目的 探討一種用于觀察肌腱膠原纖維束及周圍腱內膜形態與組分分布的快速組織學制片方法。方法 以豬趾淺屈肌腱組織為例，行冰凍切片，片厚 6 μm。大體觀察切片完整性，HE 染色觀察組織完整性與冰晶形成情況。然后，將切片分為 5 組，A 組行過碘酸雪夫（Priodic acid-Shiff，PAS）染色，B 組行 Masson 染色，C 組行網狀纖維染色，D 組行Ⅲ型膠原免疫組織化學和免疫熒光染色，E 組切片經 65℃ 烘烤 10 min 后行 Masson 染色。觀察各組肌腱膠原纖維束與周圍腱內膜組分分布情況。結果 大體觀察切片連續均勻；HE 染色見組織整體結構完整清晰，無冰晶空隙形成，但無法觀察到膠原纖維束與周圍腱內膜組分分布情況。A、B、C 組肌腱組織整體單一染色，無法辨認膠原纖維束與周圍腱內膜組分分布；D 組周圍腱內膜單獨弱顯色，兩組分能差異化染色，但對比度不明顯；E 組膠原纖維束與周圍腱內膜差異化染色，兩組分清晰可見。結論 豬趾淺屈肌腱冰凍切片后，通過 65℃ 烘烤 10 min 聯合 Masson 染色方法可以快速準確顯示膠原纖維束與周圍腱內膜組分分布形態學表征。
目的優化人原代胰腺導管癌（PDAC）細胞及腫瘤相關成纖維細胞（CAFs）的分離及培養方法，驗證 CAFs 對原代 PDAC 細胞的體外生長以及其對高度免疫缺陷模型 NOG 小鼠體內成瘤的影響，以探索人源性異種移植瘤（PDX）模型構建的新方法。方法首先原代培養手術切除的 PDAC 組織。以原代 PDAC 細胞單獨培養為對照，觀察 CAFs 和原代 PDAC 細胞共培養對 PDAC 細胞傳代生長活性的影響。最后在 NOG 小鼠肩胛部注射混合培養的原代 PDAC 細胞和 CAFs，觀察 PDX 模型建模情況。結果原代 PDAC 細胞在體外單獨培養傳代少，均在 5 代及以內停止生長；與 CAFs 共培養可促進原代 PDAC 細胞生長活性，可穩定傳至 10 代以上。NOG 小鼠體內注射混合細胞（原代 PDAC 細胞+CAFs）建模 2～3 周即可形成腫瘤，而注射 CAFs 無腫瘤形成。混合細胞法建模有 13 例（92.9%）成瘤，單一細胞法有 9 例（64.3%）成瘤，可能因為樣本量少，二者成瘤率比較差異無統計學意義（P=0.167）；并且腫瘤細胞注射后 2、4、6、8 周時混合細胞法建模的腫瘤體積均明顯大于對應觀察時間點單一細胞法建模的腫瘤體積（P<0.01）。結論CAFs 對原代 PDAC 細胞生長傳代具有促進作用，原代 PDAC 細胞與 CAFs 共培養法可顯著提高 PDAC 原代培養穩定傳代，原代 PDAC 細胞與 CAFs 混合培養的細胞注射可提高 NOG 小鼠 PDX 建模成功率。