2019 年底爆發的新型冠狀病毒(SARS-CoV-2)是一種新發現的人類高致病性冠狀病毒。據調查其和嚴重急性呼吸綜合征冠狀病毒(SARS-CoV)具有一定的相似性。血管緊張素轉換酶2(ACE2)是 SARS-CoV 感染細胞的受體,并且可能也是 SARS-CoV-2 的功能受體。目前發現 SARS-CoV 可通過刺突蛋白與 ACE2 結合侵入細胞,同時 ACE2 在炎癥性肺疾病的病程中也起到了重要作用。因此 ACE2 在 SARS 及新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)中的可能作用值得討論。本文簡要總結了 ACE2 在 SARS 中的作用,討論了 ACE2 在 COVID-19 中可能的作用及感染其他器官的潛在風險,最后針對 ACE2 的功能探討了 SARS 的治療策略,以期為臨床治療 COVID-19 提供借鑒和啟示。
最近,一種由新型冠狀病毒 2019-nCoV 引起的 COVID-19 肺炎疫情在全球暴發。為了更好地控制疫情的蔓延,亟需對 2019-nCoV 的來源、傳播和致病機制進行深入研究。刺突(spike)蛋白是冠狀病毒表面特有的結構蛋白,包含了冠狀病毒自然演化的重要信息,并在病毒識別和入侵人體細胞的過程中起到關鍵作用。最近十幾年,在對與人類密切相關的冠狀病毒的研究中,spike 蛋白一直是最為重要的研究對象之一。而在 COVID-19 肺炎疫情暴發后,2019-nCoV 病毒表面的 spike 蛋白也迅速成為研究的焦點。本文旨在通過介紹 spike 蛋白相關研究,以期為當前疫情的防控以及 COVID-19 的診斷和治療提供合理的研究思路。
新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)疫情在全球的肆虐,不僅對公眾的健康造成了重大威脅,也對全球衛生醫療系統和社會經濟發展帶來了巨大沖擊。因此,加快疫苗和抗體藥物的研發,為人們提供有效的保護和治療措施,成為廣大科學研究人員和醫療機構的首要任務。目前全球已有多款新冠疫苗和抗體藥物進入臨床研究或獲批上市,本文對多款利用基因工程技術研發的基于S蛋白的新冠疫苗和抗體(包括亞單位疫苗、病毒載體疫苗、DNA疫苗、mRNA疫苗以及一些中和抗體藥物)進行了簡要闡述,同時也對疫苗和抗體藥物的未來發展進行了探討。
目的觀察過表達嚴重急性呼吸綜合征冠狀病毒2型(SARS-CoV-2)刺突蛋白(S-蛋白)對人視網膜色素上皮(RPE)細胞生長的抑制作用。方法構建SARS-CoV-2 S-蛋白基因片段表達質粒(p3xflag-S),并轉染至ARPE-19、HEK293細胞內,應用DNA測序進行鑒定,并對表達的標簽蛋白進行蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測。HEK293細胞分為細胞1、2、3、4,分別轉染GFP11質粒和空載質粒、GFP1-10質粒和空載質粒、GFP11質粒和pCMV-HA-ACE2質粒、GFP1-10和p3xflag-S質粒。將細胞1與細胞2(對照組1)、細胞2與細胞3(對照組2)、細胞3與細胞4(觀察組)、細胞1與細胞2、3、4(對照組3)混合共培養。明場顯微鏡和熒光顯微鏡觀察細胞融合情況。將RPE細胞分為對照組、過表達S-蛋白組。流式細胞儀檢測RPE細胞周期;計數試劑盒8(CCK-8)檢測RPE細胞增生水平;Western blot檢測RPE細胞中S-蛋白表達水平。組間比較行最小顯著差法t檢驗。結果DNA序列測定結果顯示,S-蛋白cDNA與標簽蛋白融合;Western blot檢測結果顯示,與未轉染p3xflag-S質粒的細胞比較,轉染HEK293細胞中S-蛋白相關表達量升高。明場顯微鏡下可見大而多核的融合細胞團;熒光顯微鏡下可見融合細胞內有多個細胞核且呈明顯綠色熒光。Western blot檢測結果顯示,與未轉染p3xflag-S質粒的RPE細胞比較,轉染p3xflag-S質粒的RPE細胞中S-蛋白相關表達量升高。CCK-8增生分析結果顯示,與對照組比較,過表達S-蛋白組RPE細胞增生能力顯著降低,差異有統計學意義(t=22.70、16.75、23.38,P<0.000 1)。流式細胞儀檢測結果顯示,對照組、過表達S-蛋白組G1期細胞分別為41.1%、67.0%;與對照組比較,過表達S-蛋白組G1期細胞明顯升高,差異有統計學意義(t=4.76,P=0.018)。過表達S-蛋白組細胞凋亡率較對照組明顯增加,差異有統計學意義(t=4.91,P=0.008)。結論過表達SARS-CoV-2 S-蛋白可抑制RPE細胞生長活性。