目的探討固體脂質納米粒(solid lipid nanoparticles,SLNs)增強白藜蘆醇(resveratrol,Res)促BMSCs體外成骨分化的效果,為骨穩態失衡疾病的治療提供一種方法。 方法 通過高溫乳化-低溫固化法制備Res-SLNs,然后將分離培養的第2~3代SD大鼠BMSCs與不同濃度(0、0.1、1、5、10、20 μmol/L)Res和Res-SLNs共培養,通過細胞計數試劑盒 8(cell counting kit 8,CCK-8)和活/死細胞染色檢測Res和Res-SLNs對BMSCs細胞活性的影響;通過成骨誘導分化后的ALP染色和茜素紅S(alizarin red S,ARS)染色檢測Res和Res-SLNs對BMSCs成骨分化的影響,并確定用于基因檢測的Res-SLNs最適濃度;通過抗骨鈣素(osteocalcin,OCN)免疫熒光染色和實時熒光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,RT-qPCR)檢測Res和Res-SLNs對BMSCs成骨相關基因(ALP和OCN)的影響。 結果活/死細胞染色示,Res和Res-SLNs各濃度組內的死細胞數量無明顯差異;CCK-8檢測示,濃度為20 μmol/L時,Res組BMSCs活性顯著降低(P<0.05);而濃度對Res-SLNs活性無影響(P>0.05)。成骨分化誘導后兩組ALP和ARS染色強度均呈濃度依賴性,Res組和Res-SLNs組ALP陽性染色面積百分比和礦化結節面積百分比分別在10 μmol/L和1 μmol/L濃度時達最大值(P<0.05),然后逐漸減小;確定Res-SLNs最適濃度為1 μmol/L。成骨誘導分化培養14 d OCN免疫熒光染色和RT-qPCR檢測示Res-SLNs組OCN表達量及ALP、OCN mRNA相對表達量均顯著高于Res組(P<0.05)。 結論SLNs包封處理可以提高Res促進成骨的藥物效果,在更低濃度達到BMSCs成骨分化的最佳效果,有望用于骨穩態失衡疾病的治療。
目的探討改良脛骨橫向骨搬運術結合萬古霉素磷酸鈣骨水泥局部填充覆蓋治療糖尿病足(diabetic foot,DF)的臨床療效。 方法 回顧分析2019年10月—2021年12月采用改良脛骨橫向骨搬運術結合萬古霉素磷酸鈣骨水泥局部填充覆蓋治療的22例DF患者臨床資料。其中男13例,女9例;年齡41~74歲,平均61.3歲。糖尿病病程8~30年,平均12.5年;DF病程10~42 d,平均28.2 d。Wagner分級:3級2例、4級20例。患者雙下肢均行CT血管造影檢查,患肢血管有不同程度狹窄,血運較差。術前患足皮溫為(28.27±0.91)°C,踝肱指數(ankle brachial index,ABI)為0.42±0.11,疼痛視覺模擬評分(VAS)為(7.7±0.6)分。術前DF潰瘍范圍為2.5 cm×2.0 cm~3.5 cm×3.0 cm。術前及術后3個月記錄并比較患足皮溫、ABI、VAS評分及皮膚創面愈合情況。 結果術后患者均獲隨訪,隨訪時間3~18個月,平均10.5個月。1例Wagner 4級患者術后感染未見明顯好轉,并有進一步惡化趨勢,最終于術后22 d行左側小腿截肢術。余21例患者術后恢復良好,術后1個月拆除外固定架,術后3個月創面愈合,隨訪期間無原位及其他部位潰瘍復發;術后3個月患足皮溫為(31.76±0.34)°C,ABI為0.94±0.08,VAS評分為(2.1±0.3)分,均較術前顯著改善,差異有統計學意義(t=25.060,P<0.001;t=32.412,P<0.001;t=–51.746,P<0.001)。 結論改良脛骨橫向骨搬運術結合萬古霉素磷酸鈣骨水泥局部填充覆蓋可有效改善DF患者患肢血供,促進創面愈合,提高治療效果。