目的觀察人胎盤MSCs(placental-derived MSCs,PMSCs)對異基因小鼠皮膚移植的影響。 方法取自愿捐贈人胎盤胎兒側組織,分離培養PMSCs,并以第3代細胞進行實驗。選擇30只6~8周齡C57BL/6小鼠作為受體,背部制作直徑12 mm圓形皮膚缺損;以1~2日齡Vr∶CD1(ICR)乳鼠皮膚作為供體,建立小鼠異基因皮膚移植排斥模型。將30只受體小鼠隨機分為3組,每組10只。A組為自體皮膚移植組,B組為同種異體皮膚移植+ PBS尾靜脈注射組,C組為同種異體皮膚移植+人PMSCs(1 × 105個/只)尾靜脈注射組。觀察各組移植皮片成活情況,檢測術后7 d受體小鼠血液白細胞數量、腹腔液巨噬細胞活化率,采用ELISA、RT-PCR法檢測受體小鼠血液、脾臟中IL-4、IL-17及IFN-γ表達量的變化。 結果A、B、C組移植皮片成活時間分別為(58.33 ± 4.04)、(3.80 ± 0.92)、(6.80 ± 0.82) d,A組明顯優于B、C組,C組優于B組,差異均有統計學意義(P lt; 0.05)。術后7 d,A、B、C組小鼠血液白細胞計數分別為(6.32 ± 0.45)× 109/L、(7.45 ± 0.52)× 109/L、(6.35 ± 0.39)×109/L ,A、C組顯著低于B組(P lt; 0.05),A、C組間差異無統計學意義(P gt; 0.05)。A、B、C組小鼠巨噬細胞活化率分別為6.87% ± 2.40%、7.84% ± 0.44%、15.98% ± 2.87%,C組顯著高于A、B組(P lt; 0.01)。ELISA檢測示,3組血液中IL-4含量差異無統計學意義(P gt; 0.05);C組IL-17和IFN-γ含量顯著低于B組(P lt; 0.05);B組IFN-γ含量明顯高于A組(P lt; 0.05);其余各指標組間比較差異均無統計學意義(P gt; 0.05)。RT-PCR檢測示, B、C組IL-4、IL-17和IFN-γ mRNA相對表達量與A組比較差異均有統計學意義(P lt; 0.05);C組IL-4和IFN-γ mRNA相對表達量明顯低于B組(P lt; 0.05),IL-17 mRNA相對表達量與B組比較差異無統計學意義(P gt; 0.05)。 結論異基因小鼠皮膚移植后尾靜脈注射人PMSCs可抑制免疫排斥反應,其機制可能與減少IL-17及IFN-γ等相關細胞因子分泌有關。
目的應用液氮冷凍方法建立局灶性皮質發育不良(Focal cortical dysplasia,FCD)的Wistar乳鼠模型。分析FCD模型的腦電圖(EEG)及核磁共振(MRI)特點,為進一步探討人類FCD診斷及治療提供理論及實驗依據。 方法取Wistar孕鼠產后1 d乳鼠70只為實驗對象,隨機分為實驗組(n=60)和對照組(n=10)。液氮冷凍新生Wistar乳鼠大腦皮層,實驗組依據冷凍時間不同分為30、60和90 s組3個實驗亞組(n=20)。第8周監測實驗動物發作間期EEG并行頭顱MRI檢查,之后Wistar乳鼠腦組織灌注取材,行HE染色光鏡檢查。 結果實驗組乳鼠EEG癲癇樣放電率平均為41.6%,可見棘波、棘慢波頻繁發放;MRI陽性表現為長T1、長T2信號;腦組織切片HE染色見大腦皮層層狀結構和柱狀結構紊亂,存在形態異常神經元和氣球樣細胞。實驗組和對照組之間差異有統計學意義(P<0.05),3個實驗亞組之間無統計學差異(P>0.05)。 結論液氮冷凍Wistar乳鼠大腦皮層方法可成功建立FCD Ⅲ d型動物模型,呈特異性的EEG及MRI表現,對診斷與治療人類FCD具有重要價值。
目的 建立乳鼠心肌細胞下腔靜脈壁移植的模型并進行相關的研究。 方法 采用健康、雌性、近交系 F344 大鼠 12 只(150±20)g 和生后 2 d 乳鼠。將雌性大鼠隨機分為 A、B 兩組,每組 6 只。A 組為乳鼠心肌細胞移植組;B 組為注射細胞培養液的對照組。建立乳鼠心肌細胞下腔靜脈壁移植的模型。評估術后 21 d 移植到靜脈壁的心肌細胞的收縮性,然后獲取A 組心肌細胞移植段的靜脈和B 組靜脈標本進行組織學檢測。 結果 通過主動脈的搏動來記數受體大鼠的心率為(172±21)次/分。下腔靜脈細胞移植處可見明顯的節律性搏動為(141±47)次/分,顯著低于主動脈的搏動節律(P=0.03)。下腔靜脈在主動脈夾閉后 1~3 min 仍然能夠自主、節律性搏動,搏動節律為(88±44)次/分,與主動脈夾閉前的搏動節律差異有統計學意義(P=0.000 5)。三者之間成正相關。HE 染色顯示術后 3 周時 6 只接受心肌細胞移植的大鼠下腔靜脈壁周圍可見心肌組織而 6 只僅注射了培養液的對照組大鼠下腔靜脈壁周圍卻沒有。移植的乳鼠心肌細胞在受體內行形成致密的沿血管長軸方向排列的心肌束,這些心肌束呈環形平行于靜脈壁。所有樣本移植部位的靜脈壁均正常。 結論 乳鼠心肌細胞移植到下腔靜脈壁后能夠生長、成熟并具有自主搏動性。