預防性添加胰蛋白酶抑制劑對成年豬胰島分離的影響_《中國普外基礎與臨床雜志》

作者：

白日星 , 宋茂民

首都醫科大學附屬北京天壇醫院普通外科（北京100050）;

關鍵詞：

胰島移植豬胰島分離胰蛋白酶抑制劑

視頻：

導出 下載 收藏 掃碼 引用

摘要 全文 圖表 視頻 參考文獻 施引文獻 補充材料

【摘要】目的開發成年豬胰島分離方法。
方法取成年豬胰體尾部，胰管內注入0.1%冷膠原酶(type Ⅺ)消化液，在38.5 ℃水箱中消化后，放入4 ℃ Hanks液中分離并用600 μm 的濾過網過濾。殘留的組織重新懸浮在冷Hanks液中，并放入Ricordi’s chamber內振蕩5 min后再次過濾。胰島分離分為對照組（n=14）、Pefabloc(胰蛋白酶抑制劑)組（n=8）及FOY（胰蛋白酶抑制劑）組（n=5）。 Pefabloc組和FOY組消化液中分別添加1.0 mmol/L Pefabloc或FOY。
結果Pefabloc組及FOY組的胰島收獲量分別為（11 848±3 530）個/g和（14 496±3 693）個/g，明顯高于對照組的（8 505±3 349）個/g，P＜0.05。消化后的消化液胰蛋白酶活性對照組為（114.7±50.0）BAEEU，明顯高于胰管內注入前的（4.0±1.8） BAEEU及Pefabloc組的（5.5±2.7） BAEEU（P＜0.01），但Pefabloc組與胰管內注入前卻差異無統計學意義。對照組胰島收獲量≥8 000個/g組的胰蛋白酶活性明顯低于收獲量＜8 000 個/g組的活性〔（78.3±26.7） BAEEU vs （137.5±48.4） BAEEU〕，P＜0.05。對照組、Pefabloc組及FOY組純化后的胰島對不同濃度葡萄糖顯示了良好的胰島素分泌能力。
結論本實驗采用的胰島分離方法能夠獲得大量的豬胰島細胞，而且預防性添加胰蛋白酶抑制劑后進一步穩定地提高了胰島收獲量。

引用本文： 白日星,宋茂民. 預防性添加胰蛋白酶抑制劑對成年豬胰島分離的影響. 中國普外基礎與臨床雜志, 2005, 12(3): 275-279. doi: 復制

1.	Ricordi C, Socci C, Davalli AM, et al. Isolation of the elusive pig islet [Ｊ]. Surgery, 1990; 107(6)∶ 688.
2.	Inoue K, Gu Y, Shinohara S, et al. Isolation of adult pig islet. In vitro assessment and xenotransplantation [Ｊ]. Int J Pancreatol, 1992; 12(2)∶173.
3.	Takei S, Teruya M, Grunewald A, et al. Isolation and function of human and pig islets [Ｊ]. Pancreas, 1994; 9(2)∶150.
4.	Muramatu M, Itoh T, Takei M，et al. Tryptase in rat mast cells: properties and inhibition by various inhibitors in comparison with chymase [Ｊ]. Biol Chem Hoppe Seyler, 1988; 369(7)∶617.
5.	Heiser A, Ulrichs K, MullerRuchholtz W. Influence of porcine strain, age, and pH of the isolation medium on porcine pancreatic islet isolation success [Ｊ]. Transplant Proc, 1994; 26(2)∶618.
6.	Socci C, Ricordi C, Davalli AM, et al. Selection of donors significantly improves pig islet isolation yield [Ｊ]. Horm Metab Res Suppl, 1990; 25(1)∶32.
7.	Ulrichs K, Bosse M, Wacker HH, et al. Histologic analysis of the porcine pancreas to improve islet yield and integrity after collagenase digestion [Ｊ]. Transplant Proc; 1994; 26(2)∶610.
8.	Sutherland DE, Steffes MW, Bauer GE, et al. Isolation of human and porcine islets of Langerhans and islet transplantation in pigs [Ｊ]. J Surg Res, 1974; 19(2)∶102.
9.	Heiser A, Ulriohs K, MullerRuchholtz W. Prophylactic trypsin inhibition during the isolation procedure guarantees reproducible islet yields [Ｊ]. Xenotransplantation,1994; 1(1)∶66.
10.	Toomey P, Chadwick DR, Contractor H, et al. Porcine islet isolation: prospective comparison of automated and manual methods of pancreatic collagenase digestion [Ｊ]. Br J Surg, 1993; 80(2)∶240.
11.	Buhler L, Deng S, Mage R, et al. Pig islet isolation: new aspects [Ｊ]. Transplant Proc, 1994; 26(2)∶628.
12.	張偉杰，Scherzen MJ. 成年豬胰島分離與純化 [Ｊ]. 中華器官移植雜志， 2000； 21（11）∶341.
13.	孫銘，寧剛，李濤，等. 微囊雜種豬胰島移植治療 Ⅰ 型糖尿病的實驗研究 [Ｊ]. 中國生物醫學工程學報， 2002； 21（4）∶102.

1. Ricordi C, Socci C, Davalli AM, et al. Isolation of the elusive pig islet [Ｊ]. Surgery, 1990; 107(6)∶ 688.
2. Inoue K, Gu Y, Shinohara S, et al. Isolation of adult pig islet. In vitro assessment and xenotransplantation [Ｊ]. Int J Pancreatol, 1992; 12(2)∶173.
3. Takei S, Teruya M, Grunewald A, et al. Isolation and function of human and pig islets [Ｊ]. Pancreas, 1994; 9(2)∶150.
4. Muramatu M, Itoh T, Takei M，et al. Tryptase in rat mast cells: properties and inhibition by various inhibitors in comparison with chymase [Ｊ]. Biol Chem Hoppe Seyler, 1988; 369(7)∶617.
5. Heiser A, Ulrichs K, MullerRuchholtz W. Influence of porcine strain, age, and pH of the isolation medium on porcine pancreatic islet isolation success [Ｊ]. Transplant Proc, 1994; 26(2)∶618.
6. Socci C, Ricordi C, Davalli AM, et al. Selection of donors significantly improves pig islet isolation yield [Ｊ]. Horm Metab Res Suppl, 1990; 25(1)∶32.
7. Ulrichs K, Bosse M, Wacker HH, et al. Histologic analysis of the porcine pancreas to improve islet yield and integrity after collagenase digestion [Ｊ]. Transplant Proc; 1994; 26(2)∶610.
8. Sutherland DE, Steffes MW, Bauer GE, et al. Isolation of human and porcine islets of Langerhans and islet transplantation in pigs [Ｊ]. J Surg Res, 1974; 19(2)∶102.
9. Heiser A, Ulriohs K, MullerRuchholtz W. Prophylactic trypsin inhibition during the isolation procedure guarantees reproducible islet yields [Ｊ]. Xenotransplantation,1994; 1(1)∶66.
10. Toomey P, Chadwick DR, Contractor H, et al. Porcine islet isolation: prospective comparison of automated and manual methods of pancreatic collagenase digestion [Ｊ]. Br J Surg, 1993; 80(2)∶240.
11. Buhler L, Deng S, Mage R, et al. Pig islet isolation: new aspects [Ｊ]. Transplant Proc, 1994; 26(2)∶628.
12. 張偉杰，Scherzen MJ. 成年豬胰島分離與純化 [Ｊ]. 中華器官移植雜志， 2000； 21（11）∶341.
13. 孫銘，寧剛，李濤，等. 微囊雜種豬胰島移植治療 Ⅰ 型糖尿病的實驗研究 [Ｊ]. 中國生物醫學工程學報， 2002； 21（4）∶102.

《中國普外基礎與臨床雜志》

預防性添加胰蛋白酶抑制劑對成年豬胰島分離的影響

摘要 全文 圖表 視頻 參考文獻 施引文獻 補充材料

Format

Content

《中國普外基礎與臨床雜志》

預防性添加胰蛋白酶抑制劑對成年豬胰島分離的影響

摘要 全文 圖表 視頻 參考文獻 施引文獻 補充材料

Format

Content

摘要全文圖表視頻參考文獻施引文獻補充材料