目的 通過研究p53、K-ras及APC在大腸癌組織及糞便中的突變情況，探討糞便多基因聯合檢測進行大腸癌二級篩查的可行性。方法 應用聚合酶鏈反應-單鏈構象多態性（PCR-SSCP）分析及硝酸銀染色法，檢測40例大腸癌患者的腫瘤組織與糞便及40例正常人腸黏膜組織與糞便中p53、K-ras及APC 3種基因的突變情況，并比較多個基因聯合檢測與單基因檢測基因突變率的靈敏性之間的差異。結果 ①40例大腸癌組織中p53、K-ras及APC基因突變率分別為57.50%、50.00%及60.00%，糞便中相應的基因突變率分別為42.86%、40.00%及51.43%，糞便基因突變與組織中相應基因突變的符合率分別為65.22%、70.00%及75.00%。40例正常腸黏膜組織及糞便中3種基因均未檢出突變； ②3種基因聯合檢測的突變率明顯高于單基因檢測（P＜0.05）； ③糞便基因聯合檢測與糞便隱血試驗比較，靈敏性之間差異無統計學意義，但前者的特異性明顯高于后者(P＜0.05)。結論 糞便基因聯合檢測診斷大腸癌的靈敏性及特異性均較高，有望作為一種無創、特異、有效的篩查手段，與糞便隱血試驗結合序貫進行大腸癌的篩查。
目的 探討磷酸化的哺乳動物雷帕霉素靶蛋白(p-roTOR)在非小細胞肺癌(NSCLC) 中的表達及其對預后的預測價值。方法 運用免疫組織化學EnVision法檢測59例NSCLC肺癌組織和10例非肺癌組織(3例肺結核和7例炎性假瘤)中p-mTOR蛋白的表達。結果 p-mTOR在肺 良性疾病組均為陰性，在NSCLC組織中表達的陽性率為40.7％，顯著高于肺良性疾病組（χ2=6.237，P=0.013）；p-mTOR在NSCLC組織中的表達與性別、年齡和pTNM分期有關，而與其他臨床 病理參數(腫瘤大小、病理類型和淋巴結轉移情況)無明顯相關性。Kaplan-Meire生存分析顯示， p-mTOR與生存期無明顯相關(Log rank檢驗P=0.055)。結論 檢測p-mTOR有助于肺部良惡性疾病的鑒別，單獨p-mTOR不能作為判斷NSCLC預后的參考指標。
目的 探討小鼠感染肺炎衣原體后肺組織TOLL 樣受體( TLR) 2 的基因表達變化及其信號傳導機制。方法 TLR4 基因缺失小鼠( C3H/HeJ) 96 只, 隨機分為對照組、模型組、SB203580 組和PDTC 組, 每組24 只。每組分別按1、4、7、14 d 各分4 個小組, 每小組6 只。對照組鼻內接種二磷酸蔗糖( 2sp) 緩沖液, 模型組和干預組均給予約4. 0 ×106 IFU/mL( 0. 04 mL) 的肺炎衣原體鼻內接種,SB203580 組和PDTC 組在接種完肺炎衣原體后分別立即腹腔注射相應的p38 蛋白激酶( p38MAPK)抑制劑SB203580 ( 100 mg/ kg ) 或核因子κB ( NF-κB) 抑制劑吡咯烷二硫氨基甲酸( PDTC)( 50 mg/kg) 。分別于接種后第1、4、7 及14 d 處死小鼠, RT-PCR 法檢測肺組織TLR2 mRNA 的表達,ELISA 法測定肺組織勻漿腫瘤壞死因子α( TNF-α) 的含量, 同時觀察肺組織病理變化。結果 小鼠感染肺炎衣原體后肺組織TLR2 mRNA 表達迅速升高, 以第4 d 和第7 d 明顯, 14 d 以后開始下降。PDTC 早期干預可在一定程度上抑制肺臟組織TLR2 mRNA 表達, 并在感染高峰期抑制明顯。SB203580 對小鼠肺組織TLR2 mRNA 表達也有明顯抑制。感染肺炎衣原體后, 肺組織TNF-α表達水平顯著高于正常組, SB203580 和PDTC 對小鼠肺組織TNF-α表達均有抑制作用, SB203580 對TNF-α的抑制作用強于PDTC。結果 小鼠感染肺炎衣原體后, 可引起TLR2 表達的增加。對p38MAPK 和 NF-κB 的干預均影響TLR2 的表達以及炎癥介質的釋放, 提示肺炎衣原體可能是通過TLR2 /MAPK 和TLR2 /NF-κB 通路導致肺部炎癥反應。
目的 觀察給予己酮可可堿( PTX) 預處理對失血性休克致急性肺損傷( ALI) 小鼠的影響, 初步探討PTX 的作用機制。方法 小鼠分為對照組、失血性休克組及PTX 組。通過肺組織HE染色觀察病理改變, 同時檢測肺干濕比( W/D) 和髓過氧化物酶( MPO) 活性。通過ELISA 方法檢測肺組織腫瘤壞死因子α( TNF-α) 和IL-1β變化, 通過逆轉錄-聚合酶鏈反應( RT-PCR) 檢測肺組織Toll 樣受體4( TLR4) mRNA 的表達, 通過Western blot 檢測肺組織TLR4 蛋白的變化。結果 失血性休克誘導小鼠產生ALI, 肺W/D 和MPO 活性明顯增加, TNF-α、IL-1β、TLR4 mRNA 和TLR4 蛋白表達也增高, 與對照組有顯著性差異( P lt; 0. 01) 。PTX 預處理能減輕失血性休克所致ALI, 降低肺W/D 和MPO 活性, 同時導致TNF-α、IL-1β、TLR4 mRNA 和TLR4 蛋白表達下降。結論 PTX 預處理對失血性休克所致ALI 起保護作用, 可能與通過下調TLR4 抑制促炎癥因子表達有關。
目的 探討噻托溴銨吸入劑對穩定期D 組慢性阻塞性肺疾病( COPD) 患者臨床癥狀及肺功能的改善作用。方法 62 例穩定期D 組COPD 患者隨機分為治療組32 例, 給予噻托溴銨吸入劑( 18 μg, 吸入,1 次/d) 聯合沙美特羅/ 丙酸氟替卡松吸入劑( 50 μg/500 μg, 吸入, 2 次/d) 治療; 對照組30 例, 給予沙美特羅/ 丙酸氟替卡松( 50 μg /500 μg, 吸入, 2 次/d) 治療。觀察患者治療前、治療后8、24、48 周運動耐量、呼吸困難評分的變化及治療前、治療后1、8、24、48 周后肺功能變化。結果 治療8 周、24 周、48 周后兩組6 min 步行距離( 6MWD) 值均較治療前明顯增加, 呼吸困難評分( MRC)均較治療前顯著下降( P lt;0. 05) , 而治療組中各項指標改善顯著優于對照組( P lt; 0. 05) 。治療1 周、8 周后兩組FVC、FEV1 和FEV1% pred 值均較治療前明顯增加( P lt; 0. 05) , 治療組指標改善顯著優于對照組( P lt;0. 05) 。24 周、48 周治療組上述指標仍顯著高于治療前( P lt;0. 05) , 而對照組與治療前比較無顯著差異, 治療組與對照組比較有顯著性差異。結論 噻托溴銨與沙美特羅/ 氟替卡松聯合吸入治療穩定期D 組COPD 患者, 優于沙美特羅/ 丙酸氟替卡松單藥吸入治療。
目的 觀察抗凝血酶Ⅲ對油酸誘導急性肺損傷大鼠的肺保護作用, 并探討相關機制。方法 60 只清潔級雄性SD 大鼠按隨機數字表法分為正常對照組、急性肺損傷組、抗凝血酶Ⅲ 治療組、抗凝血酶Ⅲ聯合肝素治療組和肝素治療組。油酸( 0. 2 mL/kg) 靜脈注射建立急性肺損傷大鼠模型。改良Smith 肺損傷病理評分法評價肺損傷程度, 發色底物法測定血漿中抗凝血酶Ⅲ的活性, 比重法測定肺組織血管外肺水( EVLW) 和肺組織濕/ 干重比( W/D) , 單核素示蹤技術測定肺微血管白蛋白通透性( Palb ) , 酶聯免疫吸附法( ELISA) 測定血清中腫瘤壞死因子α( TNF-α) 、白細胞介素6( IL-6)和血管假性血友病因子( vWF) 含量, 蛋白質印跡法檢測肺組織細胞外信號調節激酶( ERK) 1/2、P38絲裂原活化蛋白激酶( P38 MAPK) 和c-jun氨基端激酶( JNK) 磷酸化蛋白表達。結果 ( 1) 正常對照組Smith肺損傷病理評分為( 0. 67 ±0. 52) 分, 顯著低于急性肺損傷組( 11. 76 ±2. 23) 、抗凝血酶Ⅲ治療組( 10. 98 ±3. 42) 、抗凝血酶Ⅲ 聯合肝素治療組( 12. 07 ±1. 83) 和肝素治療組( 12. 54 ±3. 78)( P 均lt;0. 01) 。急性肺損傷組Smith 肺損傷病理評分與各治療組比較差異無統計學意義( P gt;0. 05) 。( 2) 各組間血漿抗凝血酶Ⅲ的活性差異無統計學意義( P 均gt;0. 05) 。( 3) 急性肺損傷組Palb 為0. 50 ±0. 07, 顯著高于正常對照組( 0. 20 ±0. 02, P lt;0. 01) , 與抗凝血酶Ⅲ治療組( 0. 47 ±0. 12) 、抗凝血酶Ⅲ聯合肝素治療組( 0. 46 ±0. 08) 和肝素治療組( 0. 48 ±0. 06) 相比, 差異均無統計學意義( P gt; 均0. 05) 。( 4) 急性肺損傷組EVLW 為( 1. 14 ±0. 12) mL/kg, 顯著高于正常對照組[ ( 0. 69 ±0. 04) mL/kg, P lt;0. 01] , 與抗凝血酶Ⅲ治療組[ ( 1. 12 ±0. 21) mL/kg] 、抗凝血酶Ⅲ聯合肝素治療組[ ( 1. 08 ±0. 13) mL/kg]和肝素治療組[ ( 1. 14 ±0. 20) mL/kg] 相比, 差異均無統計學意義( P 均gt; 0. 05) 。( 5) 急性肺損傷組TNF-α和IL-6 的含量分別為( 1. 613 ±0. 238) μg/L 和( 0. 685 ±0. 129) ng/mL, 顯著高于正常對照組[ ( 0. 506 ±0. 093) μg/L 和( 0. 233 ±0. 047) ng/mL, P 均lt; 0. 01] 、抗凝血酶Ⅲ 治療組[ ( 0. 972 ±0. 287) μg/L和( 0. 476 ±0. 097) ng/mL, P 均lt;0. 01] 和肝素治療組[ ( 0. 952 ±0. 122) μg/L 和( 0. 465 ±0. 103) ng/mL, P 均lt;0. 01] 。( 6) 急性肺損傷組血漿中vWF 的含量為( 32. 48 ±4. 84) U/L, 顯著高于正常對照組[ ( 14. 05 ±3. 02) U/L, P lt;0. 01] , 與抗凝血酶Ⅲ治療組[ ( 31. 50 ±9. 19) U/L] 、抗凝血酶Ⅲ聯合肝素治療組[ ( 32. 26 ±5. 42) U/L] 和肝素治療組[ ( 31. 83 ±8. 23) U/L] 相比, 差異均無統計學意義( P 均gt;0. 05) 。( 7) 急性肺損傷組肺組織ERK1/2、P38 MAPK 的磷酸化表達明顯高于正常對照組, 與抗凝血酶Ⅲ治療組、抗凝血酶Ⅲ合并肝素治療組和肝素治療組相比無明顯差異。各組間JNKMAPK磷酸化表達無明顯差異。結論 抗凝血酶Ⅲ雖降低血漿中TNF-α及IL-6 表達, 但對ERK1/2和P38 MAPK 磷酸化表達無明顯的影響, 未能明顯減輕肺水腫和降低肺微血管白蛋白通透性, 對油酸誘導急性肺損傷大鼠無明顯的肺保護作用。
本文報道了3例在東部戰區總醫院接受新輔助免疫治療聯合體部立體定向放療的Ⅲ/N2期非小細胞肺癌患者的臨床結局，其中男2例、女1例，平均年齡65.7歲。患者在接受體部立體定向放療1周后接受了2劑程序性細胞死亡蛋白-1抑制劑特瑞普利單抗治療，并計劃在第2次給藥后4～6周進行手術。1例患者達到完全病理學緩解，1例患者達到主要病理學緩解，1例患者殘留20%腫瘤，未達到主要病理學緩解。特瑞普利單抗聯合體部立體定向放療作為新輔助治療副作用少，且治療沒有造成手術延誤。
目的 探討核因子κB 圈套寡核苷酸( NF-κB decoy ODN) 轉染對小鼠成熟樹突狀細胞( DCs) 生物學特性的影響。方法 體外誘導Balb/c 小鼠骨髓細胞生成未成熟DCs( imDCs) , 經抗原 OVA 以及LPS孵育后成為OVA 沖擊的骨髓來源成熟DCs( mDCs) , 流式細胞儀檢測DCs 表面分子CD11c 以及MHC-Ⅱ的表達予以鑒定; 將NF-κB decoy ODN 體外轉染小鼠骨髓來源成熟DCs, 同時設立陰性對照組( 轉染NF-κB“變異”ODN) 以及未轉染組, EMSA 檢測轉染后NF-κB 的活性變化; 流式細胞儀檢測各組DCs 表面共刺激分子( CD40、CD80、CD86) 的表達; 混合淋巴細胞反應觀察各組DCs 對OVA 致敏的T淋巴細胞增殖的影響。結果 成功培養出骨髓來源成熟DCs; NF-κB decoy ODN 轉染DCs 的NF-κB活性明顯降低( P lt;0. 05) , DCs 表面CD40、CD80 共刺激分子的表達與陰性對照組、未轉染組比較無明顯改變( P gt; 0. 05) , 而CD86 的表達與其他各組比較明顯降低( P lt;0. 05) ; 在混合淋巴細胞反應中,NF-κB decoy ODN轉染DCs 對T細胞的增殖有抑制作用( P lt; 0.05) , 而陰性對照組與未轉染組的DCs具有強烈的激發T細胞增殖的能力( P lt; 0. 05) 。結論 NF-κB decoy ODN 轉染DCs 可能通過CD86 的表達降低顯著抑制抗原特異性T細胞活化, 該改良的DCs 有可能用于哮喘的免疫治療。