有較弱的P450b和白蛋白mRNA陽性表達。結論 酒精可導致肝細胞極性破壞,從而造成肝細胞損傷,本研究為在細胞水平研究酒精性肝病的發病機理提供了一個體外模型,具有較重要的臨床意義。