目的觀察丁基苯酞（NBP）對過氧化氫（H2O2）誘導下視網膜Müller細胞凋亡的保護作用。方法體外培養的人視網膜Müller細胞分為正常對照組、模型組（H2O2組）、實驗組（H2O2+NBP組）。H2O2組、H2O2+NBP組細胞培養液中加入200 μmol/L H2O2刺激2 h后，H2O2組更換為完全培養基，H2O2+NBP組更換為含1 μmol/L NBP的完全培養基。正常對照組為常規培養細胞。蘇木精-伊紅（HE）染色觀察各組細胞形態改變；噻唑藍（MTT）比色法檢測NBP作用24、48 h后各組細胞活性；Hoechst33258染色觀察各組細胞凋亡情況；LIVE/DEAD®細胞活性/細胞毒性試劑盒檢測各組細胞生存力；二氯熒光素二乙酸酯（DCFH-DA）+內質網（ER）紅色熒光探針（ER-Tracker Red）雙染色觀察各組細胞ER中活性氧（ROS）的表達水平。單因素方差分析聯合Dunnett統計學方法進行數據分析。結果HE染色結果顯示，H2O2+NBP組細胞數量較H2O2組增加。MTT比色法檢測結果發現，NBP作用24、48 h后，正常對照組與H2O2組、H2O2組與H2O2+NBP組細胞生存力比較，差異均有統計學意義（t=28.96、3.658、47.58、20.33，P＜0.001、0.022）。Hoechst33258結果顯示，H2O2+NBP組細胞少數細胞核邊集呈新月狀且細胞核碎裂減少，其余細胞藍色熒光均勻。LIVE/DEAD®細胞活性/細胞毒性試劑盒檢測結果顯示，H2O2組中呈紅色熒光的死亡細胞明顯增多，呈綠色熒光的活細胞數量顯著減少；H2O2+NBP組呈綠色熒光的活細胞數量增多，呈紅色熒光的死亡細胞減少。DCFH-DA+ER-Tracker Red雙染色結果顯示，H2O2組細胞中綠色熒光強度明顯增強；H2O2+NBP組細胞中綠色熒光強度較H2O2組明顯降低。結論NBP通過抑制ROS的產生緩解H2O2誘導的人視網膜Müller細胞凋亡。
目的觀察丁基苯酞（NBP）對H2O2誘導下RPE細胞凋亡的保護作用。方法以人ARPE-19細胞系為實驗細胞，并將其分為對照組、模型組及NBP組。對照組單純采用完全培養基培養細胞。模型組采用200 μmol/L的H2O2刺激細胞2 h，換液后給予完全培養基培養細胞。NBP組采用200 μmol/L的H2O2及1 μmol/L的NBP共同培養細胞2 h，換液后給予完全培養基聯合1 μmol/L的NBP繼續培養細胞。采用MTT法檢測細胞受到氧化應激刺激后的細胞活力；HE染色對RPE細胞形態進行觀察；Hoechst33258染色觀察RPE細胞凋亡形態；線粒體膜電位檢測試劑盒（JC-1）觀察細胞膜電位改變及細胞早期凋亡變化；2,7-二氯二氫熒光素二乙酸酯（DCFH-DA）染色觀察細胞內ROS生成堆積情況；細胞免疫熒光和Western blot分析NBP對血紅素氧合酶1（HO-1）表達的影響。結果MTT法檢測結果顯示，細胞培養24、48 h，對照組（t=17.710、13.760，P＜0.000 1、＜0.000 1）、NBP組（t=4.857、9.225，P=0.000 7、P＜0.000 1）細胞生存力均較模型組更強，差異均有統計學意義。HE染色及Hoechst33258染色觀察發現，與對照組比較，模型組細胞數量明顯變少，細胞形態不完整；與模型組比較，NBP組細胞數量明顯增多，細胞形態更好。JC-1法檢測結果顯示，模型組凋亡細胞數較對照組明顯增多，NBP組凋亡細胞數較模型組明顯減少。DCFH-DA染色觀察發現，模型組細胞內ROS堆積較對照組更多，NBP組細胞內ROS堆積較模型組更少。免疫染色觀察發現，NBP組細胞的HO-1熒光強度較對照組明顯增高，差異有統計學意義（t=10.270，P=0.000 5）。Western blot檢測結果顯示，NBP以時間依賴性的方式上調HO-1的表達水平；NBP作用4、8、12 h時HO-1相對表達量較0 h時呈明確升高趨勢，差異有統計學意義（F=164.91，P＜0.05）。結論氧化應激損傷可下調RPE細胞的生存力并誘導其出現凋亡，NBP通過上調HO-1的表達，有效提高RPE細胞抗氧化能力，減輕細胞損傷并抑制細胞凋亡。